人脐血间充质干细胞抑制异体T淋巴细胞反应的实验及临床意义

目的:研究人脐血间充质干细胞(MSCs)对异体外周血T淋巴细胞抑制的影响.方法:分离、扩增脐血MSCs,流式细胞术检测表面标志以鉴定.取分离培养的脐血MSCs,与经分离的异体淋巴细胞共培养,在植物血凝素(PHA)刺激下,用MTT还原法测定细胞增殖,观察脐血MSCs对PHA刺激的T淋巴细胞转化抑制作用.采用ELISA检测培养上清中IFN-γ和IL-4的分泌水平.结果:脐血MSCs在PHA刺激下可抑制T淋巴细胞增殖,且其培养上清也具有抑制异体淋巴细胞增殖转化能力.ELISA检测7 d共培养上清中IFN-γ和IL-4两种细胞因子的含量,发现IFN-γ分泌水平下调、IL-4分泌水平部分上调.结论:脐血MSCs具有抑制异体淋巴细胞免疫反应,降低移植物抗宿主反应(GVHD)的作用.具有研究价值和应用潜能.     

As2O3诱导白血病细胞凋亡过程中活性氧自由基的变化

目的 研究As2O3对白血病细胞株NB4，K562，HL－60的活性氧自由基（ROS）的影响。方法 细胞内活性氧（ROS）用DCFH－DA标记，并用流式细胞仪检测。结果 0.6μmol/L As2O3作用72h能诱导NB4发生44.9%的凋亡，提高其浓度至2.7和8.1μmol/L，也能诱导K562和HL－60分别发生58.3％和62.3％。As2O3能显著降低三种细胞内ROS水平，且随浓度增加而降低。As2O3无论高浓度短时间作用或低浓度长时间作用对细胞内ROS抑制作用是相似的。结论 ROS水平下降在As2O3的诱导凋亡作用过程起了重要作用。     

骨髓间充质干细胞培养上清对异体淋巴细胞增殖的影响

骨髓间充质干细胞（Mesenchymal stem cells，MSCs）是不同于造血干细胞的另一类骨髓干细胞。近年对MSCs的研究初步显示其能减少骨髓移植后移植物抗宿主病的发生，并推测它具有免疫抑制作用。为了解成人骨髓间充质干细胞的免疫调节作用，我们观察了在无细胞接触的条件下，MSCs培养上清对异体淋巴细胞增殖的影响。     

成人骨髓间充质干细胞培养上清对人脐血间充质干细胞体外培养及扩增的支持作用

目的：研究人骨髓间充质干细胞培养上清对人脐带血（HUCB）中所含有间充质干细胞（MSCs）的影响。方法：取脐带血，肝素抗凝，Percoll淋巴细胞分离液分离出单个核细胞，低糖DMEM培养获得贴壁细胞层。与人骨髓间充质干细胞培养上清共孵育。流式细胞仪检测表面抗原。结果：脐带血的单个核细胞与人骨髓间充质干细胞培养上清共孵育经体外培养贴壁后出现形似纤维状细胞形态并表达与MSCs相关的抗原（CD13，CD44，CD71，CD166）。但不表达造血细胞抗原（CD34，CD45），这与源于骨髓的MSCs一致。结论：人脐血间充质干细胞与骨髓间充质干细胞培养上清共孵育，对脐血间充质干细胞体外分离培养及扩增有支持作用。     

三氧化二砷对白血病细胞凋亡和分化的双向诱导作用

目的:研究三氧化二砷(As2O3)对白血病细胞株NB4,HL-60细胞凋亡和分化的双向诱导作用。方法:细胞分化抗原用相应抗体标记,用PI标记DNA,并用流式细胞仪检测。结果:0.6μmol·L-1As2O3作用72h能诱导NB4发生44.9%的凋亡,提高其浓度至8.1μmol·L-1,也能诱导HL-60发生62.3%凋亡,低浓度0.1～0.3μmol·L-1As2O3对NB4、0.1～2.7μmol·L-1As2O3对HL-60细胞无诱导分化作用,对分化抗原表达无影响。只有当浓度增至0.6和8.1μmol·L-1并作用较长时间才能使两种细胞分化抗原表达增加。结论:低浓度As2O3无促分化作用,较高浓度作用较长时间才显示诱导凋亡和一定的促分化作用。     

再生障碍性贫血患者血浆及骨髓上清TNF-α、IFN-γ、G-CSF测定及意义

目的 :了解再生障碍性贫血 (再障 )患者血浆及骨髓上清TNF -α、IFN -γ、G -CSF水平的变化 ,及其与再障发病的关系。方法 :采用酶联免疫 (ELISA法 )对 2 8例再障患者及 2 0名正常人血浆及骨髓上清TNF -α、IFN -γ和G -CSF进行检测。结果 :再障病人骨髓上清G -CSF、TNF -α、IFN -γ水平与正常对照组比较均有明显统计学差异 (P <0 .0 5～ 0 .0 1) ,但与自身血浆水平相比无统计学差异 (P >0 .0 5 )。结论 :再障患者血浆及骨髓上清G -CSF、TNF -α、IFN -γ水平较正常对照均有不同程度的增高 ,这些变化可能参与了再障的发病过程。     

SeO2诱导白血病细胞凋亡及对凋亡相关基因Bcl-2和p53表达调控的影响

目的：研究SeO2对急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4、红白血病细胞K562、急性粒细胞白血病细胞株HL-60的增生、凋亡及Bcl-2和p53表达水平的影响。方法:采用流式细胞术测定细胞的凋亡率及Bcl-2和p53的表达。结果:10和30mmol／L SeO2能抑制3种细胞增生。30mmol／L SeO2作用48h能使54．0％的NB4细胞、46．5％的K562细胞和49．6％的HL-60细胞发生凋亡；能使NB4和K562细胞Bcl-2表达显著下降、促进p53的表达。结论:SeO2对3种白血病细胞均有诱导凋亡作用，在凋亡过程中涉及了细胞内凋亡相关基因Bcl-2和p53表达和调控。     

HLA半相合非清髓性造血干细胞与间充质干细胞共移植治疗重症再生障碍性贫血(附1例报告)

重症再生障碍性贫血（SAA）是临床常见的骨髓衰竭性疾病，常规治疗有效率低，造血干细胞移植是SAA尤其是依赖输血维持生命的重症患者的有效治疗方法之一。我们应用非清髓的预处理方案，进行了1例重症再生障碍性贫血患者的HLA半相合的造血干细胞移植，同时为减轻移植物抗宿主病（GVHD）还首次进行了体外扩增培养的间充质干细胞（MSC）的共移植。     

环胞菌素A治疗再生障碍性贫血对骨髓细胞凋亡的影响

目的探讨环胞菌素A(CsA)治疗对再生障碍性贫血(再障)患者骨髓单个核细胞Fas(CD95)抗原表达及调亡的影响作用.方法应用流式细胞仪测定24例再障患者CsA治疗前后骨髓单个核细胞(MNC)Fas表达率及凋亡率,其中急性再障7例,慢性再障17例;同时以20例正常人作对照.结果应用CsA治疗再障3个月时的总有效率58.3%.再障患者Fas表达率及凋亡率均高于正常对照(P＜0.05);急性再障Fas表达率及凋亡率高于慢性再障,但差异无显著性(P＜0.05).用CsA治疗后,再障患者骨髓单个核细胞凋亡率明显低于治疗前(P＜0.05).结论CsA治疗可降低再障患者骨髓MNC的凋亡率,骨髓MNC的Fas表达率和凋亡率增高与再障发病有关.     

非骨髓清除性HLA半相合异基因外周血干细胞移植治疗难治性恶性血液病疗效观察

近期 ,我们采用HLA半相合非骨髓清除性HLA半相合异基因外周血干细胞移植 (NSCT)治疗难治性恶性血液病患者 2例 ,取得了较好效果 ,现报告如下。1 　 资料与方法1 .1 　 病例报告例 1　男 ,2 3岁。 1 997年 5月入我院经B超及淋巴结活检等确诊为霍奇金淋巴瘤 ,以淋巴细胞为主 ,ⅢA。经 5个疗程化疗达完全缓解 (CR) ,又给予 2个疗程巩固后于 1 998年 3月行自体外周血干细胞移植 (APBSCT) ,移植后持续CR 2 4个月。 2 0 0 0年 3月左颈部再次出现淋巴结肿大 ,淋巴结活检示APBSCT后复发 ,联合化疗中于同年 1 0月出现腰骶部疼痛 ,B超示脾…