IL-6通过SOCS3诱导小鼠髓源性DCs分化成熟障碍的分子机制研究

目的 观察IL-6诱导小鼠髓源性DCs分化成熟障碍过程中SOCS3的表达变化并探讨其分子机制.方法分离小鼠骨髓细胞,采用黏附法结合GM -CSF和IL-4刺激法在体外培养髓源性DCs (BMDCs).用LPS诱导iDCs成熟,采用Real-Time RT-PCR和Western blot方法,观察IL-6处理前后LPS诱导的BMDCs中SOCS3表达的变化,并用甲基化特异性PCR观察SOCS3启动子CpG岛的甲基化状态.结果 Real-Time RT-PCR和Western blot结果显示,LPS能显著诱导BMDCs SOCS3 mRNA和蛋白的表达上调;而经过IL-6处理后,LPS诱导BMDCs SOCS3 mRNA和蛋白表达上调的能力被显著抑制(P＜0.05).甲基化特异性PCR与单独用LPS处理的BMDCs相比,经IL-6处理后的BMDCs SOCS13启动子区CpG岛被甲基化.结论 IL-6通过诱导SOCS3基因启动子区CpG岛的甲基化来抑制SOCS3表达,进而阻遏iDCs分化成熟,促进胃癌等肿瘤细胞侵袭转移.     

术后替莫唑胺联合三维适形放疗治疗高级别胶质细胞瘤的疗效

目的探讨术后替莫唑胺(TMZ)联合三维适形放疗治疗高级别胶质细胞瘤的临床疗效。方法回顾性分析30例行术后三维适形放疗的高级别胶质细胞瘤患者的临床资料。患者分为观察组(20例,放疗联合TMZ化疗)和对照组(10例,仅行放疗),比较其近期疗效及生存率。结果观察组近期临床缓解率及1、2年生存率分别为75%(15/20)、70%(14/20)、45%(9/20),明显高于对照组的40%(4/10)、40%(4/10)、20%(2/10)(P<0.05)。结论术后TMZ联合三维适形放疗治疗高级别胶质细胞瘤疗效优于单用放疗。     

IL-6抑制LPS诱导的小鼠髓源性DCs成熟的实验研究

目的观察白细胞介素-6(IL-6)对于内毒素(LPS)诱导的小鼠髓源性树突状细胞(DC)成熟效应的抑制作用。方法分离小鼠骨髓细胞,采用黏附法结合GM-CSF和IL-4刺激法在体外培养髓源性DCs(BMDCs)。用相差倒置显微镜观察BM-DCs的形态特点。用LPS诱导DC成熟。采用FACS结合混合淋巴细胞反应,观察IL-6处理与否,LPS诱导的BMDCs在表型和刺激同种淋巴细胞增殖功能上的变化。结果形态观察和FACS分析的结果表明:体外成功培养了纯度较高的高表达CD11c的BMDCs,LPS能明显诱导BMDCs表面MHC-Ⅱ类分子和共刺激分子CD40的表达上调;而经过IL-6处理后,LPS诱导BMDCs表面CD80、CD86、CD40表达上调的能力被显著削弱(P0.05)。混合淋巴细胞反应显示,与单独用LPS处理的BMDCs相比,经IL-6处理后的BMDCs刺激同种淋巴细胞增殖的能力明显减弱,并呈剂量依赖关系(P0.05)。结论IL-6能明显抑制LPS诱导的BMDCs成熟,可能是肿瘤免疫逃逸的重要机制之一。     

宫颈癌放疗仰、俯卧位固定下的摆位误差及剂量学差异探讨

目的:对比研究宫颈癌调强放疗中行仰卧位与俯卧位的两种固定方式时的摆位误差及剂量学差异。方法:随机选取64例宫颈癌患者分成两组,每组32例,分别选取仰卧位和俯卧位方式固定。两组患者均行首次摆位、摆位误差纠正及治疗期间的CBCT扫描,将CBCT扫描图像与治疗计划CT图像自动匹配配准,分别得到X轴（左右方向）、Y轴（头脚方向）、Z轴（腹背方向）的摆位误差数据;同时通过TPS计算两组病例靶区的D95、Dmean、CI、HI以及危及器官小肠、膀胱、直肠、结肠、股骨头、盆骨、脊髓、乙状结肠分别在等剂量线包含的体积百分比下的剂量值大小。结果:仰卧位患者与俯卧位患者在X、Y、Z轴方向平均误差分别为［（2.55±1.21） mm,（2.13±1.12） mm］、［（4.01±1.16） mm,（2.44±1.57） mm］、［（3.46±1.43） mm,（2.89±1.21） mm］。俯卧位固定组X、Y、Z轴方向平均误差均小于仰卧位固定组,且均具有统计学差异（P<0.05）;在靶区的D95、Dmean、CI、HI均不具有统计学差异（P>0.05）,除股骨头、盆骨、脊髓、乙状结肠外,俯卧位固定组的危及器官小肠、膀胱、直肠、结肠在等剂量线包含的体积百分比下的剂量值明显小于仰卧位固定组,且均具有统计学差异（P<0.05）。结论:在宫颈癌调强放疗中,与仰卧位固定相比,俯卧位固定可明显减少其摆位误差,以及在靶区受量归一一致的情况下,更好地保护了危及器官。     

靶向PPARγ的miRNA在冠脉支架内再狭窄中的表达及意义

目的探索靶向于过氧化体增殖物激活型受体γ(PPARγ)的miRNA,在这些miRNA中寻找与支架内再狭窄(ISR)密切相关的miRNA,并初步探索其临床意义。方法利用Cytoscape及其插件构建miRNA与PPARγ的作用网络,筛选出靶向PPARγ的关键miRNA。利用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测这部分miRNA在ISR人群中的表达差异,再通过ROC曲线评估miRNA对ISR患者的临床识别能力。结果通过生物信息学分析发现,miR-27a/b对PPARγ的调控作用较强;而miR-130a/b则能调控该网络中更多的基因。Real-time PCR发现miR-27a/b和miR-130a在ISR组较non-ISR组存在差异性表达(P0.05)。ROC曲线分析发现,miR-27a对ISR具有一定的临床识别能力(AUC=0.884,95%CI 0.768~1.00,P0.001)。结论 miR-27a/b和miR-130a/b是靶向于PPARγ的主要miRNA,miR-27a/b和miR-130a在ISR中差异性表达,miR-27a可能对识别ISR患者具有一定的临床意义。     

香菇多糖分离最佳工艺及最佳原料探讨

对香菇多糖提取、纯化条件进行优化研究。结果表明：香菇多糖撮最佳工艺条件为：ｐＨ７．０,９６℃浸提４ｈ,料水比为１：２０,醇析浓度为７０％,蛋白质去除时样品－氯仿＋正丁醇（Ｖ：Ｖ）为１：１,氯仿－正丁醇（Ｖ／Ｖ）为１：０．２５,萃取时间为３０ｍｉｎ效果最好,不同类型的香菇原料的撮结构表明：椴栽板香菇、花菇和板菇,其香菇多糖含量相送葬不大,从经济角度和工艺的简易性考虑,分离制备香菇多糖应以袋栽板菇为最     

痰热清注射液对创伤性急性肺损伤肺保护作用的临床研究

目的：探讨痰热清在创伤性急性肺损伤中的保护作用。方法：选择59例创伤性急性肺损伤患者随机分为痰热清组（29例）和常规治疗组（30例）,比较治疗7d前后两组患者动脉血气白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-8（IL-8）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、SIRS评分的变化;比较两组患者ARDS的发病率和病死率的差异。结果：治疗7d后痰热清组较常规治疗组患者的动脉血气、SIRS评分较治疗前有明显改善（P〈0．05）;痰热清组较常规治疗组治疗后血清IL-6、IL-8、TNF-α水平有降低（P〈0.05）ARDS的发病率和病死率痰热清组较常规治疗组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：痰热清能降低血清TNF-α、IL-6、IL-8炎性因子的水平;能缓解炎性反应综合征的进展;能改善通气,缓解呼吸窘迫。     

STAT3信号通路在IL-6抑制人单核细胞来源树突状细胞CCR7表达中的作用

目的 探讨STAT3信号通路在IL-6抑制人单核细胞来源树突状细胞(human monocytederived dendritic cells,moDCs)趋化因子受体7(C-C chemokine receptor type 7,CCR7)表达中的作用.方法 采用CD14+磁珠分离法从外周血中分离得到单核细胞,加入rhGM-CSF和rhIL-4在体外诱导培养树突状细胞.LPS用于刺激moDCs表达CCR7,RT-PCR检测不同浓度IL-6处理后再用LPS刺激后的moDCs CCR7 mRNA表达.Western blot检测IL-6处理moDCs和IL-6预处理后再加入STAT3磷酸化特各异性抑制剂JSI-124的moDCs STAT3、p-STAT3表达.IL-6预处理并抑制STAT3磷酸化后,LPS刺激48 h,RT-PCR检测moDCs CCR7 mRNA的表达,流式细胞仪检测moDCs CCR7蛋白表达,细胞迁移实验检测moDCs细胞迁移功能.结果 与单独LPS刺激组比较,IL-6明显抑制LPS刺激的moDCs CCR7mRNA的表达(P＜0.05).Western blot结果显示,与单独LPS刺激组比较,IL-6导致moDCs细胞内STAT3高度活化;而抑制STAT3信号高度活化后,与IL-6+LPS处理组比较,moDCs CCR7 mRNA表达、蛋白分子表达、细胞迁移能力明显升高(P＜0.05),与LPS刺激组无差异(P＞0.05).结论 IL-6通过高度活化STAT3信号通路抑制人单核细胞来源树突状细胞CCR7表达,导致树突状细胞的迁移能力受损,而靶向干预STAT3通路可能成为纠正树突状细胞迁移障碍的潜在手段.     

食管胃结合部腺癌手术方式的选择

目的探讨食管胃结合部腺癌（AEG）合理的手术方式。方法检索2004年1月至2013年12月第三军医大学西南医院实施手术治疗的AEG病例资料,按年份分析AEG的发病趋势,AEG3种亚型的构成比,Siewert分型与手术路径、切除范围、消化道重建方式的关系,以及机械吻合器和腹腔镜技术介入后AEG手术方式的变化情况。结果共纳入AEG患者563例,男443例,女120例;年龄15～91岁,平均年龄59岁。AEG在所有胃腺癌中所占比例约为25．897％（563／2174）。2004—2013年,AEG在当年胃腺癌中所占比例分别为18．89％（27／143）、14．81％（20／135）、17．06％（29／170）、14．21％（28／197）、19．78％（36／182）、33．64％（72／214）、31．17％（72／231）、29．31％（85／290）、30．42％（87／286）、37．15％（107／288）。SiewertI型AEG患者52例（9．24％）、Ⅱ型424例（75．31％）、11I型87例（15．45％）。手术路径：52例SiewertI型AEG患者均采用经胸路径;424例SiewertU型AEG患者中,采用经胸路径45例（10．61％）、经胸腹联合路径12例（2．83％）、经腹路径367例（86．56％）;87例Siewert111型AEG患者均采用经腹路径。切除范围：52例SiewertI型AEG患者均行食管下段及近端胃切除;424例Siewert1I型AEG患者中,行近端胃切除167例（39．39％0）、全胃切除257例（含残胃癌27例,60．61％）;87例SiewertⅢ型AEG患者均行全胃切除。消化道重建方式：52例SiewertI型AEG患者均行经胸食管胃吻合;424例SiewertII型AEG患者中,行食管胃吻合62例（14．62~70）,保留远端残胃的双通道吻合55例（12．97％）,食管空肠Roux-en-Y吻合248例（58．49％0）、食管空肠Braun吻合59例（13．92％）;87例Siewert111型AEG患者中,行食管空肠Roux-en-Y吻合61例（70．11％）、食管空肠Braun吻合26例（29．89％）。食管胃吻合、食管空肠吻合基本采用机械吻合器完成。自2005年起,腹腔镜技术介入AEG手术,腹腔镜下实施SiewertII型AEG手术239例、SiewertⅢ型AEG手术59例。结论SiewertI型AEG主要采用经胸路径,Siewert1I、11I型AEG手术路径由经胸路径向经腹路径转移,全胃切除比例上升,但尚未形成标准的手术方式。AEG手术方式应从手术的安全性、根治的彻底性、术后生命质量、手术的简约性以及腹腔镜技术的熟练程度等进行合理选择。     

不同压力CO2气腹对胃癌细胞增殖凋亡的影响

目的通过体外模拟气腹环境,观察CO2在不同压力下对胃癌细胞MKN-45增殖、凋亡的影响。方法以CO2为气体介质,在气腹机作用下维持密闭培养箱内压力为0、5、10、15mmHg,作用时间为4h。于处理后用血气分析仪检测培养液pH值;MTT法检测细胞增殖情况;通过流式细胞仪观察细胞凋亡指数变化;采用AnnexinV-FITC/PI双标染色、流式细胞仪测定凋亡细胞比例。结果处理结束后即刻检测,CO2组细胞培养液呈酸性,但在恢复正常培养后6h即恢复正常。MTT法检测细胞增殖变化,CO2组0、5、10mmHg压力下处理组与对照组比较无明显差异(P>0.05),而在15mmHg压力下处理组与对照组比较OD490值在前3d无明显差异(P>0.05),在4～7dOD490值下降非常显著(P<0.01)。在CO2环境下,0mmHg组细胞凋亡指数和凋亡比例与对照组相比无明显差异(P>0.05),而5、10、15mmHg组明显大于正常对照组(P<0.05)。结论在较低压力范围内(≤10mmHg)CO2对胃癌细胞增殖、凋亡影响不大,而在15mmHg压力下,CO2可抑制MKN-45细胞增殖,促进其凋亡。