幽门螺杆菌全菌抗原口服免疫BLAB／c小鼠的免疫应答机理研究

目的 分析幽门螺杆菌全菌抗原的口服免疫应答反应。方法 ELISA分析免疫小鼠血清、唾液、粪便提取物特异抗体水平,ELISPOT分析胃粘膜、派伊尔小结（PP）抗原行异性抗体分泌细胞（ASC）,RT－PCR分析PP T细胞因子mRNA表达水平。结果 ①口服免疫可诱导强烈的血清IgG反应和唾液、粪便提取物特sIgA反应;②胃粘膜、PP结产生大量抗原特异性抗体分泌细胞（ASC）,尤以sIgA-ASC型居多,PP结抗原特异性形成细胞（ASC）数量与特异抗体水平密切相关;③加佐剂免疫组小鼠PP T细胞,体外抗原刺激下,早期高表达IFN－γ晚期高表达IL－4。结论 全菌抗原和粘膜佐剂免疫可诱导H.pylori特异的系统、粘膜免疫应答,局部sIgA可能在抗H.pylori感染中具有重要作用,肠粘膜免疫主要诱导部位PP早期表现为TH1型优势应答,晚期则转为TH2型优势应答。     

口服幽门螺杆菌疫苗后小鼠粘膜免疫应答研究

为观测幽门螺杆菌 (Hp )全菌抗原和粘膜佐剂LT口服免疫Balb/c小鼠后的粘膜免疫应答 ,采用ELISPOT和ELISA法分析免疫小鼠胃粘膜、派伊尔小结 (PP )抗原特异性抗体分泌细胞和小肠粘液唾液sIgA抗体。结果表明抗原免疫组、抗原 +佐剂组胃粘膜、PP抗原特异性sIgA ASC、IgG ASC数量明显增加 ,尤以sIgA ASC为甚 ,并且抗原 +佐剂组明显高于单纯抗原组和对照组 ;小肠粘液唾液特异sIgA水平两免疫组均明显高于对照组 ,提示口服免疫可有效诱导粘膜免疫应答 ,局部特异sIgA在抗Hp感染中具有重要作用     

白细胞介素１８受体及其介导的信号转导

白细胞介素１８（ＩＬ－１８）是Ｏｋａｍｕｒａ等［１］于１９９５年发现的一种新的细胞因子,因其能诱导Ｔ细胞产生ＩＦＮ－γ,被称为ＩＦＮ－γ诱导因子（ＩＧＩＦ）,后被命名为ＩＬ－１８。此后,有关ＩＬ－１８的研究十分活跃。研究发现,ＩＬ－１８除了诱导细胞产生ＩＦＮ－λ外,还能诱导ＧＭ－ＣＳＦ,ＩＬ－２及ＴＮＦα等其它Ｔｈ１型细胞因子的产生,具有促进Ｔｈ１细胞发育、增殖和分化以及增强ＮＫ细胞活性的作用。多项研究提示,ＩＬ－１８具有抗多种病原微生物感染及抗多种肿瘤的作用,中和或拮抗ＩＬ－１８的效应可能在抗…     

重组幽门螺杆菌热休克蛋白A的纯化研究

目的对重组幽门螺杆菌热休克蛋白A大肠杆菌工程菌表达的rHspA蛋白进行纯化研究。方法酵后的重组大肠杆菌进行高压破菌后,采用镍离子亲和柱层析和凝胶过滤柱层析相结合的方法分离纯化rHspA,使用SDS-PAGE和HPLC鉴定蛋白纯度,注射免疫家兔检测纯化后的rHspA的免疫学活性。结果所纯化获得的rHspA蛋白纯度>98%,总回收率为60%,并且保持了良好的免疫学活性。结论建立了从重组大肠杆菌中纯化高纯度rHspA的工艺,为Hp疫苗的进一步研究提供了材料。     

肠出血性大肠杆菌O157 EspA的研究进展

肠出血性大肠杆菌（Enterohemorrhagic Escherichia coli，EHEC）O157：H7曾多次在世界各地，特别是发达国家引起广泛的暴发流行。感染主要导致腹泻、出血性结肠炎（hemorrhagic colitis，HC），并经常伴发溶血性尿毒综合征（Hemolytic ruemic syndrome，HUS）、血栓形成的血小板减少性紫癜（thrombotic thrombocytopenic purpura，TTP）并发症，严重威胁着人类的生命健康。人类感染此菌的途径主要是食用或接触污染的牛肉、蔬菜、水果及水源等。目前，对O157：H7感染尚缺乏有效的防治方法，只能给予对症治疗和适当的抗菌治疗，但研究证明抗菌药物可促使O157：H7大肠杆菌释放Vero毒素，从而使患者并发溶血性尿毒综合征（HUS）的危险性增加。     

抗幽门螺杆菌单克隆抗体的制备与特性研究

幽门螺杆菌 (Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ,Ｈｐ)感染是人类最常见的慢性细菌感染 ,可导致胃炎、消化性溃疡和胃癌等 ,还可引起口腔溃疡 ,与一些非胃肠疾病如发育不良、冠心病、糖尿病和胆石症等的发生有关[1,2 ] 。幽门螺杆菌粪抗原 (Ｈｐｓｔｏｏｌａｎｔｉｇｅｎ ,ＨｐＳＡ)检测是一种诊断Ｈｐ感染的新技术 ,其诊断准确性可达 90 %以上 ,同时具有简便快速、价格低廉、对病人无任何创伤 ,可不需任何仪器等优点[3 ,4 ] 。本研究采用传统的杂交瘤细胞技术 ,通过制备效价高、特异性好的抗Ｈｐ单克隆抗体 ,为Ｈｐ抗原检测技术的建立…     

Poly（A）信号及3‘非转译区对IL—2Rα表达调控的影响

将IL-2Ra cDNA3’端系列缺失克隆的重组质粒导入CHO细胞,经DNA、RNA及蛋白质印迹分析表明:缺3’非转译区(3’UTR)及Poly(A)信号序列的缺失子DNA,可以整合到受体细胞染色体上,但不能形成稳定的mRNA及表达rIL-2Ra;IL-2Ra cDNA上1297bp处的ATTAAA序列独立地显示出Poly(A)信号功能,相应的缺失子DNA能转录形成稳定的mRNA和表达rIL-2Ra。结果表明:poly(A)尾是位于3’端的转译调控因子,3’UTR与IL-2Ra cDNA的表达调控密切相关。     

人白细胞介素2受体α链cDNA导入哺乳细胞及其克隆与稳定表达的研究

按DNA—磷酸钙共沉淀法将人白细胞介素2受体α链cDNA转染中国仓鼠卵巢细胞(CHOdhfr~-)及小鼠成纤维细胞(L929),获得稳定表达人IL-2Rα链的CHOdhfr~+细胞克隆。经RNA点渍杂交分析、荧光标记IL-2染色法、特异性ELISA和玫瑰花环试验检测证明,哺乳细胞表达的重组IL-2Rα链具有结合IL-2和抗Tac McAb的能力。还报道了T细胞白血病Jukat及Molt-4等细胞系异常表达IL-2R的结果,并作了分析讨论。     

氨基糖苷类钝化酶耐药机制的研究进展

氨基糖苷类抗生素的耐药机制相当复杂，其中以产生钝化酶为主，近来对其研究较多，尤其是分子水平的研究取得了一些进展。本文对三种主要钝化酶即氨基糖苷磷酸转移酶、氨基糖苷乙酰转移酶、氨基糖苷类核苷转移酶的作用底物、作用位点、常见耐药细菌、编码基因等进行综述。     

国家虚拟仿真实验教学课程共享平台用于“生物技术制药”课程实验教学实践

目的 提升“生物技术制药”课程的实验教学效果。方法 以中国人民解放军陆军军医大学2020级药学专业四年制本科生为授课对象,随机分为线上线下混合组（观察组）和线下组（对照组）。以生物技术制药经典实验为例,对照组采用传统方式教学;观察组由教师通过国家虚拟仿真实验教学课程共享平台中浙江中医药大学相应内容虚拟实验课程,进行虚拟仿真实验教学辅助传统线下教学。比较两组的学习效果。结果 观察组学生均认为线上学习方式降低了自身学习难度,提高了兴趣,增强了掌握实验技能的自信。每个实验的观察组学生教学当天即可完成教学过程,短于对照组实验使用时间。观察组学生实验课平均得分为（93.78±1.41）分,明显高于对照组的（75.94±0.00）分（P <0.05）。结论 虚拟仿真实验教学作为“生物技术制药”课程课堂教学辅助手段,可有效解决传统实验课程面临的学时有限、操作机会有限、教学效果欠佳的难题,助力生物技术制药专业人才实际操作技能的培养。