姜黄素自微乳化给药系统的体内外评价

目的将姜黄素（Cur）制成自微乳化给药系统,并对其进行体内外评价。方法测定乳化后乳剂的pH值、自乳化时间、粒径、形态特征、稳定性和体外释放度,考察Cur自微乳化给药系统在小鼠体内的药物动力学过程,并与其混悬剂相比较。结果 Cur自微乳化给药系统可在4 min内乳化完全,乳化后的微乳pH值接近中性,平均粒径为31.98 nm。以0.25%SDS的纯净水为释放介质,10 min内药物可释放完全。8 h内微乳溶液中Cur的含量保持〉94%。小鼠灌胃给药后的药动学过程表明,与Cur混悬液相比,微乳的AUC提高了12倍。结论自微乳化给药系统可显著提高Cur的体外溶出度和体内生物利用度。     

化疗后肿瘤微环境的变化与肿瘤转移的研究进展

化疗旨在消灭肿瘤细胞,提高患者生存率,目前仍是恶性肿瘤治疗的主要手段之一,然而化疗后的复发转移是造成恶性肿瘤患者极高致死率的原因之一。现代研究认为,化疗药物作用于肿瘤细胞的同时,能引起一系列“宿主反应”,肿瘤微环境中相关组分产生变化,从而促进肿瘤的复发转移。本文就这些发生变化的主要组分进行综述。      

肠胃清抑制化疗诱导的小鼠结肠癌肺转移的实验研究

目的研究肠胃清对化疗诱导的小鼠结肠癌肺转移的抑制作用并探讨其机制。方法通过一次性腹腔注射最大耐受剂量(MTD)奥沙利铂,3天后尾静脉注射结肠癌细胞CT26,建立化疗诱导的小鼠结肠癌肺转移模型,24只BALB/c小鼠随机分为模型组、化疗诱导肺转移组(L-OHP)、肠胃清加化疗诱导肺转移组(CWQ+L-OHP)。统计肺结节数目,苏木素-伊红染色(HE)检测肺组织内瘤灶,免疫组化检测肺转移瘤组织微血管密度(MVD);蛋白免疫印迹(Western blot)、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测肺转移灶血管内皮生长因子(VEGF-A)、基质金属蛋白酶2/9(MMP2/9)蛋白和mRNA的表达。结果与L-OHP组比较,CWQ+L-OHP组肺转移结节数目减少(P0.05)、肿瘤组织MVD值下降(P0.01),肺组织VEGF-A、MMP2、MMP9蛋白和mRNA的表达均下调(P0.01)。结论肠胃清能抑制化疗诱导的小鼠结肠癌肺转移,与其下调肿瘤组织VEGF-A、MMP2、MMP9的表达,降低肿瘤组织MVD,减少肿瘤血管生成有关。     

慢病毒介导bcr/abl基因RNAi对白血病K562细胞生物学特性的影响

目的:研究慢病毒介导RNAi致bcr/abl基因长期沉默对K562白血病细胞各种生物学特性的影响. 方法:构建含bcr/abl RNAi序列的pNL-B/A-EGFP慢病毒重组质粒载体并包装病毒,感染K562细胞,挑取稳定转化的克隆(B/A-K562).Real-time PCR及Western blotting验证干扰效应;锥虫蓝染色、集落形成实验检测细胞增殖能力变化;联苯胺染色观察细胞分化;ELISA法检测酪氨酸激酶活性;AO-EB染色观察细胞凋亡;比色法检测Caspase-3、Caspase-9活性;以上检测均以K562细胞和转染空质粒EGFP-K562作对照. 结果:成功构建bcr/abl基因RNAi稳定转染的B/A-K562细胞, Real-time PCR及Western blotting证实B/A-K562细胞中bcr/abl mRNA及P210bcr/abl蛋白含量明显下调.bcr/abl基因稳定下调后,K562细胞倍增时间明显延长(37.1 vs 20.4、23.3 h)、集落形成能力减弱(P<0.01),K562细胞向红系分化,酪氨酸激酶活性下降(P<0.01),自发凋亡率显著提高(P<0.01),细胞中Caspase-3(P<0.05)及Caspase-9(P<0.01)活性明显提高.结论:慢病毒介导的RNAi能实现bcr/abl基因长期沉默,从而抑制K562细胞恶性增殖,诱导其分化及凋亡.     

结直肠癌组织趋化因子受体CXCR4表达及其与淋巴结和肝转移相关性的探讨

目的:研究趋化因子受体CXCR4在结直肠癌组织中的表达,探讨其与淋巴结、肝转移及预后的关系.方法:应用免疫组化方法(SP法)检测20例正常结直肠黏膜组织、64例结直肠癌组织、34例区域淋巴结转移癌组织以及18例肝转移组织CXCR4表达情况.同时应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测其mRNA在4株大肠癌细胞株中的表达.结果:正常结直肠黏膜、结直肠癌、区域淋巴结转移癌以及肝转移组织中CXCR4阳性率分别为15.0%、51.6%、72.2%和73.5%;转移组织阳性表达率明显高于原发肿瘤.CX-CR4 mRNA高表达于2株人大肠癌细胞株.结直肠癌组织CXCR4阳性表达率与Duke临床分期、淋巴结转移和肝转移密切相关,P<0.05,而与患者年龄、性别、肿瘤所在部位及病理分化程度无关.CXCR4阳性表达组3年生存率明显低于阴性表达组,P<0.05.结论:CXCR4阳性表达与结肠直肠癌的淋巴结、肝转移有关,有助于预后判断.     

放射性肺损伤小鼠动物模型的建立与鉴定

目的:建立放射性肺损伤小鼠动物模型和有效的定量评价方法.方法:雄性昆明种小鼠36只,随机分作2组,对照组(12只)不做任何处理,照射组(24只)全肺单次照射18 Gy.于照射后2、6和12周,进行小鼠肺部螺旋CT扫描及图像分析,获得小鼠全肺的平均灰度值;采用HE染色法观察肺组织的变化.结果:照射后2、6和12周的CT图像分析表明,与正常对照组相比,照射组CT平均灰度值均上升,照射后2和6周差异有统计学意义,P值分别为0.003、0.006.与对照组相比,照射组小鼠的肺组织在照射后存在明显的病理组织学上的改变,早期以急性炎症为主,表现为肺充血、水肿、肺间质增厚,后期损伤以肺泡间隔的进行性纤维化为特征.结论:小鼠全肺单次照射18 Gy X射线可建立放射性肺损伤小鼠动物模型,用螺旋CT扫描,计算机软件UTHSCSA Image Tool 3.0灰度分析方法可以有效地定量评价早期放射性肺损伤程度.     

健脾解毒方对奥沙利铂抑制人结肠癌裸鼠原位移植瘤生长的增效作用

目的:观察健脾解毒方对奥沙利铂抑制人结肠癌裸鼠原位移植瘤生长的增效作用,并初步探讨其作用机理。方法:建立人结肠癌裸鼠原位移植瘤模型,随机分为4组:对照组、奥沙利铂组、健脾解毒方组、健脾解毒方联合奥沙利铂组(联合用药组),观察各组抑瘤率、裸鼠体重及生存期;采用MTT法检测治疗后移植瘤肿瘤细胞耐药性的变化。结果:(1)联合用药组的抑瘤率为53.6%,是单用奥沙利铂组的4.25倍。(2)治疗后,健脾解毒方组和联合用药组体重较对照组增加(P0.05)。(3)健脾解毒方组和联合用药组中位生存期长于对照组和奥沙利铂组(P0.05)。(4)奥沙利铂组对L-OHP、5-Fu、HCPT和THP的耐药指数分别为7.59、4.28、5.78和4.50;联合用药组对L-OHP、5-Fu、HCPT和THP的逆转指数分别为6.57、2.61、4.97和3.10。结论:健脾解毒方对奥沙利铂抑制人结肠癌裸鼠原位移植瘤生长有增效作用,其增效作用可能与健脾解毒方部分逆转移植瘤对奥沙利铂的耐药性有关。     

健脾解毒方对人结肠癌裸鼠原位移植瘤铂类耐药相关铜转运蛋白ATP7A ATP7B表达的影响

目的:探讨健脾解毒方对奥沙利铂抑制人结肠癌裸鼠原位移植瘤生长的增效作用及其对移植瘤铂类耐药相关铜转运蛋白ATP7A、ATP7B表达的影响,揭示健脾解毒方对奥沙利铂增效作用的部分机制。方法:建立人结肠癌裸鼠原位移植瘤模型,随机分为4组:对照组、奥沙利铂组、健脾解毒方组、健脾解毒方联合奥沙利铂组(联合用药组),治疗后观察各组移植瘤生长情况,采用实时荧光定量-PCR及免疫组化S-P法、Western-blot检测移植瘤中ATP7A、ATP7B mRNA和蛋白的表达。结果:(1)联合用药组的抑瘤率为53.6%,是单用奥沙利铂组的4.25倍;(2)奥沙利铂组裸鼠反复腹腔注射L-OHP后,移植瘤组织ATP7A和ATP7B的mRNA及蛋白表达均高于对照组(P<0.05);联合用药组移植瘤组织ATP7A和ATP7B的mRNA及蛋白表达均低于奥沙利铂组(P<0.05)。结论:健脾解毒方对奥沙利铂抑制人结肠癌裸鼠原位移植瘤生长有增效作用,其增效作用可能与下调移植瘤组织ATP7A和ATP7B的mRNA及蛋白表达,增加细胞内奥沙利铂药物的浓度有关。     

居室空气中挥发性化学物的遗传毒性研究

室内装潢已成为一种时尚，由装潢材料所产生的挥发性有毒物质所造成的室内空气污染和人体健康危害已受到广泛关注。目前国内外对装潢后室内空气中挥发性化学物如甲醛，混苯及氨等的毒性研究已较多，但关于其混合物的联合毒性研究较少。我们在对居室装潢后室内空气污染调查的基础上，根据调查后甲醛、混苯与NH3的检测结果配置混合物，进行小鼠骨髓微核试验，观察其遗传毒性作用。