胃癌gp96多肽复合物树突状细胞疫苗对Th1/Th2平衡的影响

目的探讨gp96多肽复合物树突状细胞(dendritic cells,DCs)疫苗对Th1/Th2平衡的影响.方法从胃癌组织中提取gp96多肽复合物负载从外周血单个核细胞诱导培养的DCs,用gp96多肽复合物DC疫苗诱导同一患者Th0淋巴细胞,ELISA检测培养上清中IFN-γ和IL-10的水平;以胃癌细胞裂解物负载的DC疫苗作对照.结果gp96多肽复合物DC疫苗诱导的T细胞分泌IFN-γ的量为(2 875±177.66)pg/ml,显著高于对照组(1 765±289.07)pg/ml(P＜0.01);分泌IL-10的量为(36±6.72)pg/ml,显著低于对照组(90±11.26)pg/ml(P＜0.05),二者之间存在显著的负相关(r=-0.915,P＜0.01).结论gp96多肽复合物DC疫苗可诱导Th1/Th2平衡向Th1漂移,显示了gp96多肽复合物DC疫苗可显著提高机体的免疫能力,为临床免疫干预治疗奠定基础.     

STAT3诱饵寡核苷酸抑制人胃癌细胞裸鼠腹腔种植的初步研究

目的 通过研究STAT3诱饵寡核苷酸对人胃癌MKN45细胞增生及荷瘤裸鼠的作用,探讨其对人胃癌细胞株裸鼠腹腔种植转移的影响.方法 以人胃癌细胞MKN 45为对象,四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetralolium,MTT)法检测STAT3诱饵寡核苷酸对肿瘤细胞的增殖抑制效应,凝胶迟滞电泳法(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测各组细胞STAT3 DNA结合活性.裸鼠随机分为4组,将不同方法处理的胃癌细胞接种裸鼠腹腔,观察各组裸鼠的腹腔肿瘤生成、腹水产生、死亡率及生存情况.结果 ①STAT3诱饵寡核苷酸对人胃癌细胞生长的抑制作用呈时间依赖性.②STAT3诱饵寡核苷酸可特异性抑制胃癌细胞STAT3的DNA结合活性.③STAT3诱饵寡核苷酸能明显减少裸鼠腹水产生,降低荷瘤鼠的死亡率,延长荷瘤鼠的生存期,与其他组相比有显著性差异(P＜0.05).结论 STAT3诱饵寡核苷酸对人胃癌裸鼠腹腔种植有明显的抑制作用.     

模拟CO2气腹对人胃癌MKN-45细胞增殖和细胞周期的影响

目的 通过建立体外模拟CO2气腹环境,研究CO2气腹对人胃癌MKN-45细胞增殖和细胞周期的影响。方法 建立体外模拟CO2的气腹环境,在全自动气腹机作用下维持密闭培养箱内压力为12mmHg,作用时间4h。处理后用MTT法检测细胞增殖情况;通过流式细胞仪观察细胞周期变化。结果 MTT法检测细胞增殖结果显示,气腹组人胃癌MKN-45细胞的增殖速度与对照组比较无显著性差异（P〉0．05）;流式细胞仪检测人胃癌MKN-45细胞周期,CO2气腹组增殖指数与对照组比较无显著性差异（P〉0．05）。结论 体外模拟持续12mmHg CO2气腹环境,连续对人胃癌MNK-45细胞作用4h,不会促进胃癌细胞的增殖和生长。     

Blumensaat角对诊断前交叉韧带损伤的参考价值

目的:用ROC曲线确定Blumensaat角对于诊断前交叉韧带损伤诊断的最佳临界值,以期对Blumensaat角应用于前交叉韧带损伤诊断的价值进行客观评价。方法:筛选2015年1月至2016年1月间做过膝关节镜检的患者167例,对研究对象的年龄、性别、患肢左右情况分别记录。调取MRI图像,分别测得各对象Blumensaat角,将研究对象分为两组:A组为Blumensaat角≤0°的研究对象,B组为Blumensaat角0°的研究对象。将B组的统计数据绘制ROC曲线,得出当Blumensaat角0°时,诊断前交叉韧带损伤的最佳临界值。而后根据ROC曲线所得最佳临界值,求得总样本的符合率。结果:研究对象的年龄、性别、患肢左右差异没有统计学意义。A组51例,其中金标准下(诊断前交叉韧带损伤的金标准:关节镜检)确诊前交叉韧带损伤的研究对象49例,前交叉韧带未损伤的研究对象2例。所以本研究中当Blumensaat角≤0°时,指示损伤的符合率达96.07%。B组116例,ROC曲线下面积为0.910,对应的最佳诊断界点值为15°,敏感性达70.0%,特异性达95.8%。即Blumensaat角≥15°时指示前交叉韧带损伤的概率较大,当0°Blumensaat角15°时多指示前交叉韧带未损伤。而后将Blumensaat角≤0°及≥15°作为诊断前交叉韧带损伤的指标,与关节镜镜检结果比较,测得总样本的符合率为92.8%。结论:Blumensaat角对于前交叉韧带损伤的诊断有价值。利用Blumensaat角辅助诊断前交叉韧带损伤时,当角度≤0°或≥15°时,前交叉韧带损伤的概率较大。     

不同压力CO_2气腹对人胃癌MKN-45细胞生长的影响

目的研究体外模拟不同压力CO2气腹环境对人胃癌MKN-45细胞生长增殖能力的影响。方法实验组于体外建立模拟CO2气腹环境,全自动气腹机维持气腹压力分别为9、12、15mm Hg,作用时间均为4h,对照组直接放入37℃、5%CO2孵箱中培养。处理后第0、0.5、1、1.5、2、2.5、3h,用pH计检测细胞培养液pH值变化;第1、2、3、4、5、6、7天,MTT法检测细胞增殖情况。结果15mmHgCO2气腹处理后胃癌细胞增殖较对照组下降显著(P<0.05),但9、12mmHg组与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。CO2气腹处理后细胞培养液pH值较对照组下降非常显著(P<0.01),但在恢复正常培养后最长3h即恢复正常。胃癌细胞增殖在第1天与不同压力CO2气腹处理后细胞培养液的即时pH值有显著相关性(P<0.05),而第2、3、4、5、6、7天均无相关性(P>0.05)。结论模拟9、12mmHgCO2气腹对胃癌MKN-45细胞增殖没有显著影响,模拟15mmHgCO气腹对胃癌MKN-45细胞增殖有显著的抑制作用。     

构建和谐护患关系提高骨科护理质量

[目的]提出构建和谐护患关系的几点思考，提高骨科护理质量。[方法]从分析护患关系的不协调因素出发，分析总结了此关系中所包含的2个层面的基本内容。[结果]影响护患关系的因素主要包括护士因素、患者因素、医院管理因素和社会因素。[结论]构建和谐护患关系应从完善骨科安全管理、增强护士的职业道德和专业技能培训及科室内病案、急救物品管理等方面完善。     

腹腔镜根治性全胃或近端胃切除后食管抵钉座置入新技术

目的 探讨腹腔镜根治性全胃切除或根治性近端胃大部切除后,牵引法放置食管抵钉座行食管残胃或食管空肠吻合新技术的临床价值.方法 回顾性分析2010年3月至2011年2月我中心应用牵引法将吻合器抵钉座置入食管完成腹腔镜根治性全胃切除食管空肠吻合或根治性近端胃大部食管残胃吻合的21例胃癌患者的临床资料.手术采用五孔法,在完成胃周淋巴结清扫和食管游离后,先在超过肿瘤上方3 cm处切开食管,将带牵引线抵钉座完全置入食管近端,保留牵引线在食管切口外,然后切割缝合器横断食管,借助牵引线将抵钉座定位杆拉出,最后在腹腔镜下完成吻合.结果 21例患者均在腹腔镜下顺利完成手术,无中转开腹.15例行腹腔镜根治性全胃切除,6例行根治性近端胃大部切除.平均手术时间为(257±38) min,术中平均出血量为(119±32) ml,术后平均下床活动时间为92.5±0.5)d,术后肛门平均排气时间为(3.7±0.8)d,术后平均住院时间为(7.5±2.6)d.本组患者术后无围手术期死亡,无吻合口出血、吻合口瘘等；但3例患者术后出现并发症,其中1例为肺部感染合并胸腔积液,经积极保守治疗后痊愈；1例为吻合口狭窄,经胃镜气囊扩张治疗后症状缓解；另有1例为切口感染,经积极切开引流换药后痊愈.术后病理检查:所有患者吻合圈和标本切缘未见癌细胞.组织学类型:高分化腺癌4例,中分化腺癌8例,低分化或黏液腺癌9例.UICC分期:Ⅰ期5例,Ⅱ期10例,Ⅲ期6例.21例患者平均随访时间为(11±4)个月96～17个月),无肿瘤复发、转移.结论 牵引法放置食管抵钉座行食管残胃或食管空肠吻合安全可靠,操作简单容易掌握,为腹腔镜下消化道重建提供了一种新的技术选择.     

甘肃陇西不同地区黄芪中重金属含量的测定

目的：测定甘肃道地产区不同区域黄芪中重金属铅的含量。方法：采用湿法消解对样品进行处理,根据中国药典2010年版附录ⅨE.重金属检查法,硫代乙酰胺试液作显色剂,对重金属含量进行测定。结果：甘肃陇西不同地区黄芪中重金属铅的含量不超标。结论：中国药典2010版规定的重金属检测法比较适合较大量、需综合评价的中药材中重金属含量的检测。     

胃癌根治术后胰瘘发生率及其影响因素分析的多中心前瞻性研究(附2089例报告)

目的探讨胃癌根治术后胰瘘发生率及其影响因素。方法采用前瞻性研究方法。选取2017年12月至2018年11月22家医疗中心收治的2089例(复旦大学附属中山医院380例、上海交通大学医学院附属仁济医院351例、上海交通大学医学院附属瑞金医院130例、北京大学肿瘤医院139例、福建省肿瘤医院128例、陆军军医大学第一附属医院114例、南昌大学第一附属医院104例、青海大学附属医院104例、潍坊市人民医院103例、福建医科大学附属协和医院102例、空军军医大学第一附属医院99例、浙江大学医学院附属邵逸夫医院97例、浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院60例、复旦大学附属肿瘤医院48例、西安交通大学第一附属医院29例、丽水市中心医院26例、广东省人民医院26例、江苏省人民医院23例、中山大学附属第一医院13例、吉林大学第二医院7例、新疆医科大学第一附属医院4例、首都医科大学附属北京朝阳医院2例)行胃癌根治术患者的临床病理资料。观察指标:(1)胃癌根治术后胰瘘发生率情况。(2)胃癌根治术后B级胰瘘治疗情况。(3)临床病理资料分析。(4)手术特征资料分析。(5)影响胃癌根治术后B级胰瘘发生相关因素分析。正态分布的计量资料以±s表示,多组间比较采用方差分析;计数资料以绝对数或百分比表示,多组间比较采用χ2检验;剔除临床病理资料和手术特征资料的缺失数据后行单因素分析,单因素分析采用t检验或χ2检验,将P<0.20因素纳入多因素分析;多因素分析采用Logistic回归模型。结果筛选出符合研究条件患者2089例,男1512例,女576例,性别数据缺失1例;年龄为(62±11)岁,体质量指数(BMI)为(23±3)kg/m2。(1)胃癌根治术后胰瘘发生率情况:2089例患者胃癌根治术后胰瘘总发生率为20.728%(433/2089),生化瘘发生率为19.627%(410/2089),B级胰瘘发生率为1.101%(23/2089),C级胰瘘发生率为0。(2)胃癌根治术后B级胰瘘治疗情况:23例胃癌根治术后发生B级胰瘘患者中,2例引流管放置时间>21 d,予以抗感染治疗;4例影像学检查发现腹腔积液,其中2例经B超引导下腹腔穿刺引流,1例尝试穿刺引流失败,1例未行穿刺引流,均予以抗感染治疗;11例影像学检查未发现腹腔积液,但临床表现发热或实验室检查示白细胞升高,均予以抗感染、抑制胰酶分泌治疗;6例无典型临床表现,给予生长抑素以抑制胰酶分泌且腹腔引流管放置时间延长(中位时间为7 d)。23例患者经治疗后均顺利康复,未行二次手术治疗。(3)临床病理资料分析:2089例患者中,无胰瘘患者BMI,新辅助治疗(无、有)分别为(23±3)kg/m2,1487例、160例,生化瘘和B级胰瘘患者上述指标分别为(23±3)kg/m2,386例、22例和(24±3)kg/m2,22例、1例,3类患者上述指标比较,差异均有统计学意义(F=5.787,χ2=8.269,P<0.05)。(4)手术特征资料分析:2089例患者中,无胰瘘患者手术方式(开腹、腹腔镜辅助、全腹腔镜),淋巴结清扫范围(D1、D2、其他),网膜囊切除范围(未切除、部分切除、全部切除),能量设备使用(无、超声刀、LigaSure、LigaSure+超声刀),生物胶使用(无、有),淋巴结清扫数目分别为737例、624例、292例,24例、1580例、51例,418例、834例、381例,63例、1530例、23例、16例,1431例、201例,(33±14)枚,生化瘘和B级胰瘘患者上述指标分别为146例、189例、74例,11例、389例、9例,110例、171例、128例,35例、359例、6例、9例,378例、31例,(31±14)枚和14例、5例、4例,0、20例、3例,6例、13例、4例,2例、18例、1例、2例,22例、1例,(37±16)枚,3类患者上述指标比较,差异均有统计学意义(χ2=15.578,9.397,15.023,28.245,8.359,F=4.945,P<0.05)。(5)影响胃癌根治术后B级胰瘘发生相关因素分析。单因素分析结果显示:能量设备使用是影响胃癌根治术后B级胰瘘发生的相关因素(χ2=9.914,P<0.05)。多因素分析结果显示:腹腔镜辅助手术、联合脏器切除、使用LigaSure+超声刀、淋巴结清扫数目是胃癌根治术后B级胰瘘发生的独立影响因素(比值比=0.168,3.922,9.250,1.030,95%可信区间为0.036~0.789,1.031~14.919,1.036~82.602,1.001~1.059,P<0.05)。结论胃癌根治术后B级胰瘘发生率较低,腹腔镜辅助手术、联合脏器切除、使用LigaSure+超声刀、淋巴结清扫数目是胃癌根治术后B级胰瘘发生的独立影响因素。临床试验注册:在美国ClinicalTrial.gov注册,注册号:NCT03391687。     

STAT3信号通路在IL-6抑制人单核细胞来源树突状细胞CCR7表达中的作用

目的 探讨STAT3信号通路在IL-6抑制人单核细胞来源树突状细胞(human monocytederived dendritic cells,moDCs)趋化因子受体7(C-C chemokine receptor type 7,CCR7)表达中的作用.方法 采用CD14+磁珠分离法从外周血中分离得到单核细胞,加入rhGM-CSF和rhIL-4在体外诱导培养树突状细胞.LPS用于刺激moDCs表达CCR7,RT-PCR检测不同浓度IL-6处理后再用LPS刺激后的moDCs CCR7 mRNA表达.Western blot检测IL-6处理moDCs和IL-6预处理后再加入STAT3磷酸化特各异性抑制剂JSI-124的moDCs STAT3、p-STAT3表达.IL-6预处理并抑制STAT3磷酸化后,LPS刺激48 h,RT-PCR检测moDCs CCR7 mRNA的表达,流式细胞仪检测moDCs CCR7蛋白表达,细胞迁移实验检测moDCs细胞迁移功能.结果 与单独LPS刺激组比较,IL-6明显抑制LPS刺激的moDCs CCR7mRNA的表达(P＜0.05).Western blot结果显示,与单独LPS刺激组比较,IL-6导致moDCs细胞内STAT3高度活化;而抑制STAT3信号高度活化后,与IL-6+LPS处理组比较,moDCs CCR7 mRNA表达、蛋白分子表达、细胞迁移能力明显升高(P＜0.05),与LPS刺激组无差异(P＞0.05).结论 IL-6通过高度活化STAT3信号通路抑制人单核细胞来源树突状细胞CCR7表达,导致树突状细胞的迁移能力受损,而靶向干预STAT3通路可能成为纠正树突状细胞迁移障碍的潜在手段.