自配电解质试剂在Beckman生化分析仪上的应用

目的 探索自配电解质试剂在BeckmanCX7生化分析仪上的应用,以便用自配试剂代替原装进口试剂。方法 自配电解质试剂在BeckmanCX7生化分析仪上与Beckman原装进口试剂进行对比分析,并对自配试剂作重复性实验和回收实验。结果 自配试剂能顺利通过定标,两试剂样本测定结果无显著性差异,且相关性显著。自配试剂的重复性和回收率令人满意。结论 自配电解质试剂完全可以代替原装进口试剂在Beckman生化分析仪上应用。     

高温对机体心肌酶活性的影响

本文采用模拟的高温环境,对日本大耳白兔受热的不同时间、温度进行（AST、LDH、CK、a-HBD）活性观察,以了解高温对机体心肌酶活性影响程度。     

标本保存时间和溶血对神经特异性烯醇化酶测定的影响

目的:探讨标本保存时间和溶血对神经特异性烯醇化酶(NSE)测定的影响。方法:采用磁性微粒分离的酶联免疫检测法,对正常人和3例小细胞肺癌患者血液标本立即测定和放置1、2、3、4、5 d后测定,计算其NSE含量的变化;对不同浓度的溶血标本进行测定,计算溶血产生的血红蛋白与NSE含量的关系。结果:标本放置后再测定,其NSE含量显著增加(P<0.01);溶血对NSE测定结果影响显著(P<0.01),溶血每产生1 g血红蛋白就可以测出34.53μg/L的NSE。结论:标本久放和标本溶血对NSE的测定结果显著,在实际工作中,抽取标本后应该尽快测定,绝对避免使用溶血标本,以保证结果的准确性。     

雌二醇对骨形态发生蛋白受体表达的影响

目的研究骨髓基质细胞向成骨细胞分化过程中,雌二醇对其骨形态发生蛋白受体 (BMPR)Ⅰ A,Ⅰ B mRNA表达的影响,探讨雌二醇对成骨细胞生成的作用,试阐明绝经后高转换骨代谢始动环节的可能机制. 方法SD大鼠骨髓基质细胞在生长培养基中传代培养后,用 1,25(OH)2D3和地塞米松( DEX)诱导骨髓基质细胞向成骨细胞分化, 17β-雌二醇( E2)处理培养细胞,观察 E2对骨髓基质细胞分化过程中骨形态发生蛋白受体Ⅰ A、Ⅰ B mRNA、碱性磷酸酶 (ALP)活性和Ⅰ型胶原合成的影响,β- actin作内对照半定量 RT- PCR分析骨形态发生蛋白受体Ⅰ A,Ⅰ B mRNA的表达,以α-磷酸奈酚为底物,测定细胞碱性磷酸酶的活性, Van Gieson染色法显示Ⅰ型胶原的含量. 结果E2能明显抑制骨髓基质细胞分化过程中 BMPR-Ⅰ A mRNA的表达,且呈剂量依赖性,随 E2浓度增加( 0～ 1× 103 nmol/L) BMPR-Ⅰ A mRNA从 (27.0± 3.4)%降至 (17.0± 1.8)% ( t=5.2,P< 0.01)和 (9.3± 1.6)% (t=9.2,P< 0.01); BMPR-Ⅰ B mRNA随 E2浓度增加而增加,从 (2.0± 0.8)%增至 (4.8± 1.5)% ( t=3.3,P< 0.05)和 (17.2± 2.2)% (t=13,P< 0.01). Northern blot 结果显示在上述 E2浓度时 BMPR-Ⅰ A mRNA的表达从 4.21± 0.36降至 1.24± 0.10( t=18.2,P< 0.01); BMPR-Ⅰ B mRNA的表达从 1.72± 0.11增至 3.73± 0.31( t=12.2,P< 0.01). ALP活性随 E2浓度增加而降低,从 (42.6± 2.5)U/g蛋白降至 (17.9± 2.0)U/g蛋白 ( t=15,P< 0.01) ,(10.8± 1.5)U/g蛋白( t=22,P< 0.01)和 (3.6± 0.7)U/g蛋白( t=30,P< 0.01);细胞Ⅰ型胶原的含量随 E2浓度增加而减少, Van Gieson染色由鲜红、淡红到黄色,红色越深,表明胶原越多. 结论E2能明显抑制骨髓基质细胞分化过程中 BMPR-Ⅰ A mRNA的表达,降低 ALP的活性和Ⅰ型胶原含量,增加 BMPR-Ⅰ B mRNA的表达).     

雌二醇对骨髓基质细胞核结合因子α1基因及成骨细胞生成的影响

目的 研究骨髓基质细胞在向成骨细胞分化的条件培养体系中，17β-雌二醇（Ea）对其核结合因子α1(Chfα1）基因表达影响，探讨雌二醇对成骨细胞生成的作用。方法 取自1只3月龄雌性SD大鼠骨髓基质细胞在生长培养基中传代后，用1，25（OH）2D3和地塞米松（DEX）诱导骨髓基质细胞向成骨细胞分化。应用半定量RT-PCR技术，观察不同浓度Ea对骨髓基质细胞分化过程中核结合因子α1mRNA表达的影响，以α-磷酸套酚为底物，测定细胞碱性磷酸酶的活性，Van Gieson染色法显示Ⅰ型胶原的含量。结果 Ea能明显抑制骨髓基质细胞分化过程中Ghfα1 mRNA的表达，且呈剂量依赖性。Ea浓度为0,1&;#215;10^-10，1&;#215;10^-8和1&;#215;10^-6mmol/L时，Cbα1 mRNA表达量分别为23.4%&;#177;1.8%（t=17.8,P&;lt;0.01）。Northern blot结果显示Cbfα1 mRNA的表达量分别为4.22&;#177;0.11,2.51&;#177;0.12(t=21,P&;lt;0.01),1.88&;#177;0.10(t=31,P&;lt;0.01)和1.17&;#177;0.09(t=41,P&;lt;0.01)。ALP活性随Ea浓度增加而降低，在上述Ea浓度时，ALP活性分别为（42.6&;#177;2.5)U/g。（17.9&;#177;2.0)U/g(t=15,P&;lt;0.01),(10.8&;#177;1.5)U/g(t=21,P&;lt;0.01）和（3.6&;#177;0.7)U/g(t=29,P&;lt;0.01）。细胞Ⅰ型胶原的含量随Ea浓度增加而降低。结论 Ea能明显抑制骨髓基质细胞分化过程中Chfα1 mRNA的表达，减少成骨细胞的生成。     

17β-雌二醇对大鼠骨髓基质细胞PPAR-γ2 mRNA表达的影响

目的　研究 17β 雌二醇 (E2 )对大鼠骨髓基质细胞过氧化物酶增殖物活化受体γ2 (PPAR γ2 )mRNA表达的影响 ,探讨雌二醇对成骨细胞生成的作用。方法　用 1,2 5 (OH) 2 D3 和地塞米松 (DEX)诱导大鼠骨髓基质细胞向成骨细胞分化 ,应用半定量RT PCR及Western印迹技术 ,观察不同浓度E2 对骨髓基质细胞分化过程中PPAR γ2 mRNA及蛋白表达的影响 ,这些细胞的碱性磷酸酶 (ALP)活性和Ⅰ型胶原含量也被测定。结果　E2 能显著促进骨髓基质细胞在分化介质中PPAR γ2 mRNA及蛋白的表达 ,且呈剂量依赖性。E2 浓度为 10 -6mol/L时 ,PPAR γ2 mRNA的表达从 (1.3± 0 .5 ) %增至 (17.7± 2 .5 ) % (P <0 .0 1) ;PPAR γ2 蛋白的表达从 (1.16± 0 .10 ) %增至 (4 .0 8± 0 .13 ) % (P <0 .0 1)。细胞ALP活性明显受E2 的抑制 ,在上述E2 浓度时ALP的活性从 (4 2 .6± 2 .5降至 3 .6± 0 .7)mU/mg蛋白 (P <0 .0 0 1)。Ⅰ型胶原含量均随E2 浓度增加而降低。结论　E2 促进体外培养的骨髓基质细胞向脂肪细胞分化而抑制其向成骨细胞分化。     

微小RNA-340对肝细胞癌细胞转移和侵袭力的影响

目的探讨高表达微小RNA-340(miR-340)对肝细胞癌(HCC)细胞转移和侵袭力的影响。方法采用LipofectamineTM2000试剂盒进行miR-340转染,Transwell侵袭实验评价侵袭能力,实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)测定HCC细胞株miR-340、E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白、波形蛋白、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的mRNA水平,酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定MMP-2和MMP-9蛋白水平,用蛋白质免疫印迹(Western blot)检测核转录因子κB1(NF-κB1)蛋白水平。结果与HepG2相比miR-340在HCC细胞系中表达水平降低,高表达miR-340的HepG2细胞、MHCC-97L细胞侵袭能力下降。高表达miR-340的HepG2细胞和MHCC-97L细胞E-钙黏蛋白mRNA表达上调,N-钙黏蛋白mRNA水平下调,波形蛋白mRNA水平下调。miR-340使HepG2细胞和MHCC-97L细胞中MMP-2和MMP-9的表达下降;与HCC细胞系比较,高表达miR-340的HepG2细胞NF-κB1表达量下降40%、MHCC-97L细胞下降66%,差异有统计学意义(P0.05)。生物信息学分析预示NF-κB1是miR-340的潜在靶基因且萤光素酶报告分析又进一步证实了miR-340可以直接作用于NF-κB1的3′端非编码区。结论 miR-340在抑制细胞迁移、侵袭和上皮细胞间质转化中起着重要的作用,提示miR-340表达水平降低是HCC发生的重要环节,基于miR-340的治疗方法可用于HCC诊治。     

高等级胶质瘤放化疗前后细胞免疫水平对生存率的影响分析

目的分析高等级胶质瘤放化疗前后细胞免疫水平对生存率的影响。方法选取2016年1月-2017年10月德阳市人民医院收治的高等级胶质瘤且经放化疗治疗的患者50例,检测患者放化疗前后淋巴细胞亚群水平,筛选CD4^+CD^+25<10、CD4^+CD^+25≥10、CD4^+/CD8^+<1与CD4^+/CD8^+≥1患者例数并分析比较两者的2年生存率。结果放化疗后CD4^+CD^+25与CD4^+/CD8^+水平均低于放化疗前,差异有统计学意义(P<0.05);CD4^+CD^+25≥10患者2年生存率高于CD4^+CD^+25<10患者,CD4^+/CD8^+≥1患者2年生存率高于CD4^+/CD8^+<1患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论高等级胶质瘤放化疗后会引发CD4^+CD^+25与CD4^+/CD8^+水平降低,并降低患者远期生存率,因此需要临床上格外注意,具有借鉴意义。     

抗La/SSB抗体在系统性红斑狼疮患者中的临床意义探讨

目的 了解抗La/SSB抗体在系统性红斑狼疮(SLE)患者中的临床意义及与抗La/SSB抗体相关的影响因素。方法 纳入德阳市人民医院195例系统性红斑狼疮患者,收集受试者临床资料和检测指标,分析抗La/SSB抗体阳性患者(SLE-SSB组)与抗La/SSB抗体阴性患者(SLE组)上述资料分布差异及影响抗La/SSB抗体的独立相关因素。结果 两组性别、抗核抗体(ANA)滴度、抗双链DNA抗体滴度、抗干燥综合征A抗体百分率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。两组中度及以上贫血百分率比较差异有统计学意义(P<0.05)。SLE-SSB组胱抑素C和免疫球蛋白G水平高于SLE组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 抗La/SSB抗体阳性的SLE患者器官/系统受累比较少见,临床损害主要以中度及以上贫血为主要表现,实验室检查方面表现为高滴度的ANA和免疫球蛋白G,值得临床医师的关注。