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黄芪对内皮祖细胞数量与功能及其iNOS的影响 总被引:7,自引:0,他引:7
目的:观察黄芪对外周血内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)数量、功能及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的影响。方法:采用密度梯度离心法从人外周血获得单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被的培养板上,培养7d后收集贴壁细胞,加入不同浓度黄芪注射液(10、20、50、100g/L)培养24h,同时对照组与黄芪50g/L组分别培养6、12、24、48h。激光共聚焦显微镜鉴定FITC-UEA-I和Dil-acLDL双染色阳性细胞为正在分化的EPCs,将其在倒置荧光显微镜下计数。然后分别采用MTT比色法、改良的Boyden小室、黏附能力测定实验和体外血管生成试剂盒来观察EPCs的增殖能力、迁移能力、黏附能力和体外血管形成能力,免疫印迹杂交法半定量测定iNOS含量。结果:黄芪增加外周血EPCs数量、增殖能力、迁移能力、黏附能力和体外血管形成能力,并且其数量、增殖能力、迁移能力、黏附能力和体外血管形成能力随黄芪浓度和作用时间的增加而增加,黄芪还增加EPCs中iNOS含量。结论:黄芪增加EPCs的数量、增殖能力、迁移能力、黏附能力和体外血管形成能力,与其增加iNOS含量有关。 相似文献
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目的观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对外周血内皮祖细胞(EPCs)血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/KDR)mRNA表达的影响。方法密度梯度离心法获取外周血单个核细胞(MNCs),培养7天后,收集贴壁细胞并加入不同浓度AngⅡ(10^-5mol/L,10^-7mol/L,10^-9mol/L)干预一定时间(6h,12h,24h和48h)。多波长激光共聚焦显微镜鉴定FITC-UEA-I和DiI-acLDL双染色细胞为正在分化的EPCs,流式细胞仪检测其表面标志进一步鉴定EPCs,倒置荧光显微镜下计数。然后,收集贴壁细胞,Trizol法提取总RNA,以RT-PCR法对EPCs的KDR mRNA表达进行半定量测定,并观察缬沙坦(valsartan)对此的影响。结果AngⅡ呈浓度依赖方式诱导KDR mRNA的表达增加;10^-5mol/L的AngⅡ作用6h,EPCs的KDR mRNA表达即有显著增加(P〈0.01),随着时间延长,KDR mRNA表达逐渐增加,至48h达最高峰。而缬沙坦可显著抑制AngⅡ诱导的KDR mRNA的表达增加,使之接近于正常水平。结论AngⅡ可显著增加EPCs的KDR mRNA表达,并呈浓度和时间依赖性。此作用可被ATI受体拮抗剂缬沙坦所阻断,提示AngⅡ通过AT1受体介导上调EPCs的KDR mRNA的表达。 相似文献
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目的观察肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对外周血内皮祖细胞(EPC)功能及一氧化氮合酶含量的影响。方法采用密度梯度离心法从外周血获得单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被的培养板上,培养7d后收集贴壁细胞,加入不同浓度TNF-α(分别为0,10,20,50和100mg/L)分别培养0,6,12,24和48h。激光共聚焦显微镜鉴定异硫氰酸荧光黄标记荆豆凝集素Ⅰ和Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白双染色阳性的细胞为正在分化的EPC;将其在倒置荧光显微镜下计数,然后分别采用MTT比色法、改良的Boyden小室、黏附能力测定实验和体外血管生成试剂盒来观察EPC的增殖、迁移、黏附和体外血管形成能力。免疫印迹杂交法(Westernblot)半定量测定诱导型和内皮型一氧化氮合酶(iNOS和eNOS)含量。结果TNF-α降低外周血EPC增殖、迁移、黏附、体外血管形成能力、iNOS和eNOS含量,并且EPC增殖、迁移、黏附、体外血管形成能力、iNOS和eNOS含量随TNF-α浓度与作用时间增加而降低。结论TNF-α降低EPC的增殖、迁移、黏附和体外血管形成能力,还减少EPC中iNOS和eNOS含量。 相似文献
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冠心病患者外周血内皮祖细胞的数量和功能变化 总被引:4,自引:0,他引:4
目的:观察冠心病患者外周血内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPC)数量和功能的改变.方法:选择冠心病患者和非冠心病患者各20例,用密度梯度离心法从外周血获取单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白(fibronectin)包被培养板,培养7d后贴壁细胞进行细胞化学分析.激光共聚焦显微镜鉴定FITC-UEA-Ⅰ和DiI-acLDL双染色阳性细胞为正在分化的EPC.采用MTT比色法、改良的Boyden 小室和粘附能力测定实验,观察EPC的增殖能力和迁移能力及粘附能力.结果:冠心病患者外周血EPC数量明显减少(31.8±7.7 vs 59.5±10.6 EPCs/×200视野,P<0.05),且冠心病患者外周血EPC的粘附能力和迁移能力及增殖能力也明显受损.结论:冠心病患者外周血内皮祖细胞数量减少、功能减退. 相似文献
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目的 利用转基因小鼠探究牙周膜内Gli 阳性(Gli1 +)细胞的表达分布以及Gli1 +细胞在牙周组织发育过程中的作用。方法 收集3、6和8周龄Gli1 lacZ/+小鼠下颌骨,通过β-半乳糖苷酶组织化学染色(X-gal染色)观察牙周膜内Gli1 +细胞的时间和空间分布特点。然后,通过注射他莫昔芬诱导3周龄Gli1-Cre ERT2/+;R26R tdTomato/+小鼠表达红色荧光蛋白tdTomato,对Gli1 +细胞及其子代细胞(tdTomato +细胞)进行动态追踪。结果 3周龄小鼠牙周膜内分布大量Gli1 +细胞,随着年龄的增长,Gli1在牙周膜内的数量逐渐减少(P<0.05)。tdTomato +细胞随着诱导时间的延长,数量逐渐增加(P<0.05),且逐渐分化成熟为成纤维细胞、牙骨质细胞和骨细胞。结论 牙周膜内Gli1 +细胞具有多向分化的潜能,是牙周组织发育过程中重要的细胞来源。 相似文献
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牙周健康不仅是口腔健康的重要基础,也与全身健康有着密不可分的联系。因此,提升牙周病学教学水平、提高医学生牙周病诊疗能力迫在眉睫。近年来,翻转课堂作为一种与时俱进的新型教学模式在医学领域人才培养中得到广泛应用。文章系统分析了牙周病学教学过程中翻转课堂的多元化模式,发现将翻转课堂与以问题为基础的教学法(problem-based learning,PBL)和以案例为基础的教学法(case-based learning,CBL)相结合,有助于提升学生学习兴趣、激发学习的主动性和提高学习效率;将翻转课堂与以团队为基础的教学法(team-based learning,TBL)相结合,有助于实现个性化学习与团队学习的融合,提升学生的沟通和团队协作能力;将翻转课堂与微课相结合,有利于充分发挥信息化手段的优势,突破时空的限制,并提升学生的自主学习能力。翻转课堂与多种教学模式的有机融合为牙周病学教学模式的改革提供了方向。 相似文献
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他汀类药物对外周血内皮祖细胞数量和功能的影响 总被引:13,自引:0,他引:13
目的 观察氟伐他汀和辛伐他汀对外周血内皮祖细胞 (endothelialprogenitorcell,EPC)的影响。方法 采用密度梯度离心法从外周血获取单个核细胞 ,将其接种在人纤维连接蛋白包被培养板 ,培养 7d后 ,收集贴壁细胞 ,加入不同浓度氟伐他汀 (分别为 0 0 1、0 1、1 0、10 μmol/L)和辛伐他汀 (1 0 μmol/L)培养一定的时间 (6、12、2 4h和 4 8h)。激光共聚焦显微镜鉴定FITC UEA Ⅰ和DiI acLDL双染色阳性细胞为正在分化的EPC ,并在倒置荧光显微镜下计数。然后分别采用MTT比色法、改良的Boyden小室和黏附能力测定实验来观察EPC的增殖能力、迁移能力和黏附能力。结果 氟伐他汀显著增加外周血EPC数量 ,并且EPC数量随氟伐他汀浓度增加及作用时间延长而增加 ,1 0 μmol/L浓度氟伐他汀作用 2 4h对EPC数量的影响最为显著 (较对照组增加了 1 5倍 ,P <0 0 5 )。氟伐他汀和辛伐他汀也显著改善了外周血EPC的黏附能力、迁移能力和增殖能力。相同浓度的氟伐他汀和辛伐他汀 (1 0 μmol/L)对EPC数量和功能的影响无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论结果提示他汀类药物可增加EPC的数量且伴随着EPC功能的改善。 相似文献
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