致倦库蚊(Culex pipiens quinquefasciatus)对登革热病毒的易感性问题

由于预防或防止登革热/登革出血热(DF/DHF)的发生或流行,须赖其媒介控制,因而媒介的确定具有实际重要性.在我国海南岛和广东本病流行中,有曾从致倦库蚊中分离到DF病毒,并在实验传播中有阳性结果的报道,引起了国内外有关学者的注意.本文综合这方面的报告,结合我们研究的结果,认为这种库蚊并非DF的生物性传播媒介.     

淡色库蚊(Culex pipiens pallens)微卫星DNA位点的克隆

本研究利用地高辛标记的寡核苷酸(GT)8、(CAC)5、(GATA)4为探针,通过与基因组文库中的重组质粒DNA进行杂交,从686个重组质粒中筛选到8条淡色库蚊(Culex pipiens pallens)的微卫星(Microsatellite)DNA序列,已在GenBank数据库注册(Accession numberAY573280-AY573287).     

寡核苷酸探针法(PCR-ASO)检测家蝇kdr抗性相关的L1014F点突变

为检测家蝇对拟除虫菊酯击倒抗性kdr等位基因上的L1014F点突变,采用了寡核苷酸探针法(PCR-AlleleSpecificOligonucleotideprobe,PCR-ASO),用于检测该点突变。对L1014位的上下游DNA进行PCR扩增,并将纯化产物平行点样在带正电荷的尼龙膜上,用2条地高辛标记的特异性寡核苷酸探针,1条为敏感型,1条为突变型,与之杂交,根据显影的阳性信号判断待检样品的kdr等位基因型。该方法能区分敏感纯合子、抗性纯合子及杂合子,是检测家蝇kdr抗性的有用工具。     

淡色库蚊中溴氰菊酯和生物丙烯菊酯抗性发展与击倒抗性基因频率之间的关系?

使用溴氰菊酯和生物丙烯菊酯对采自北京的淡色库蚊蚊株进行抗药性筛选,筛选时,4龄幼虫被置于LC_(50)浓度值的水体中饲养。经过7代的不间断筛选,蚊虫对溴氰菊酯和生物丙烯菊酯的抗性倍数分别上升了12.9倍和4.8倍,对应敏感株,抗性倍数分别为217.8倍和41.6倍。PCR检测结果显示,kdr抗性基因的频率在逐代上升。F_7代时,溴氰菊酯筛选株和生物丙烯菊酯筛选株的kdr抗性基因频率已分别上升至98.96%和97.87%。结果表明,Phe1014的抗性纯合子频率和抗性杂合子频率均与LC_(50)值之间具有显著相关性。本文证明了高浓度的拟除虫菊酯杀虫剂筛选会使Phe1014突变频率快速的上升。     

结核杆菌阳性女性肺癌的临床病理分析

近年来,女性肺癌的发病率在世界范围内迅速上升,除与吸烟和大气污染有关外,最近研究表明肺结核是一个独立的病因因素。我们应用多聚酶链反应技术检测女性肺癌中的结核杆菌ＤＮＡ（ＴＢ－ＤＮＡ）,并探讨与女性肺癌临床病理的关系。１材料与方法１．１材料 选用南方医院病理科１９９７年１月～１９９８年６月经手术切除病理证实的女性原发性肺癌标本２０例,分类标准参照１９８１年ＷＨＯ分类。所有标本常规石蜡切片,ＨＥ染色,光镜观察,同时回顾分析临床资料。１．２ ＰＣＲ检测 结核杆菌检测试剂盒购于中山医科大学达安基因诊断中心…     

原位PCR实验技术及其应用前景

原位ＰＣＲ（ＩｎＳｉｔｕＰＣＲ）技术自１９９０年Ｈａａｓｅ〔１〕等人建立以来,在最近几年得到了快速的发展和应用。聚合酶链反应（ＰＣＲ）是一种快速测定核酸的高效、敏感方法,已在许多疾病的研究与诊断中得到了广泛应用。但是,ＰＣＲ技术须从混合的组织细胞中提取核酸,由于无法将扩增的核酸片段在特定的组织细胞中定位分析,所以难以肯定扩增产物的真正细胞来源。原位杂交虽具有细胞内定位能力,但对于核酸中个别少数变异或差异的序列和细胞内靶核酸含量少时则难以鉴别出来,而且有假阳性的干扰。原位ＰＣＲ技术把ＰＣＲ和原位杂…     

家蝇二氯苯醚菊酯抗性株分化的研究

本研究采用随机扩增多态DNA(RAPD)技术,探索了家蝇二氯苯醚菊酯抗性株(2000倍)在DNA分子水平上的分化。实验数据采用两种分析方法:1)用RAPDPLOT计算出个体间的遗传距离,进一步用PHYLIP软件包的NEIGHBOR程序进行UPGMA(非加权对组算术平均值聚类)聚类分析;2)经bootstrip方法随机取样100次,然后再进行UPGMA分析,在PHYLIP软件包的CONSENSE中形成合意树。两种分析方法结果极为类似,在聚类树中首先是抗性与非抗性个体分成两群,然后雌、雄个体分成两群,说明抗性株在DNA分子水平上已有明显的分化。OPD-02引物在全部抗性株个体中扩增出了非抗性株所没有的特异性同一片段(100bp左右),提示此片段有可能作为家蝇二氯苯醚菊酯抗性株的分子标记,但需进一步研究确定。