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目的采用肺炎克雷伯菌耐药靶标KPC-2为抗原制备重组蛋白疫苗, 在小鼠肺炎模型中评价疫苗的免疫原性、保护效果和保护机制。方法利用大肠埃希菌原核表达系统表达肺炎克雷伯菌KPC-2蛋白, 经GST亲和层析对目的蛋白进行纯化;采用KPC-2蛋白制备疫苗, 经皮下注射免疫新西兰兔, 心脏采血分离血清, 用Protein G亲和层析纯化多克隆抗体, 同时运用调理吞噬杀菌试验检测抗体的体外杀菌活性。采用KPC-2疫苗免疫雌性BALB/c小鼠3次, 间接ELISA检测血清中特异性IgG抗体滴度。末次免疫后7 d, 通过气管插管构建小鼠肺炎克雷伯菌肺部感染模型, 感染1 h后尾静脉给予0.1 mg美罗培南治疗, 通过比较免疫组与佐剂组的生存率、细菌定植量和组织病理学差异, 以及给药组与生理盐水组生存率的差异评价疫苗的保护效果。采用KPC-2多克隆抗体被动免疫评价抗体的保护效果。结果 KPC-2免疫组小鼠血清特异性IgG水平显著高于对照组(t=4.325,P<0.05), 免疫组生存率显著高于对照组[70% (7/10)vs 10% (1/10), P<0.05];免疫组小鼠肺组织炎性程度及... 相似文献
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目的探讨上皮细胞增殖(ECP)通路相关基因对老年非小细胞肺癌患者免疫治疗预后及疗效的提示作用。方法 2022年10月回顾性分析POPLAR及OAK临床研究中年龄≥70岁、接受免疫治疗的老年患者106例, 依据突变基因情况将患者分为ECP通路相关基因突变(ECP突变组)25例和相关基因未突变(ECP未突变组)81例。主要研究终点为患者总生存时间(OS)和无进展生存时间(PFS)。分别比较两组患者生存和疗效差异, 并对各临床因素和通路涉及基因进行亚组分析。经Pyclone算法推算各患者主克隆及亚克隆分布并比较生存差异。结果 ECP突变组与ECP未突变组患者比较, mOS缩短(10.9个月比17.1个月, HR=1.84, 95%CI:1.09~3.08, P<0.05), mPFS亦缩短(2.8个月比4.2个月, HR=1.58, 95%CI:1.00~2.51, P<0.05)。在ECP通路各基因中, RB1基因突变对全部患者预后作用显著, 且在ECP突变组患者中, RB1负性预后作用显著, 与ECP未突变组患者比较, mOS缩短(6.9个月比12.6个月, HR=3.14,... 相似文献
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目的 了解本地区女性宫颈人乳头状瘤病毒感染情况及危险因素。方法 选取2019年6月~2022年6月进行宫颈癌筛查的2 095例妇女为研究对象,使用人乳头状瘤病毒专用采集器采集患者宫颈分泌物。采用PCR-荧光探针法进行检测操作,主要包括6种低危型人乳头状瘤病毒(HPV)(包括HPV6、HPV11、HPV42、HPV43、HPV44、HPV81)和16种高危型HPV(HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV34、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV53、HPV56、HPV58、HPV56、HPV68、HPV81)。采用流式细胞术检测患者宫颈分泌物CD4^(+)T、CD8^(+)T水平,评估患者宫颈分泌物免疫功能。制定问卷调查表,分析女性宫颈HPV感染危险因素。结果 本次研究中,2 095例妇女中,HPV阳性506例,感染率24.15%,主要为单一亚型感染(342/506)。407例为高危型HPV感染,感染率19.43%(407/2 095),主要为HPV52、HPV16、HPV18。99例为低危型HPV感染,感染率4.72%(99/2 095),主要为HPV44、HPV42。根据宫颈病变程度可以将患者分为正常组、低级病变组、高级病变组、宫颈癌组,分别为1 771、192、97和35例。四组患者的高危型HPV感染率分别为9.43%(167/1771)、58.85%(113/192)、94.85%(92/97)、100%(35/35)。不同宫颈病变组中高危型HPV感染率差异有统计学意义(P<0.05),随着宫颈病变级别升高,高危型HPV感染率随着升高。对比35例宫颈癌患者与同期未感染HPV患者的宫颈分泌物免疫功能,宫颈癌患者的CD4^(+)T水平及CD4^(+)T/CD8^(+)T比值低于未感染患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 本地区女性HPV感染以单一亚型为主,主要为高危型HPV感染。随着宫颈病变程度,高危型HPV的感染率逐渐升高。引起女性宫颈人乳头状瘤病毒感染的危险因素多种多样,应积极开展预防高危型HPV感染的健康宣传及防治工作。 相似文献
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目的:了解该市孕产妇死亡率变化趋势、主要死亡原因和变化特征。方法:在鞍山地区采用以人群为基础的流行病学调查方法,调查1994~2003年全市孕产妇死亡率,农村与城市孕产妇死亡率差别及主要死亡原因。结果:①10年间全市孕产妇死亡率大幅度下降,1998年前5年到1999年后5年,鞍山地区孕产妇死亡率由36.47/10万下降至15.64/10万,下降幅度为57.12%。城市孕产妇死亡率由26.71/10万下降至9.66/10万,下降幅度为63.83%;农村孕产妇死亡率由41.37/10万下降至17.85/10万,下降幅度为56.85%。②全市孕产妇主要死亡原因的前3位分别为产科出血、羊水栓塞、妊娠高血压综合征。城市和农村的孕产妇主要死亡原因略有差异。③1994~2003年鞍山地区和农村的产科出血死亡率无明显下降。其他原因的死亡率明显下降。结论:1994~2003年鞍山地区的孕产妇死亡率呈下降趋势,10年间鞍山地区和农村产科出血死亡率无明显下降。 相似文献
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目的:进一步探究人们对生前预嘱相关问题的真实想法,为老龄化社会下生命末期健康管理提供新方向。方法:通过问卷调查,课题组制作了包含22道问题的《“生前预嘱”问卷调查》,从“对死亡的看法”“临终的计划”“对不可治愈的伤病生命末期的医疗选择”“医疗自主权”和“‘生前预嘱’的认知态度”等五个方面进行提问。结果:通过问卷调查显示,人们的一些个人特征未有较明显的选择区别,人们整体上对临终安排的重视程度不高,婚配情况和宗教信仰的不同对选择也没造成较大影响,人们普遍对生前预嘱的认知程度不高。结论:根据调查研究结果,提出了“加强死亡教育”“加强‘生前预嘱’研究体系建设”“解决‘生前预嘱’伦理问题”和“做好医学行业人员培训工作”等四个方面的建议。 相似文献
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间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase, ALK)融合基因是非小细胞肺癌的重要的肿瘤驱动基因,约占非小细胞肺癌患者的5%左右,其中97%为肺腺癌患者。自2007年首次在肺腺癌患者中发现棘皮动物微管相关蛋白样4(echinoderm microtubule-associated protein-like 4, EML4)-ALK融合以来,多种ALK融合伴侣相继被检测出来。本例晚期肺鳞癌患者通过二代测序(next generation sequencing, NGS)检测到CLIP1-ALK融合基因,并于2021年5月5日开始先后口服阿来替尼、恩沙替尼治疗,阿来替尼治疗有效,但于2021年9月30日去世。本文报道了接受ALK抑制剂治疗的CLIP1-ALK融合基因的肺鳞癌患者,并对其疗效进行讨论。 相似文献
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目的构建抗食管支架术后再狭窄携人TRADD基因慢病毒表达载体,并检测其对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响。方法以购买的人TRADD基因为模板,采用PCR法扩增目的基因片段,PCR产物经回收纯化后与线性化的慢病毒表达载体pLVX-EGFP-3FLAG-Puro重组。重组质粒转化DH5α感受态细胞。菌落PCR鉴定转化子,阳性克隆测序无误后,质粒共转染293FT细胞制备慢病毒。Real-time定量PCR法检测病毒滴度。Western blot检测TRADD-GFP-FLAG融合蛋白的表达。MTT法检测TRADD基因慢病毒对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响。结果菌落PCR扩增产物经凝胶电泳,阳性克隆得到1 200 bp片段,基因测序显示重组质粒中TRADD序列与GenBank中序列一致。包装产生的慢病毒转染293 FT细胞48 h后,荧光显微镜下可见大量绿色荧光,病毒滴度为3.22×108IU/ml,Western blot检测到融合蛋白TRADD-GFP-FLAG在293FT细胞中获得有效表达,MTT法证实该融合蛋白具有生物活性,能有效抑制瘢痕成纤维细胞增殖。结论成功构建并包装了pLVX-TRADD-EGFP-3FLAG-Puro慢病毒表达载体,其可明显抑制增生性瘢痕成纤维细胞的增殖。 相似文献