TBX5基因在人类单纯性先天性心脏病中的突变及表达研究

目的 研究人类单纯性先天性心脏病患中TBX5基因突变及表达情况。方法 应用PCR—DGGE方法在61个单纯性先天性心脏病核心家系共216位成员中检测TBX5基因7个外显子的突变情况；以β—sctin作为内对照对10个房间隔缺损患和2个非先天性心脏病患(正常对照)心肌标本进行RT—PCR扩增和定量分析，以观察TBX5基因在mRNA水平有无差异。结果 在所有被检成员中，未发现突变：与非先天性心脏病患(正常对照)相比，房间隔缺损患TBX5基因mRNA表达呈下降趋势。结论 TBX5基因编码区突变不是人类单纯性先天性心脏病的致病原因，但其转录水平的异常可能是单纯性先天性心脏病的一种潜在致病机制。     

nm23-H1基因在喉癌中杂合性丢失和微卫星序列不稳定性分析及表达的研究

目的　探讨nm2 3 H1基因在喉鳞状细胞癌中杂合性丢失 (LOH)及表达情况。方法　选择nm2 3 H1基因内部及附近 5个微卫星多态标记 ,对 72例喉癌标本进行杂合性丢失和微卫星序列不稳定性检测 ,同时以RT PCR方法分析 38例配对喉鳞状细胞癌标本中nm2 3 H1基因表达情况。结果　LOH涉及至少 1个位点的频率高达 76 .39% ,5个位点均有LOH ,以D17S16 6 5处频率最高 ,达 38.10 %。 3个位点出现MI ,最高为 12 .70 %。nm2 3 H1基因杂合性丢失及微卫星不稳定与淋巴结转移、临床分期和肿瘤分化无显著相关性 (P >0 .0 5 ) ,但D17S16 6 5位点高LOH频率与低分化相关 (P <0 .0 5 )。癌、癌旁及转移淋巴结中nm2 3 H1表达不同 ,但差异无统计学意义 ,表达水平与淋巴结转移无关 (P >0 .0 5 )。结论　nm2 3 H1基因可能在喉鳞癌发生中起作用 ,杂合性丢失可能是影响基因功能的主要机制。     

某院连续三年医院血流感染病原菌分布特征及耐药性分析

目的回顾性分析本院连续3年血培养阳性检出的病原菌分布特征及抗菌药物耐药情况,为血流感染者的诊断和治疗提供依据。 方法选取2012年1月至2014年12月于本院住院患者无菌抽取的血液标本进行培养,对血培养阳性报警后分离培养的纯培养菌落,采用DL-Medical细菌测定系统进行鉴定及药敏试验。 结果连续3年共分离出首次非重复病原菌381株,检出率为9.6%,其中革兰阴性杆菌占60.4%高于革兰阳性球菌;病原菌依次为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌;年龄分布主要集中在0～1岁和60～91岁患者;科室分布主要在儿科、ICU、血液净化科和肿瘤科。药敏试验结果显示,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）检出率分别为55.2%和33.8%,对头孢西丁、阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦敏感性强,可作为经验用药;葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）检出率为30.0%,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRSCN）检出率为52.5%,对四环素、米诺环素、莫西沙星和利福平敏感性均较强,葡萄球菌对青霉素和大环内酯类抗菌药物耐药率高,万古霉素和利奈唑胺可作为治疗葡萄球菌所致血流感染重症患者的首选用药。 结论血流感染病原菌种类多,且耐药情况复杂,临床医生应提高对血液及导管的送检率,实验室应重视血流感染病原菌及耐药性监测,尽早为临床提供及时准确的药敏试验结果,应根据药敏试验结果合理选择抗菌药物,有效地控制血流感染耐药菌的产生和传播。     

辽宁地区一脊髓小脑性共济失调大家系症状前患者的基因诊断研究

目的确定辽宁地区一脊髓小脑性共济失调大家系患者子女中目前健康的症状前患者。方法本家系已通过基因诊断的方法明确为SCA3型,所以提取本家系患者子女外周血DNA后,采用聚合酶链反应对SCA3基因三核昔酸重复片段进行扩增,并将PCR异常扩增片断测序,以明确异常扩增等位基因内重复拷贝数。结果 44名患者子女中有8人SCA3基因三核苷酸重复片断在70-82次,超过了正常人SCA3基因内三核苷酸重复的次数。结论通过基因检测诊断出此8人为SCA3型脊髓小脑性共济失调症状前患者。     

醛固酮调控WNK4基因表达及其机制的研究

目的 研究醛固酮调控WNK4基因表达情况及其作用机制.方法 以正常饮食饮水的大鼠为对照组,实验组3组大鼠分别以醛固酮注射1d、3d及高钾饮食诱导大鼠内源醛固酮增高,检测大鼠血清醛固酮水平及血清和24 h尿液中K+、Na+和Cl水平,用实时荧光定量PCR检测大鼠肾脏组织WNK4表达,转染WNK4启动子区荧光素酶报告基因载体pGL3-WNK4-484和pGL3-WNK4-275至肾源细胞系HEK239细胞中,醛固酮刺激24 h后用双荧光素酶报告系统检测荧光素酶活性的变化.结果 实验组较对照组大鼠血清醛固酮水平均升高,尿液K+浓度均升高,尿液Na+浓度均降低,差异有统计学意义,高钾组大鼠尿液中Cl-显著升高;实验组大鼠血清K+、Na+和Cl-浓度均无明显变化.实验组大鼠肾脏组织中WNK4表达明显下降.在醛固酮刺激下,pGL3-WNK4-484质粒的荧光素酶活性下降了3.5倍,pGL3WNK4-275质粒的荧光素酶活性无明显变化.结论 醛固酮可作用于WNK4基因上游的糖皮质激素反应元件上,发挥其下调基因表达的作用.     

PCI术后氯吡格雷影响血小板VASP磷酸化水平的研究

目的应用流式细胞仪检测血小板血管扩张剂刺激磷蛋白(VASP)的磷酸化程度,评估PCI术后氯吡格雷的应用疗效。方法 17例健康对照组不予任何药物干预,26例急性冠脉综合征患者在PCI术后给予氯吡格雷抗血小板治疗。分别在入选时和抗血小板治疗后第7天应用流式细胞仪检测血小板VASP磷酸化程度,计算血小板反应性指数(PRI)。结果急性冠脉综合征患者在PRI术后给予抗血小板治疗的第7天,PRI明显降低,治疗前后差异有统计学意义(P0.05)。结论流式细胞术检测血小板VASP磷酸化程度可以特异性评价氯吡格雷疗效。     

895株铜绿假单胞菌院内感染分布及耐药性变迁分析

目的 了解我院铜绿假单胞菌感染分布特点及对抗生素耐药性的变化趋势,为临床合理用药提供依据.方法 对2008 年1 月至2010 年12 月住院患者送检各类标本进行分离培养,采用VITEK-32 全自动微生物仪进行菌株鉴定,用K-B 纸片扩散法检测对17 种抗菌药物的敏感性.结果 895株铜绿假单胞菌检出以痰液最多占81.5%,主要分布在综合科、呼吸内科、神经内科.铜绿假单胞菌对17 种抗菌药物的耐药率呈逐年上升趋势.阿米卡星、美洛培南和亚胺培南对铜绿假单胞菌具有较好的抗菌活性,可作为治疗重症铜绿假单胞菌感染的首选.结论 铜绿假单胞菌的感染和耐药情况日趋严峻,加强耐药性监测,根据药敏结果合理使用抗菌药物是控制细菌感染与耐药的关键因素,以减少耐药菌株的产生与传播.     

脊髓小脑性共济失调一家系的基因诊断和产前诊断

目的 确定一脊髓小脑性共济失调(spinocerehellar ataxia,SCA)家系具体分型,并开展症状前患者检测和产前诊断.方法 收集该脊髓小脑性共济失调家系中的2例患者的血液标本,结合该家系的临床表现和我国该类疾病的发病率,采用聚合酶链反应对SCA1、SCA2和SCA3/MJD 3个基因的三核苷酸重复片段进行扩增,并通过琼脂糖凝胶电泳和PCR产物测序的方法确定所有正常和异常扩增等位基因内三核苷酸重复次数.明确致病基因后,对患者子女进行症状前检测,并对1例怀孕症状前患者进行了产前诊断.结果 SCA1和SCA2基因内三核苷酸重复次数在正常范围内,SCA3/MJD的2个等位基因中1个等位基因三核苷酸重复次数在正常范围内,另1个等位基因三核苷酸重复次数在异常范围内.患者子女有1人携带异常等位基因,胎儿携带异常等位基因.结论 该家系经基因诊断确诊为SCA3/MJD型,有1人为症状前患者,该症状前患者所孕胎儿也为症状前患者.     

HoxC5基因内2个SNP位点与单纯性先天性心脏病的关联研究

目的在前期工作定位的人类单纯性先天性心脏病易感区域12q131～133内,选取HoxC5基因内2个已知单核苷酸多态(SNP)rs2071448、rs2071450,检测其在单纯性CHD患者和正常人群中的分布情况,分析其与单纯性CHD的相关性。方法应用变性高效液相色谱法(DHPLC)结合测序分析108名单纯性先天性心脏病患者及200名正常人2个SNP位点基因型,应用χ2检验统计分析患者组和对照组基因型频率及等位基因频率。结果编码区SNP位点rs2071448未检测到多态;位于HoxC5基因3,侧翼序列的SNP位点rs2071450存在AG多态,且患者组G等位基因频率及AG、GG基因型频率均明显高于对照组(P<005)。结论HoxC5基因编码区SNP位点rs2071448在中国东北人群中可能不存在;3,侧翼序列的SNP位点rs2071450与单纯性先天性心脏病有明显的相关性,具有G等位基因的人发生CHD的危险性相对增高。     

自动血细胞计数和白细胞分类计数的复检规则

由于全血细胞计数（CBC）和白细胞分类计数（DC）在临床诊疗中广泛应用，其复检（review）规则近年来已受到国内外业界的高度重视。为此，我们将国际血液学复检专家组和美国临床和实验室标准协会（CLSI）最新提出的自动血细胞计数和白细胞分类计数的复检规则予以介绍。