shRNA靶向autotaxin对人胃癌细胞AGS裸鼠移植瘤的生长的抑制效应

目的 探讨靶向autotaxin的短发夹RNA(shRNA)对人胃癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用.方法 将已构建成功的靶向autotaxin及非特异性短发夹RNA的质粒载体pSUPER-ATX、pSUPER-mock(阴性对照)和空白质粒pSUPER-control转染胃癌AGS细胞株,并将获得的相应各组细胞与野型细胞(WT)分组种植到裸鼠皮下,以建立人胃癌裸鼠移植瘤对比模型,随后观察监测各组裸鼠的肿瘤生长情况,HE染色检测移植瘤及各器官形态学改变.第8周裸鼠处死并剥离出肿瘤组织,HE染色观察肿瘤细胞的形态,免疫组化及Western blot方法检测autotaxin蛋白及相关蛋白MMP-2、MMP-9的表达.结果 各组裸鼠的内脏未受到明显的毒害和损伤.第7周pSUPER-ATX组裸鼠移植瘤的体积和质量与其余组相比均有显著性缩小(P＜0.05),抑制率大约在50％左右.与野型组、阴性对照组及空白质粒组相比,pSUPER-ATX组移植瘤的autotaxin、MMP-2、MMP-9表达均有显著性下调(P＜0.05).并且autotaxin和MMP-2的表达有明显相关性(r=0.869,P＜0.01).而阴性对照组pSUPER-mock的上述指标与野型组及空白对照组相比,其差异无统计学意义.结论 所构建的靶向autotaxin的shRNA能够抑制人胃癌AGS细胞裸鼠移植瘤的生长.     

TCF7L2基因rs290487位点多态性与妊娠期糖尿病发病相关性的探讨

目的:探讨转录因子7类似物2 (TCF7L2)基因rs290487位点单核苷酸多态性(SNP)与妊娠期糖尿病(GDM)的关系.方法:采用病例对照研究方法,选取南山区无血缘关系的GDM孕妇70例作为病例组,正常妊娠孕妇70例作为对照组.提取所有受试者基因组DNA,用连接酶检测反应(LDR)分析TCF7L2基因rs290487位点基因型并进行相关分析.结果:深圳孕妇人群rs290487 3个基因型CC、CT和TT在病例组与对照组的频率分别为15.7％/12.9％、52.9％/47.1％、31.4％/40.0％,最少等位基因频率C在对照组和病例组为36.5％和42.2％,与妊娠期糖尿病有趋势上的相关性,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论:TCF7L2基因rs290487在深圳健康孕妇人群中与妊娠期糖尿病无相关性.     

甘草酸二铵对丙型肝炎病毒相关性淋巴瘤单核细胞PD-1表达的影响

目的 初步探究甘草酸二铵(DG)对丙型肝炎病毒相关性淋巴瘤(HCV-NHL)患者单核细胞PD-1表达的免疫调控作用.方法 从健康人、单纯丙型肝炎病毒(HCV)感染者和HCV-NHL患者的外周血中分离外周血单个核细胞(PB-MC),体外培养刺激后,应用流式细胞仪分析健康人、单纯HCV感染者和HCV-NHL患者CD14+ PD-1+细胞占CD14+总单核细胞的比例;HCV-NHL患者PBMC加入DG和阳性对照HCV核心抗原干预后较HCV-NHL空白对照CD14+ PD-1+细胞占CD14+总单核细胞比例的变化情况. 结果 与健康人比较,单纯HCV感染者和HCV-NHL患者CD14+ PD-1+/CD14+均明显升高,并且HCV-NHL患者较单纯HCV感染者升高明显,各组之间差异均有统计学意义(P＜0.05).HCV-NHL+ HCV核心抗原组CD14+ PD-1+/CD14+比例较HCV-NHL空白对照明显增加,而HCV-NHL+DG组CD14+ PD-1+/CD14+比例较HCV-NHL+ HCV核心抗原组明显降低,各组之间差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 HCV-NHL患者单核细胞程序性死亡通路激活增加,且程度重于单纯HCV感染,DG可以降低HCV-NHL患者单核细胞PD-1+的高表达.     

吡格列酮对2型糖尿病患者血清脂联素水平的影响

目的探讨吡格列酮对2型糖尿病患者血清脂联素水平及胰岛素抵抗的影响。方法将符合2型糖尿病诊断标准的60例患者随机分为治疗组和对照组各30例,均给予常规治疗,治疗组在常规治疗的基础上给予吡格列酮片。2组疗程均为12周,治疗前后分别检测空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、血脂(TG、TC、LDL-C、HDL-C)、空腹胰岛素(FINS)及脂联素(APN),计算胰岛素抵抗(IR)水平。结果治疗组治疗后FBG、HbA1c、TC、TG、LDL-C等指标均明显降低,IR明显改善,血浆APN水平显著升高,与对照组比较均有显著性差异(P均<0.05)。结论吡格列酮除改善血糖及IR外,还可使血浆APN水平升高。     

丝裂原激活蛋白激酶信号通路抑制剂对高糖培养视网膜微血管内皮细胞的影响

目的研究丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号通路抑制剂对高糖培养大鼠视网膜微血管内皮细胞(RMECs)的作用。方法体外培养RMECs,将细胞分为5组:空白组、模型组、SB203580(p38抑制剂)组、U0126(胞外调节蛋白激酶抑制剂)组和SP600125(应激活化蛋白激酶抑制剂)组,各抑制剂组加入相应抑制剂10μmol·L^-1预孵育1 h后,除空白组外,其他4组高糖处理24 h。以免疫荧光实验检测细胞中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)的表达分布,用实时荧光定量-聚合酶链式反应及免疫印迹法检测PPAR-γmRNA与蛋白的表达水平,流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位(MMP)。结果空白组、模型组、SB203580组、U0126组和SP600125组的PPAR-γmRNA表达量比值分别为1. 00±0. 01,0. 79±0. 06,1. 01±0. 04,1. 19±0. 11和0. 73±0. 12;这5组MMP分别为0. 40±0. 02,0. 22±0. 01,0. 41±0. 01,0. 45±0. 01和0. 21±0. 01。模型组与空白组比较,上述指标均显著降低,差异均有统计学意义(均P <0. 05);SB203580组和U0126组与模型组比较,上述指标均升高,差异均有统计学意义(均P <0. 05); SP600125组与模型组比较,差异均无统计学意义(均P> 0. 05);抑制剂组中,U0126组的上述指标升高最显著,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。PPAR-γ的蛋白水平变化与mRNA水平变化一致。结论在高糖环境中,抑制剂U0126可上调RMECs的PPAR-γ表达并减轻其线粒体损伤。     

清肺降浊方治疗重症肺炎痰热壅肺证患者的临床研究

目的 观察清肺降浊方对重症肺炎痰热壅肺证患者炎症反应和器官保护作用的影响.方法 选取上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院2017年9月-2019年9月收治的重症肺炎痰热壅肺证患者68例,随机分为西医组和中西医组,每组34例.西医组采取西医常规治疗,中西医组在西医常规治疗基础上口服或鼻饲清肺降浊方,1剂/d,7d为1个疗程.比较治疗前后2组患者临床疗效、肺炎严重指数(PSI)评分、急性生理与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHE Ⅱ)评分、炎症指标[C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、白细胞介素-6(IL-6)]、呼吸功能[氧合指数(PaO2/FiO2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)]、循环功能[收缩压(SBP)、乳酸(Lac)]、凝血功能[纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体(D-D)].结果 治疗后中西医组患者临床有效率高于西医组,但差异无统计学意义(P＞0.05).治疗后2组患者PSI评分、APACHEⅡ评分均较治疗前降低(P＜0.05),中西医组低于西医组(P＜0.05).治疗后2组患者CRP、PCT、IL-6,Lac、FIB、D-D水平均较治疗前降低(P＜0.05),中西医组患者CRP、PCT、IL-6、Lac水平低于西医组(P＜0.05).治疗后2组患者PaO2/FiO2较治疗前升高(P＜0.05),中西医组高于西医组(P＜0.05).治疗前及治疗后,2组患者SBP、PaCO2水平正常.结论 清肺降浊方联合西医治疗可改善重症肺炎痰热壅肺证患者病情严重程度,可能与其减轻患者炎症反应,改善呼吸和循环功能有关.     

静灵口服液和盐酸托莫西汀联合治疗儿童注意力缺陷多动障碍疗效观察

目的观察静灵口服液联合盐酸托莫西汀治疗儿童注意力缺陷多动障碍(ADHD)的临床疗效。方法将2015年6月至2016年10月期间收治的ADHD患儿67例,按照随机数字表法分为对照组34例,治疗组33例。对照组患儿单纯服用盐酸托莫西汀治疗,治疗组患儿在对照组基础上加用静灵口服液,两组患儿均治疗4周为1个疗程,共治疗3个疗程。观察两组患儿治疗后临床疗效(SNAP-Ⅳ评分)、Conner简明症状问卷(ASQ评分)及副反应量表(Tess)情况。结果两组患儿治疗后,治疗组总有效率为81.8%,明显优于对照组的58.8%,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。两组患儿治疗后,SNAP-Ⅳ、ASQ评分均较治疗前显著下降(P0.05),且治疗组下降程度优于对照组(P0.05)。在治疗期间,对照组有1例患儿出现头痛、腹痛、恶心呕吐、食欲下降,治疗组无1例发生不良反应,说明治疗组安全性高于对照组(P0.05)。结论静灵口服液联合盐酸托莫西汀治疗ADHD患儿临床疗效显著,安全性高,值得临床推广应用。     

基于TLR4/NF-κB通路探究益气活血清热解毒方对动脉粥样硬化模型大鼠的干预效果

目的研究基于Toll样受体4（TLR4）/核因子κB（NF-κB）通路探究益气活血清热解毒方对动脉粥样硬化模型大鼠的干预效果。 方法将60只大鼠随机分为正常组10只、其余50只大鼠建立动脉粥样硬化模型作为动脉粥样硬化组,喂养4周后每组随机抽样2只,取主动脉经HE染色光镜观察,以发现动脉粥样硬化斑块为建模成功,建模成功后将动脉粥样硬化组剩余48只大鼠分为模型组（9只）、辛伐他汀组（9只）、益气活血组（10只）、清热解毒组（10只）、益气活血清热解毒中药组（10只）5个亚组。建模成功后益气活血组、清热解毒组、益气活血清热解毒中药组分别给予药液9 ml/（kg·d）体重灌胃,辛伐他汀片组给予辛伐他汀药液5 ml/（kg·d）体重灌胃,正常组和模型组给予生理盐水9 ml/（kg·d）,以上各组均连续灌胃8周。对比分析各组的血脂指标甘油三脂（TG）、血清总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白（HDL-C）、超敏C反应蛋白（Hs-CRP）、白介素-6（IL-6）水平及TLR4/NF-κB通路蛋白表达量。 结果与正常组相比,模型组、辛伐他汀组、益气活血组、清热解毒组、益气活血清热解毒中药组TG、TC、LDL-C、Hs-CRP、IL-6水平升高,HDL-C水平降低,差异具有统计学意义（P＜0.05）;与模型组相比,辛伐他汀组、益气活血组、清热解毒组、益气活血清热解毒中药组TG、TC、LDL-C、Hs-CRP、IL-6水平降低,HDL-C水平升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）;与辛伐他汀组、益气活血组、清热解毒组相比,益气活血清热解毒中药组TG、TC、LDL-C、Hs-CRP、IL-6水平降低,HDL-C水平升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）。与模型组相比,益气活血清热解毒中药组TLR4、NF-κB表达量降低（P=0.001）。 结论益气活血清热解毒方可起到调节动脉粥样硬化大鼠血脂、缓解炎症症状的作用,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB通路有关。     

肿瘤标志物与晚期肺癌立体定向放疗疗效的相关性

目的探讨晚期肺癌患者立体定向放疗后血清肿瘤标记物的变化。方法对117例未经治疗的非小细胞肺癌患者在立体定向放疗前及治疗完成后两月分别用放射免疫法检测血清肿瘤标志物CEA、AFP、CA125、CA199、CA153的浓度,并同时检查肺部CT影像学,对其改变进行分析。结果 AFP、CA199在鳞癌和腺癌两组立体定向治疗前后均未见有显著意义的变化(P>0.05)。CEA水平对肺腺癌、CA153及CA125水平对肺鳞癌及腺癌在稳定组患者立体定向放疗前后的差异有统计学意义(P<0.05),而在进展组其差异则均无显著意义(P>0.05)。结论监测立体定向放疗前后肿瘤标记物CA153、CA125水平对肺腺鳞癌及CEA对腺癌的放疗效果具有一定的应用价值,可作为化疗疗效的预测指标。