健脾清肺解毒汤治疗SARS恢复期疗效观察

笔者于2003年5月25日～6月10日用健脾清肺解毒汤治疗SARS恢复期病人20例，疗效满意，现将结果报道如下。     

低分子量肝素对外周血内皮祖细胞数量和功能的影响

目的通过观察低分子量肝素(LMWH)对体外培养的外周血内皮祖细胞(EPC)数量和功能的影响,旨在探讨EPC参与LMWH治疗心血管疾病的作用机制。方法采用密度梯度离心法从外周血获取单个核细胞,培养7 d后,洗去非贴壁细胞,分别加入50,100,200和400 kU.L-1的LMWH培养一定时间(6,12,24,48和72 h)后收集细胞进行研究。激光共聚焦显微镜鉴定FITC-UEA-Ⅰ和Dil-acLDL双染色阳性细胞为正在分化的EPC,并在倒置荧光显微镜下计数。分别采用MTT比色法,改良的Boyden小室和黏附能力实验来观察EPC的增殖能力,迁移能力和黏附能力。结果LMWH能显著增加外周血EPC数量,200 kU.L-1浓度的LMWH作用48 h影响最为显著(对照vs200 kU.L-1LMWH,44±5vs112±9)。LMWH也能显著改善外周血EPC的增殖能力(对照vs200 kU.L-1LMWH,0.504±0.097vs0.828±0.109),迁移能力(对照vs200 kU.L-1LMWH,8±6vs40±8)和黏附能力(对照vs200 kU.L-1LMWH,9±4vs29±4)。结论增加EPC的数量及促进其增殖、迁移和黏附等功能是LMWH治疗心血管疾病的作用机制之一。     

小鼠ACE2基因的克隆和体外表达以及序列分析与组织分布

目的:深入研究血管紧张素转化酶2(angiotensin-converting enzyme 2,ACE2)在心血管疾病发病机理中的作用及在高血压基因治疗中的应用,克隆和体外表达小鼠ACE2基因,并进行核苷酸和氨基酸序列分析和组织分布特征研究.方法:采用RT-PCR方法,从小鼠肾组织中扩增出ACE2基因的全长cDNA序列,TA克隆到pGEM-T easy载体,亚克隆到pcDNA3.1 载体,构建重组真核表达质粒pmACE2,测序鉴定.采用脂质体法将pmACE2转染Cos7细胞,分别用RT-PCR和SDS-PAGE检测ACE2的转录和表达.CLUSTALX 1.8生物软件分析小鼠和大鼠及人ACE2蛋白的多序列比较.采用RT-PCR技术研究小鼠ACE2组织分布的特异性.结果:①RT-PCR扩增片段约2.6 kb,重组真核表达质粒pmACE2测序结果表明,克隆片段存在A701G、T1102C和T1330C 3处变异,其序列与以往报道不一致,cDNA全长为2 397 bp,而与NCBI Refseq数据库(XM-136130)中cDNA全长1 902 bp不符;②SDS-PAGE显示pmACE2表达产物的相对分子量约80 kD;③氨基酸序列分析表明,小鼠ACE2主要由N末端的信号肽序列(第1-18位残氨)、含有锌结合位点保守序列HHEMGHIQ(第373-380位残氨)的催化结构域和跨膜结构域(第738-765位残氨)组成;④小鼠ACE2与人有84%的相似性,与大鼠有90%的相似性,三者同源;⑤ACE2在肺、心和肾组织中大量表达,在睾丸和肝组织中也有表达.结论:成功克隆并体外表达了小鼠ACE2基因,不同物种ACE2组织分布的特异性不尽相同.     

阿司匹林对内皮祖细胞功能及其诱导型一氧化氮合酶的影响

目的:观察阿司匹林对外周血内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)数量和功能的影响。方法:采用密度梯度离心法从外周血获得单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被的培养板上,培养7d后收集贴壁细胞,分别加入不同浓度阿司匹林(分别为1、2、5、10mmol/L)培养3、6、12、24h。激光共聚焦显微镜鉴定FITC-UEA-I和Dil-acLDL双染色阳性细胞为正在分化的EPCs,将其在倒置荧光显微镜下计数。然后分别采用MTT比色法、改良的Boyden小室、黏附能力测定实验和体外血管形成试剂盒来观察EPCs的增殖能力、迁移能力、黏附能力和体外血管形成能力,免疫印迹杂交法(Western blot)半定量测定诱导型一氧化氮合酶(iNOS)含量。结果:阿司匹林能减少外周血EPCs数量,并且EPCs数量随阿司匹林浓度和作用时间增加而减少。EPCs的增殖能力、迁移能力、黏附能力、体外血管形成能力和iNOS含量亦随阿司匹林浓度和作用时间增加而降低。结论:阿司匹林通过减少EPCs中iNOS含量,降低EPCs的增殖能力、迁移能力、黏附能力和体外血管形成能力,从而抑制内皮细胞的生成。     

应用酵母双杂交系统研究与血管紧张素-(1-7)相互作用的蛋白

目的用酵母双杂交系统筛选与血管紧张素-(1-7)相互作用的蛋白,为该7肽在体内如何发挥功能提供线索。方法构建Ang-(1-7)的真核表达载体pBD—Ang-(1—7),转化酵母菌YRG-2,进行毒性和自身非特异激活性检验。与大鼠心肌细胞文库质粒共同转化酵母细胞,在营养缺陷培养基上进行双杂交筛选,选择既能在3重营养缺陷培养基上生长,也能使X—gal变蓝的克隆为阳性,提取靶质粒后进行复交,将真阳性质粒测序,进行生物信息学分析。结果诱饵载体构建成功并转化酵母,对酵母无毒性,无自身激活现象。筛选出的蛋白主要参与细胞代谢和蛋白合成。结论Ang-(1-7)可能影响细胞内某些蛋白合成和细胞代谢,发挥对血管紧张素Ⅱ的结抗作用。酵母双杂交结果为Ang-(1—7)的作用途径的进一步研究提供了分子生物学线索。     

Axin2阳性细胞在牙周组织发育与再生中的作用

WNT信号通路作为进化中高度保守的信号通路,在牙周组织生长发育和损伤修复中发挥重要调控作用。Axin相关蛋白Axin2作为WNT信号通路的直接效应分子,可对WNT效应细胞进行良好标记。研究显示,牙周组织内Axin2阳性(Axin2⁺)细胞具有自我更新、复制及多向分化潜能。本文对Axin2⁺细胞在牙周组织发育过程中的时空分布,以及Axin2⁺细胞在牙周组织发育、再生和组织改建中的作用及其调控机制研究进展作一综述,以期为牙周组织再生提供新的思路。现有研究表明,Axin2⁺细胞是牙周组织发育的重要干细胞来源,Axin2⁺细胞在拔牙窝愈合、种植体骨整合、牙周组织改建和结合上皮再生中均发挥重要作用。Axin2⁺细胞的功能受到经典WNT信号通路的正向调控。然而,其他信号通路对Axin2⁺细胞的调控机制仍有待阐明。     

陕西铜川地区居民肠易激综合征流行病学调查研究

目的:探讨陕西铜川地区常住居民肠易激综合征(IBS)的患病率、亚型、分布特点以及危险因素。方法:采用多级、分层、整群随机抽样法,对铜川市50个社区居民进行面访式问卷调查。IBS诊断采用罗马Ⅲ标准,分型采用Bristol粪便形状分型量表,同时完成焦虑自评量表、抑郁自评量表及睡眠质量评估量表。结果:完成调查并回收问卷合格者8080份,有效率90%。共检出符合罗马Ⅲ标准的IBS患者1042例,其中男性560例(14.6%),女性482例(12.8%),男女检出率差异无统计学意义。患病率在30~39岁年龄段最高(20.1%),20~29岁年龄段次之(18.6%)。符合罗马Ⅲ分型标准中最多见的是未定型(40.9%),其次男性以腹泻型(28.8%)多见,女性则以便秘型(21.4%)多见。脑力劳动组、肥胖组、腹部手术组、焦虑失眠组、服用抗生素及止痛药物组的IBS患病率明显高于对照组。多因素分析显示较多食用辛辣食物,IBS患病风险提高1.96倍,而低脂高蛋白饮食则可以降低IBS的风险。脑力劳动和焦虑、失眠同样是IBS患病的危险因素。结论:IBS是陕西铜川地区居民的常见病、多发病,脑力劳动、辛辣刺激食物、胃肠道感染、腹部手术史、服用抗生素或止痛药物史、焦虑和失眠是IBS患病的危险因素,而低脂、高蛋白饮食则是保护性因素。     

噻托溴铵粉吸入剂联合环磷腺苷葡胺治疗慢性肺源性心脏病急性加重期临床疗效观察

目的 探讨噻托溴铵粉吸入剂联合环磷腺苷葡胺治疗慢性肺源性心脏病急性加重期的疗效.方法 将148例急性加重期慢性肺源性心脏病患者分为观察组(n=74)对照组(n=74),前者接受噻托溴铵粉吸入剂联合环磷腺苷葡胺治疗,后者接受环磷腺苷葡胺治疗.结果 观察组治疗前一秒用力呼气容积(FEV1)、用力肺活量(FVC)、PaO2、PaCO2、pH与对照组比较差异均无统计学意义[(1.27 ±0.44)L vs (1.24±0.47)L、(2.49 ±0.74)L vs (2.43 ±0.77)L、(51.6±6.6) mmHg vs(51.2±6.7) mmHg、(69.1 ±8.4)mmHg vs (69.5 ±8.7)mmHg、7.27±0.03 vs 7.26±0.04,P＞0.05].治疗后观察组FEV1、FVC、PaO2、PaCO2、pH与对照组比较差异均有统计学意义[(1.45±0.39)Lvs (1.31±0.41)L、(2.71±0.63)L vs (2.49±0.54)L、(72.8 ±5.3)mmHg vs (62.5±6.2)mmHg、(47.7±5.7)mmHgvs(56.2±7.2)mmHg 、7.34±0.02 vs7.31 ±0.03,t =2.13、2.28、10.86、-12.65、7.16,P＜0.05].两组治疗前NYHA分级比较差异均无统计学意义(Ⅰ级为0、Ⅱ级17.6％、Ⅲ级47.3％、Ⅳ级35.1％ vs Ⅰ级为0、Ⅱ级18.9％、Ⅲ级44.6％、Ⅳ级36.5％,P＞0.05).治疗后观察组患者NYHA分级(Ⅰ级25.7％、Ⅱ级44.6％、Ⅲ级20.3％、Ⅳ级9.4％)显著优于对照组(Ⅰ级20.3％、Ⅱ级27.0％、Ⅲ级36.5％、Ⅳ级16.2％,t=2.27,P＜0.05).结论 噻托溴铵粉吸入剂联合环磷腺苷葡胺治疗急性加重期慢性肺源性心脏病患者的疗效确切,可显著改善其心肺功能.     

雷贝拉唑联合莫沙必利治疗老年反流性食管炎患者的效果及对胃肠激素、氧自由基水平的影响

目的 探讨雷贝拉唑联合莫沙必利治疗老年反流性食管炎(RE)患者的效果及对胃肠激素、氧自由基水平的影响.方法 择取2018年9月至2020年10月我院收治的120例RE患者为研究对象,按照治疗方案将其分为对照组和观察组,各60例.对照组给予莫沙必利治疗,观察组在对照组治疗方案基础上加施雷贝拉唑.比较两组的临床疗效及治疗前...