一种肠肌间神经丛胶质细胞无血清原代培养法的建立

目的 肠胶质细胞（enteric glial cell,EGC）在肠道多种生理及病理过程的调节中发挥重要作用,为了深入研究EGC的功能,排除在体及组织水平中神经体液因素的影响,获得一种简便高效的原代EGC分离培养方法非常必要。方法 取小鼠结肠纵行肌-肌间神经丛组织,经消化分离肠胶质细胞,采用含血清和无血清培养基交替培养法去除成纤维细胞后常规传代;运用细胞免疫荧光染色法检测原代EGC纯度;运用胞内钙成像技术实时观察EGC内Ca²⁺浓度（[Ca²⁺]i）变化以检测细胞活性。结果 每次实验获得的EGC至传代前细胞量可达约6.8×10⁵;无血清培养后成纤维细胞污染显著降低;胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）阳性的EGC占细胞总数的98.44%±1.07%,钙结合蛋白S100β阳性EGC占93.61%±3.16%,GFAP与S100β双阳性EGC占93.09%±2.99%;96.00%±4.00%的细胞在ATP诱导下发生胞内钙瞬变。结论 结合无血清培养可有效去除成纤维细胞污染,得到纯度较高、活性较好的肌间神经丛EGC。     

3种子宫内膜准备方案对冻融胚胎移植患者妊娠结局的影响

目的：探讨在子宫内膜异位症（EMT）、子宫腺肌症或不明原因反复种植失败（RIF）患者冻融胚胎移植（FET）周期中,单纯激素替代方案、半量长效促性腺激素释放激素激动剂（GnRH-a）和全量长效GnRH-a降调节后联合激素替代方案3种内膜准备方法对移植后妊娠结局的影响,为临床内膜准备方案的选择提供依据。方法：选择进行FET治疗的EMT、子宫腺肌症或不明原因RIF患者191例,按照子宫内膜准备方法分为单纯激素替代组（n=63）、半量GnRH-a组（n=61）和全量GnRH-a组（n=67）。回顾性分析并比较各组患者年龄、体质量指数（BMI）、不孕年限、移植周期数、移植胚胎数、孕激素转化日内膜厚度、移植日内膜厚度、移植优质胚胎率、宫内临床妊娠率和胚胎种植率等情况。结果：3组FET周期患者的一般临床资料,包括年龄、BMI、不孕年限、移植周期数、移植胚胎数、孕激素转化日内膜厚度、移植日内膜厚度和移植优质胚胎率比较差异均无统计学意义（P>0.05）;全量GnRH-a组和半量GnRH-a组患者宫内临床妊娠率及胚胎种植率明显高于单纯激素替代组（χ²=9.000,P<0.05;χ²=7.917,P<0.05）;与半量GnRH-a组比较,全量GnRH-a组宫内临床妊娠率和胚胎种植率比较差异均无统计学意义（P>0.05）。结论：在EMT、子宫腺肌症或不明原因RIF患者FET周期中,GnRH-a降调节后联合激素替代方案可有效改善FET妊娠结局;全量长效GnRH-a及半量长效GnRH-a降调节后的妊娠结局较为相似,并且半量长效GnRH-a更有利于减轻患者的经济负担,可作为FET周期中内膜准备方案的理想选择。     

基于脂质组学探究健脾利湿方对NAFLD小鼠肝脏脂质的调控作用

  目的  基于LC-MS脂质组学探讨健脾利湿方对非酒精性脂肪肝(NAFLD)小鼠肝脏脂质代谢的调控作用。  方法  将C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、健脾利湿方组3组, 每组6只, 采用60%高脂饲料饲喂12周诱导NAFLD模型, 同时进行给药干预。通过生化指标检测及病理切片进行药效学评估, LC-MS脂质组学检测小鼠肝脏组织脂质变化。  结果  健脾利湿方改善了HFD诱导的体质量增加, HE、油红染色显示具有肝脏保护作用, 可恢复葡萄糖代谢水平。其次, 降低了肝脏Fasn、CD36、SCD1、Srebp1c的mRNA水平(P < 0.05, P < 0.01,P < 0.001);此外, 脂质组学研究发现, 健脾利湿方对肝脏脂质组成存在调控作用。  结论  健脾利湿方具有降低体质量、调节血糖、保护肝脏的作用, 脂质组学研究表明对肝脏脂质组成的调控可能是健脾利湿方治疗NAFLD主要作用机制。      

虚拟手术外科软件结合移动医疗查房系统在口腔颌面外科本科生教学查房中的应用研究

目的 探讨虚拟手术外科软件结合移动查房系统在口腔颌面外科本科生教学查房中的应用效果。方法 以上海交通大学口腔医学院30名本科学生为研究对象,随机分为试验组和对照组,每组各15人。试验组采用虚拟手术外科软件Proplan结合移动医疗查房系统进行教学查房,对照组采用传统教学查房;两组教学病种包括颌面部骨折、牙颌面畸形、颌骨良性肿瘤。教学结束后对两组学生进行相应考核及问卷调查,比较两组的教学效果。结果 两组学生的理论考核成绩无显著差异,但试验组学生在综合能力考核及认可度调查中均优于对照组。结论 虚拟手术外科软件结合移动查房系统在口腔颌面外科本科生教学查房中能有效提高学生对相关专业知识的学习效果,提高学生的认可度和学习兴趣,有一定的应用价值。     

人参皂苷Rb1对MPTP诱导的帕金森病模型小鼠神经保护作用的初探

目的:探讨人参皂苷Rb1(GsRb1)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)模型小鼠的神经保护作用及量效关系。方法:将50只C57BL/6小鼠随机分为5组,分别为对照组、MPTP组、GsRb1处理组(低剂量组、中剂量组和高剂量组),每组10只。模型组和处理组使用MPTP(30 mg/kg)连续腹膜腔注射5 d制备PD小鼠模型。处理组每天分别以10 mg/kg、20 mg/kg和40 mg/kg的剂量腹膜腔注射GsRb1;对照组给予等容量生理盐水。给药结束后第2 d,采用转棒实验、爬杆实验、悬挂实验等行为学方法检测小鼠的行为学变化。结果:与对照组相比,MPTP组小鼠掉落潜伏期显著降低(P<0.01),爬杆时间显著升高(P<0.01),悬挂实验评分显著降低(P<0.01)。与MPTP组比较,中、高剂量组掉落潜伏期明显升高(P<0.05);低、中剂量组爬杆时间明显降低(P<0.05);中、高剂量组悬挂实验评分明显升高(P<0.05)。结论:GsRb1对MPTP诱导的PD模型小鼠具有神经保护作用,每天给予20 mg/...     

长链非编码RNA-GAS5靶向miR-29下调铜转运蛋白CTR1抑制肾脏纤维化的机制研究

目的研究长链非编码RNA-生长阻滞特异转录物5（GAS5）对肾脏纤维化的作用及机制。方法收集临床肾穿刺患者的组织标本,用原位免疫荧光方法检测GAS5在组织上的定位和表达情况;构建小鼠单侧输尿管梗阻肾脏纤维化模型,用原位免疫荧光方法检测GAS5在肾组织上的定位以及表达情况;用转化生长因子-β（TGF-β）刺激肾小管上皮细胞后,用Real-time PCR方法检测GAS5的表达水平;在肾小管上皮细胞中转染GAS5过表达质粒后,用Western印迹法检测细胞外基质蛋白胶原蛋白3（Col3）、纤连蛋白1（FN1）、铜转运蛋白1（CTR1）和铜离子转运ATP酶α肽（ATP7a）的表达水平,用Real-time PCR方法检测miR-21、miR-29、CTR1和ATP7a的表达。在肾小管上皮细胞中过表达miR-29后,用Western印迹法检测CTR1的表达;在肾小管上皮细胞中过表达miR-21后,用Western印迹法检测ATP7a的表达。结果在不同肾脏纤维化模型中,GAS5均较对照组表达下调。在肾小管上皮细胞中,过表达GAS5抑制Col3和FN1的合成（P<0.05）;过表达GAS5可上调miR-29的表达,并下调miR-21的表达（P<0.05）。miR-29在转录后水平抑制CTR1的蛋白表达（P<0.05）,且过表达GAS5能够降低CTR1的蛋白表达（P<0.05）;miR-21在转录后水平抑制ATP7a的蛋白表达（P<0.05）,但过表达GAS5不影响ATP7a的表达。结论长链非编码RNA-GAS5通过上调miR-29,在转录后水平抑制铜转运蛋白CTR1,进而抑制肾脏纤维化。     

术前门静脉血栓对活体肝移植预后的影响

目的 探讨术前门静脉血栓对活体肝移植的影响.方法 回顾性分析天津市第一中心医院2007至2011年完成的99例成人间活体肝移植患者,根据术前是否有门静脉血栓分为2组,血栓组26例,无血栓组73例.比较2组的术前危险因素及门静脉血栓对活体肝移植手术和术后患者预后的影响.结果 26例门静脉血栓患者Ⅰ级血栓23例,Ⅱ级血栓3例.肝移植术前的脾切除是发生门静脉血栓的独立危险因素(x2 =10.211,P=0.001).术前门静脉血栓会延长手术的无肝期(Z=-2.430,P=0.015),但2组患者术后并发症发生率(x2=0.326,P=0.568)及死亡率均无统计学差异,而且对患者的1年生存率和3年生存率均无影响(x2=0.505,P =0.477).结论 对于活体肝移植合并Ⅰ级或Ⅱ级门静脉血栓的患者,通过合理的术中处理及术后预防,门静脉血栓不会影响患者的预后.但门静脉血栓增加了一定的手术难度,需要详尽的术前评估和仔细的术中操作.     

青少年特发性脊柱侧弯患者肩部影像学与肩部外观的相关性研究

[目的]对新定义的肩部影像学参数进行分析,进一步研究青少年特发性脊柱侧弯患者(adolescent idiopathic scoliosis,AIS)肩部影像学与肩部外观的相关性.[方法]选取本院接受治疗的连续35例含主胸弯青少年特发性脊柱侧弯患者,Lenke 1型21例,Lenke 2型14例,主胸弯Cobb角平均(48±7.3)°,上胸弯Cobb角平均(21±4.5)°.均拍摄自然站立位脊柱X线片及肩背部外观照,量取肩部影像学参数T1倾斜角、锁骨角、锁骨胸廓交点差、喙突高、锁骨差1、锁骨差2,及两个肩部外观参数临床肩高1、临床肩高2.对肩部影像学参数与外观参数分别进行相关分析,探讨锁骨差1、锁骨差2与肩部外观的相关性.[结果]除T1倾斜角外,所研究的影像学参数与外观参数显示明显的相关性(P＜0.05);但仅有锁骨差1与临床肩高2、锁骨差2与两个外观参数有较高的相关关系(r＞0.80),其中锁骨差2与临床肩高2显示最强的相关关系(P＜0.01,r=0.97);临床肩高2较临床肩高l与肩部影像学参数显示更强的相关性.[结论]肩部影像学参数锁骨差2可以更好反映临床外观肩高,参考影像学资料可以较准确地评价患者的部分肩部外观特征.     

乳腺癌多学科综合治疗的体会与探索

多学科综合治疗始于19世纪60年代,为解决单一治疗手段在恶性肿瘤治疗中存在的局限性而产生.其不仅弥补了单一治疗手段的不足,而且有效地提高了临床疗效.乳腺癌的综合治疗可谓是多学科综合治疗模式的典范,从单一的根治术、扩大根治术的治疗模式到现在的保乳手术,辅助放、化疗等在内的多学科综合治疗模式.乳腺癌的治疗已经历了100多年的革新,取得了多种综合治疗方法,显著地提高了临床疗效.本文就乳腺癌的多学科综合治疗作一探讨.     

枕部无功能性副神经节瘤一例

患者 女,81岁.右侧枕部无痛性包块3年,最近1个月包块处出现疼痛,于2004年5月23日入院.入院后查血压140/90 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),空腹血糖5.5 mmol/L.体检:右侧枕部可触及5 cm×4 cm×2 cm大小的质韧包块,压痛不显著,活动度稍差.细胞学穿刺提示为血管瘤.