供者表达活化性杀伤细胞免疫球蛋白样受体对造血干细胞移植预后的影响

目的 观察供者表达活化性杀伤细胞免疫球蛋白样受体（aKIR）对受者造血干细胞移植（HSCT）预后的影响。方法 1996年至2001年共行亲缘性人类白细胞抗原（HLA）全相合骨髓移植59例，以序列特异性引物多聚酶链反应法（SSP-PCR）检测供者aKIR的表型。分析供者表达aKIR对受者移植后病毒、细菌和真菌感染及出血、复发、存活情况的影响。结果 供者表达aKIR与受者移植后出血、病毒及细菌感染发生的概率无明显相关性；当供者表达KIR3DS1表型时，发生真菌感染概率增高（X^4．804，P=0．028）。供者表达aKIR对受者HSCT后存活率和白血病复发率均无明显影响。结论 亲缘性HLA全相合HSCT中，供者表达aKIR并不能改善受者的移植效果。     

广东汉族人群HLA-Cw多态性及单体型分析

目的检测广东汉族人群HLA．Cw及HLA-A、B、DRB1基因频率，分析该人群HLA-Cw等位基因多态性及其单体型特点。方法骨髓移植供者185例，抗凝血提取DNA，半量全自动PCR-RSSO分型检测HLA-A、B、Cw、DRB1基因型。结果在分辨水平检出Cw等位基因11个，其中分布频率较高的依次为：Cw*03(0．2580)、Cw*07(0．1887)、Cw*01(0．1732)、Cw*08(0．1070)。统计分析呈现显著连锁不平衡的HLA-Cw．A单体型7个，HLA-Cw-B单体型20个，HLA—Cw．DRB1单体型10个。结论广东汉族群体HLA-Cw基因具有较为丰富的多态性，其与HLA-A、B、DRB1间连锁不平衡单体型具有地区性遗传特征。     

白细胞介素1受体竞争蛋白增加生长因子撤离后急性髓系白血病细胞凋亡

增殖调节失常和程序性死亡(凋亡)调节紊乱是急性髓系白血病发展的一个重要病理环节,其中对细胞因子的反应改变,使其连续进入细胞增殖周期是一个重要原因.本文探讨了撤离生长因子和用白细胞介素1受体竞争蛋白(IL-1RAP)阻断对白细胞介素1(IL-1)应用后对急性髓系白血病(AML)细胞增殖和凋亡的影响.一、IL-1对AML增殖的刺激作用是随着外源性IL-1浓度的增加而增强,当在1×10~6/ml细胞中加入500ng IL-1时,达到最大增殖倍数6.8倍.二、彻底洗掉IL-1再培养3天,IL-1最高剂量组自发性凋亡的比例最高,为48%,     

回输体外培养造血-免疫祖细胞加快亚去髓剂量化疗后造血-免疫功能的恢复

有相当一部分肿瘤可以通过提高化疗药物的剂量来提高治疗效果.然而,化疗强度的提高对机体造血-免疫系统的损伤也加重,造血-免疫功能的损伤会招致反复感染和残存瘤细胞的扩散,反而造成不利.本研究意在建立一种能加快高剂量化疗后造血.免疫功能恢复的方法,结果表明:有序的应用GM-CSF、IL-2、抗肿瘤-抗T细胞双功能抗体建立了培养人造血-免疫祖细胞的培养体系,经过3天的培养GM-CSF扩增了5.8倍,对癌细胞的特异性杀伤提高了3.4～5.7倍.将培养后的造血-免疫祖细胞回输给接受了亚去髓化疗剂量的病人(n=19),同时应用G-CSF.化疗方案:乳腺癌、鼻咽癌:5-FU 7500mg/M~2、CF 1200mg/M~2、VP 900mg/M~2、cDDP 150mg/M~2、TAM 500mg/M~2.肺癌:CTX3600mg/M~2、ADM 150mg/M~2、VP16 900mg/M~2、cDDP150mg/M~2,骨肉瘤:IFO 12000mg/M~2、Mesna 6000mg/M~2、VP16 900mg/M~2、CDDP 150mg/M~2.中性粒细胞绝对数(ANC)维持<100/μl的天数和恢复>500/μl的天数,与未处理干细胞回输组相比,分别缩短了5.9天和5.7天(p<0.05,P<0.05)。用此培养体系培养的造血祖细胞回输对血小板的恢复无影响.抗菌素应用和住空气层流室时间,与未处理干细胞回输组相比,分别减少了5.6天和8.9天(P<0.005,p<0.05)。患者巨噬细胞吞噬功能恢复时间和对卡介     

线粒体通路和死亡受体通路在中华眼镜蛇毒组分诱导KG1a细胞凋亡中的作用

目的研究线粒体通路和死亡受体通路在中华眼镜蛇毒组分(naja naja actra venom component,NNAVC)诱导KG1a细胞凋亡过程中的作用。方法以人急性髓系白血病细胞株KG1a细胞为研究对象,采用Annexin V-FITC/PI荧光染色法进行凋亡细胞的形态学观察,流式细胞仪检测细胞凋亡率,分光光度法检测Caspase-9、Caspase-8和Caspase-3的活性,ELISA法检测胞质内细胞色素C的表达水平,流式细胞仪分析TRAIL死亡受体(DR4、DR5)和诱骗受体(DcR1、DcR2)的改变。结果 NNAVC作用后,荧光显微镜下可见明显的凋亡细胞,细胞凋亡率随药物作用浓度的增加而升高;Caspase-9、Caspase-8和Caspase-3蛋白被激活,胞质内细胞色素C的表达明显增加;流式细胞仪检测结果显示,NNAVC具有降低死亡受体DR4和诱骗受体DcR1的表达率,而提高DR5和DcR2的表达水平的作用。结论线粒体凋亡通路和死亡受体通路均参与NNAVC诱导KG1a细胞凋亡的过程,这可能是NNAVC发挥抗白血病作用的机制之一。     

小鼠非清髓性半相合骨髓移植造血的重建

目的：探讨在非清髓性预处理条件下,纯化的供鼠NK细胞对MHC半相合小鼠骨髓移植（BMT）造血重建的影响。 方法：以CB6F₁^H-2d/b（BALB/c^H-2d×C57BL／6^H-2b）小鼠为受者,C57BL／6^H-2b小鼠为供者。60只受者小鼠根据不同照射剂量及不同NK细胞输注量随机分为10组,每组6只,经9.0、7.0、6.0 Gy 3个剂量⁶⁰Co照射。经9.0 Gy照射后分为单纯照射组（Ⅰ）、半相合BMT组（Ⅱ）。经7.0 Gy照射后分为单纯照射组（Ⅲ）、半相合BMT组（Ⅳ）、NK细胞移植1组（Ⅴ）和NK细胞移植2组（Ⅵ）。经6.0 Gy照射后分为单纯照射组（Ⅶ）、半相合BMT组（Ⅷ）、NK细胞移植1组（Ⅸ）和NK细胞移植2组（X）。在照射后4 h移植供鼠骨髓细胞,其中NK细胞移植1组（Ⅴ、Ⅸ）每只受鼠移植前输注纯化供鼠NK细胞1×106,NK细胞移植2组（Ⅵ、X）每只受鼠移植前输注供鼠NK细胞5×10⁵。以血常规、体重、生存期等变化为指标,观察60 d。 结果：①生存期：Ⅰ组为（5.83±0.98）d,其他组小鼠生存期均大于60 d。②移植后第10天时白细胞及血小板计数：Ⅴ、Ⅵ组WBC和PLT分别为（1.05±0.30）×10⁹•L^-1、（53.50±12.11）×10⁹•L^-1及（0.95±0.26）×10⁹•L^-1、（47.17±11.82）×10⁹•L^-1,明显高于Ⅲ、Ⅳ组（P<0.01）;Ⅸ、X组WBC和PLT分别为（0.98±0.34）×10⁹•L^-1、（50.67±12.58）×10⁹•L^-1及（0.88±0.29）×10⁹•L^-1、（45.33±14.36）×10⁹•L^-1,明显高于Ⅶ、Ⅷ组（P<0.05）。 结论：MHC半相合BMT小鼠移植前输注纯化的供鼠NK细胞促进其造血重建。     

EGCG通过下调Bcl-2诱导KG1A白血病细胞凋亡宰

目的 研究EGCG对KGIA白血病细胞的作用,探讨其作用机制.方法 使用人的白血病细胞株KG1A细胞.MTT细胞毒性测定评价对白血病细胞的作用,使用annexin v染料标记细胞,应用流式细胞仪检测细胞凋亡.RT-PCR检测KGIA细胞Bcl-2家族mRNA的表达.结果 EGCG引起KG1A细胞活性的下降.ECA2G诱导KG1A细胞凋亡.且呈时间依赖性.EGCG诱导凋亡与下调Bcl-2和Bcl-xl有关.结论 EGCG可以通过下调Bcl-2和Bcl-xl诱导KG1A细胞凋亡.这些结果有助于提供新的有效联合方案,尤其是针对复发难治白血病的治疗.     

KG1a细胞体外诱导人外周血T细胞杀伤活性和TCR VβT细胞增殖的研究

【摘　要】　目的　了解急性髓系白血病KG1a细胞体外诱导人外周血T细胞的特异性细胞毒作用和T细胞受体(TCR) Vβ谱系表达和克隆性情况。方法　分别以Jurkat和Raji细胞作为阳性和阴性对照,建立TCR Vβ谱基因扫描技术,并用其检测5例健康个体T细胞克隆表型。采用混合淋巴细胞/肿瘤细胞培养方法,以照射后的KG1a细胞作为刺激原体外诱导外周血单个核细胞增殖,应用LDH释放法检测不同效靶比时诱导前后T细胞杀伤KG1a细胞的活性,同时利用基因扫描技术分析诱导后TCR Vβ亚家族的克隆性增殖特点。结果　基因扫描显示5例健康人全部TCR Vβ谱型均呈高斯(钟型)分布,各亚家族表达频率接近,但呈现不同的多态性和长度分布。KG1a细胞可以诱导出呈单克隆、寡克隆或寡克隆趋势生长的亚家族T细胞,并具有特异性识别和杀伤KG1a细胞的功能。结论　KG1a细胞在体外可诱导T细胞呈克隆性增殖,此优势增殖的克隆性T细胞具有特异性细胞毒作用,对KG1a细胞具有选择性杀伤作用。     

561例血液病患者染色体核型分析

目的探讨血液病患者有关核型改变及其意义。方法抽取骨髓标本2～5ml,采用骨髓细胞直接法、24h短期培养法制备染色体标本,用G显带技术进行核型分析。结果 561例血液病患者中,常规细胞遗传学发现异常核型282例(50.3%),其中结构异常116例(20.7%),数目异常84例(15.0%),同时有结构异常和数目异常82例(14.6%)。不同类型血液病患者染色体检测结果不同,在急性髓系白血病(AML)、急性淋巴细胞白血病(ALL)、慢性粒细胞白血病(CML)、骨髓增生异常综合症(MDS)、再生障碍性贫血(AA)、骨髓增殖性疾病(MPD)、淋巴瘤、血小板减少症中异常核型分别为56.5%(109/193)、44.9%(57/127)、74.7%(62/83)、56.7%(34/60)、3.7%(1/27)、0%(0/15)、72.7%(8/11)、0%(0/5),在急性混合细胞白血病、特发性血小板减少性紫癜(ITP)、多发性骨髓瘤(MM)、慢性粒单细胞白血病(CMML)、淋巴瘤白血病、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、纯红再障、恶性组织细胞病等较少患者中,异常核型分别为25.0%(2/8)、0%(0/8)、20%(1/5)、0%(0/5)、100%(4/4)、40%(2/5)、0%(0/3)、100%(2/2)。M2伴t(8;21),M3伴t(15;17),M4伴inv(16)、t(16;16),ALL伴t(9;22)CR率分别为88.2%、94.7%、80%、45.5%。结论染色体核型分析在恶性血液病诊断、分型、预后判断和指导治疗中具有重要意义。     

应用伊曲康唑预防化疗后继发真菌感染的疗效

目的探讨应用伊曲康唑预防恶性血液病化疗后继发真菌感染的疗效。方法将入院治疗的114例恶性血液病患者随机分为对照组及预防用药组,观察2组发生真菌感染的次数。结果用伊曲康唑预防组,52例仅2例并发真菌感染,继发真菌感染率为仅为3.8%。而对照组62例中,8例发生真菌感染,真菌发生为12.8%,两组比较,统计学有显著差异(P<0.05)。结论化疗前口服伊曲康唑可以减少恶性血液病患者化疗后并发真菌的感染率。