过氧化氢诱导同步化HepG2细胞DNA损伤和凋亡的敏感时相研究

目的:探讨过氧化氢(H2O2)诱导HepG2细胞的DNA损伤和凋亡效应在细胞周期不同时相的敏感性.方法:利用胸腺嘧啶核苷(TdR)阻断肝癌HepG2细胞于G1期末后,去除胸苷,培养不同时间,分别得到同步化的G1期、S期和G2/M期细胞,150 μmol/L的H2O2处理12 h,采用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)测定细胞的DNA损伤;将各期细胞用200 μmol/L的H2O2处理,采用流式细胞术测定细胞凋亡.同时实验设立未同步化和正常对照组.结果:①分别获得 88.6%的G1期细胞、78.1%的S期细胞、66.8%的G2/M期细胞.② SCGE结果显示,同步化于S期和G2/M期细胞的DNA尾长明显增长,尾部DNA百分比含量和尾矩明显增加,其中S期细胞效应最为显著.③凋亡检测结果显示,同步化各组细胞的凋亡率明显高于未同步化组,以S期最为显著.结论:H2O2诱导HepG2细胞DNA损伤和细胞凋亡在细胞周期的不同时相效应敏感性不同,主要诱导S期细胞的DNA损伤和凋亡.     

荷瘤大鼠60Co局部照射后骨髓蛋白质的差异表达

目的:观察荷瘤大鼠受60Co局部照射后骨髓中蛋白质的差异表达.方法:制备荷瘤大鼠动物模型,60Co局部照射后分别提取荷瘤组和照射组大鼠骨髓蛋白质,运用双向聚丙烯酰胺凝胶电泳技术分析2组荷瘤大鼠骨髓蛋白质的差异表达.结果:荷瘤大鼠经60Co局部照射骨髓有24个蛋白点表达发生变化,其中出现2个新蛋白点,4个蛋白点表达量下降,1个蛋白点表达量升高,17个蛋白点在照射后消失.结论:60Co局部照射可诱导荷瘤大鼠骨髓蛋白质差异表达.     

霞浦某市场虾苗酱的致突变性试验研究

目的 通过细菌回复突变试验和体外哺乳类细胞HGPRT基因突变试验探索虾苗酱是否存在致突变性。方法 细菌回复突变试验选用经鉴定符合要求的鼠伤寒沙门氏菌TA97a、TA98、TA100、TA1535及大肠杆菌,试验设置5 000、1 580、500、158、50μg/皿剂量组进行试验。体外哺乳类细胞HGPRT基因突变试验采用MTT法检测虾苗酱对V79细胞的毒性,确定以5 000μg/mL为最高剂量进行V79细胞HGPRT基因突变试验。结果 各剂量组虾苗酱对测试菌株诱发产生的回变菌落数均未超过溶剂对照组回变菌落数的2倍;各剂量组虾苗酱的V79细胞集落突变率与溶剂对照组差异无统计学意义。结论 在本试验条件下,霞浦虾苗酱无细菌回复突变性、无基因突变作用。     

杀蚊BT菌株LLP29高效制剂的安全性研究

目的通过毒性实验研究,评价杀蚊Bt菌株LLP29高效制剂的毒性。方法根据GB 15670-1995《农药登记毒理学试验方法》和农业部《农药登记资料规定》,对杀蚊Bt菌株LLP29高效制剂进行毒理学试验。结果试验结果表明,杀蚊Bt菌株LLP29高效制剂大鼠急性经口毒性试验LD5010 000 mg/(kg·BW)、小鼠急性经口毒性LD5020 000mg/(kg·BW),毒性分级为实际无毒;大鼠急性经皮毒性试验LD505 000mg/(kg·BW),毒性分级为微毒;家兔急性皮肤刺激性试验和眼刺激性试验结果为无刺激性;豚鼠皮肤变态反应试验结果为弱致敏物。结论杀蚊Bt菌株LLP29高效制剂,经系列毒性试验结果、按农药产品毒性分级评价,属微毒或实际无毒,其毒性较化学农药低,在灭蚊施药使用过程中对人有较高的安全性。     

锌、硒、维生素E及其协同作用对梭曼中毒大鼠血清谷胱甘肽含量的影响

0　引言　梭曼 ,化学名称为甲氟膦酸特己酯 ,脂溶性强 ,中毒途径多 ,抑制体内乙酰胆碱酯酶活性作用迅速 ,中毒酶老化快 ,难防难治 .谷胱甘肽 (GSH)是一种重要的非蛋白巯基抗氧化剂 ,它能调节机体氧化 -还原反应速度及时清除体内过剩的自由基 ,在维持机体内环境自稳态方面起重要的作用 .本研究旨在初步观察锌、硒、维生素 E及其复合物对 GD中毒大鼠血清 GSH含量的影响 .1　材料和方法1.1　材料　上海产 SD大鼠 ,♂ ,体质量 (2 2 4.9± 46 .0 ) g,80只 ,由本校实验动物中心提供 .葡萄糖酸锌 AR,亚硒酸钠AR,维生素 E AR等 ,购于 Sigma…     

复合抗氧化剂对荷瘤大鼠放射治疗氧化损伤保护作用的分子机制

目的:探讨荷瘤大鼠60Coγ射线局部辐射引起的全身氧化损伤以及复合抗氧化剂的保护作用的分子机制。方法:采用Walker-256肿瘤细胞株接种大鼠皮下,得到实体瘤,摘除实体瘤分割成小块植入大鼠的右后腿皮下,制成大鼠荷瘤模型,将荷瘤大鼠随机分成3组,分别为肿瘤模型组、单纯放疗组和抗氧化剂保护组,同时选取同批正常大鼠作为阴性对照组。抗氧化剂保护组每日给予复合抗氧化剂灌胃,分次对单纯放疗组和抗氧化剂保护组的荷瘤大鼠进行60Coγ射线局部照射4次,每次间隔1周,累计剂量为47Gy,最后一次照射后7d,处死大鼠,分离血清分别检测一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、谷胱甘肽(GSH)、含铜锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)、含锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)和总抗氧化力(TAC)。结果:与阴性组相比单纯放疗组血清NO含量、NOS活性显著升高(P<0.01,P<0.05),抗氧化剂保护组NO含量和NOS活性较单纯放疗组显著降低(P<0.01,P<0.05)。单纯放疗组GSH,CuZn-SOD,Mn-SOD和TAC显著低于非照射组(P<0.05),而抗氧化剂保护组T-SOD,Mn-SOD,GSH和TAC显著高于单纯放疗组(P<0.05)。结论:60Coγ射线局部放疗引起的全身氧化损伤很可能是通过提高NOS活性,诱导NO的大量生成而导致的。高效的复合抗氧化剂可以通过抑制NOS活性,减少NO合成,以及提高GSH,CuZn-     

复合抗氧化剂对小鼠阿霉素氧化损伤及抗氧化酶活性的影响

目的 :观察腹腔阿霉素化疗对整体的氧化损伤以及抗氧化剂对这种损伤的保护效果 .方法 :二级雄性昆明种小鼠 6 0只随机分为阴性组、阳性组和 3个不同剂量的抗氧化剂保护组 .除阴性对照组给予相应剂量的生理盐水注射外 ,其余各组给予阿霉素一次性ip ,剂量为 5mg/kg体质量 .3个抗氧化剂保护组从注射之日起每日给予低、中、高 3种剂量的抗氧化剂ig ,阴性和阳性对照组给予相应体积的溶剂ig ,连续 1 0d .至第 1 1日 ,处死实验动物 ,取血清和全血分别测定丙二醛(MDA)含量 ,超氧化物歧化酶 (SOD)活性、过氧化氢酶 (CAT)活性、血红蛋白 (Hb)含量和总蛋白含量 .结果 :阳性组的MDA含量较阴性对照组显著升高 (P <0 .0 5 ) ,各抗氧化剂保护组的MDA含量较阳性对照组均有不同程度的降低 ,但随着抗氧化剂剂量增加 ,抑制MDA效果反而下降 .阳性组T SOD的活性较阴性组显著降低 (P <0 .0 5 ) ,低剂量抗氧化剂组T SOD活性较阳性对照组显著升高 .阳性组CAT的活性较阴性组显著升高 (P <0 .0 5 ) ,抗氧化剂保护组对此呈现出了一种拮抗作用 .结论 :ip阿霉素化疗可以引起机体整体的氧化损伤 ,抗氧化剂可以起到有效地保护作用 ,但不合适的抗氧化剂也会引起机体的氧化损伤     

光气诱导小鼠原代肺Ⅱ型细胞凋亡

目的 :探讨光气是否诱导肺Ⅱ型细胞发生凋亡 .方法 :2 6只二级BALB/c小鼠 ,雄性 ,随机分为两组 :染毒组和正常对照组 (各 1 3只 ) .正常对照组小鼠以空气为对照 ,染毒组小鼠给予 1 1 .9mg/L剂量的光气 ,时间为 5min ,染毒后 4h ,比较两组小鼠肺脏的湿干比、病理学变化 .分离、培养小鼠原代肺Ⅱ型细胞并用电镜观察染毒组肺Ⅱ型细胞凋亡情况 .结果 :1 1 .9mg/L的光气染毒 5min ,小鼠肺脏湿干比 (6 .4 2± 1 .0 0 )比正常对照组 (4 .2 5± 0 .4 7)显著增加 (P <0 .0 5 ) ;光镜下观察肺组织可见肺水肿发生 ;单宁酸染色和电镜鉴定小鼠原代肺Ⅱ型细胞 ;电镜显示光气染毒肺水肿小鼠原代肺Ⅱ型细胞出现凋亡小体 .结论 :光气染毒可造成小鼠肺水肿并诱导小鼠原代肺Ⅱ型细胞发生凋亡     

急性双光气染毒对兔肺泡和肺Ⅱ型细胞磷脂合成与分泌的影响

目的　研究日本大耳兔双光气肺损伤后 ,肺泡和肺Ⅱ型细胞磷脂的变化及机制。方法　将 35只纯种日本大耳白兔随机分为对照组 (10只 )、中毒即刻组 (5只 )、中毒 2h组 (5只 )、中毒 4h组 (5只 )、中毒 8h组 (5只 )、中毒 12h组 (5只 ) ;染毒浓度为 30 0 μg·L-1,中毒后按不同时间点放血法处死实验动物 ,取肺并用肺灌洗液对支气管肺泡进行多次灌洗 ,吸集灌洗液离心取上清 ,检测灌洗液中磷脂含量的变化 ;肺组织作冰冻切片 ,显微分光光度计吸收光谱法进行磷脂定量分析。结果　双光气染毒大鼠后 ,与正常对照组相比 ,实验组不同时间点的肺泡内磷脂含量明显降低(P <0 .0 1)。双光气致肺损伤初期 ,肺Ⅱ型细胞和肺泡内磷脂含量迅速下降 (P <0 .0 1) ,表现为磷脂分泌功能降低 ;染毒 2h后 ,肺Ⅱ型细胞内磷脂合成增加 ,分泌到肺泡内的磷脂也略有升高 ,但仍显著低于对照组 (P <0 .0 1) ;染毒 4h后 ,迟发毒性反应加重 ,表明无论磷脂合成还是分泌功能都受到影响 ,虽然尚存在较低的磷脂分泌功能 ,但回升速度减缓 ;染毒 8h后 ,肺泡内的磷酯含量也呈降低趋势。随染毒时间的变化 ,肺Ⅱ型细胞内外磷脂含量呈对应性改变。结论　双光气中毒可造成肺泡Ⅱ型细胞合成、分泌磷脂功能障碍 ;肺损伤早期 ,肺泡表面活性物质含量减少 ,