洋葱中黄酮类化合物对结核分枝杆菌影响的实验研究

目的:研究洋葱中黄酮类化合物对结核分枝杆菌的影响,探讨其治疗结核的作用机制。方法:以结核分枝杆菌标准菌株(H37RV)为对照,临床结核分枝杆菌为研究对象,采用分格平板琼脂比例法观察28μg/mL、140μg/mL、280μg/mL、560μg/mL不同浓度洋葱黄酮类化合物、一线抗结核药物利福平(REP)、异烟肼(INH)、链霉素(SM)和乙胺丁醇(EMB)对结核分枝杆菌的抑菌作用。小鼠腹腔巨噬细胞与结核分枝杆菌共同孵育后,给予细胞不同浓度洋葱黄酮类化合物和INH药物干预,细胞实验分组为对照组、INH组、28μg/mL洋葱黄酮组、140μg/mL洋葱黄酮组、280μg/mL洋葱黄酮组、560μg/mL洋葱黄酮组,给药结束后,ELISA法检测细胞培养液中细胞因子水平,RT-PCR法检测巨噬细胞吞噬的结核分枝杆菌DNA水平。结果:280μg/mL洋葱黄酮组敏感率高于各一线抗结核药物(P0.05),故后续选择280μg/mL洋葱黄酮进行研究。280μg/mL洋葱黄酮联合1.0μg/mL REP、2.0μg/mL INH、2.0μg/mL SM和5.0μg/mL EMB的敏感率均显著高于各单个抗结核药物,差异均有统计学意义(P0.05)。与对照组比较,INH组、140μg/mL洋葱黄酮组、280μg/mL洋葱黄酮组、560μg/mL洋葱黄酮组IFN-γ、IL-1β、IL-6水平显著升高,巨噬细胞吞噬的结核分枝杆菌DNA扩增Ct值较低,DNA拷贝数较高,差异均有统计学意义(P0.05)。与INH组比较,280μg/mL洋葱黄酮组、560μg/mL洋葱黄酮组IFN-γ、IL-1β、IL-6水平显著升高,巨噬细胞吞噬的结核分枝杆菌DNA扩增Ct值较低,DNA拷贝数较高,差异均有统计学意义(P0.05)。与140μg/mL洋葱黄酮组比较,280μg/mL洋葱黄酮组、560μg/mL洋葱黄酮组IFN-γ、IL-1β、IL-6水平显著升高,巨噬细胞吞噬的结核分枝杆菌DNA扩增Ct值较低,DNA拷贝数较高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:洋葱黄酮类化合物体外可抑制结核分枝杆菌,与各单个抗结核药物具有协同抑菌作用,促进巨噬细胞释放IFN-γ、IL-1β和IL-6细胞因子,提高巨噬细胞吞噬能力,且呈剂量依赖性。     

结核分枝杆菌rHpsX-MPT64融合蛋白的制备与临床应用

目的 构建结核分枝杆菌融合基因hpsX-mpt64原核表达系统,建立基于rHpsX-MPT64为包被抗原酶联免疫吸附测定法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)并对其用于结核患者血清学诊断的敏感性和特异性进行评价。方法 PCR扩增并克隆结核分枝杆菌hpsX和mpt64基因,以连接引物PCR构建hpsX-mpt64人工融合基因,建立上述目的基因原核表达系统。采用SDS-PAGE检测目的重组蛋白rHpsX、rMPT64和rHpsX-MPT64表达情况,Ni-NTA亲和层析法提纯上述目的重组蛋白,Western Blot检测其免疫性。分别以rHpsX、rMPT64和rHpsX-MPT64为包被抗原,建立相应ELISA检测150例健康人群、73例非结核肺部疾病患者和277例活动性肺结核患者血清标本中抗体。结果 克隆的hpsX和mpt64及构建的hpsX-mpt64融合基因与GenBank中相关序列相似性为100%。rHpsX、rMPT64和rHpsX-MPT64表达量分别为细菌总蛋白的20.3%、28.5%和26.5%,其提纯物电泳后均显示单一条带。基于rHpsX、rMPT64和rHpsX-MPT64为包被抗原的ELISA对涂阳患者血清抗体检出率明显高于涂阴患者(P<0.01),检测活动性结核患者血清抗体的敏感性分别为59.2%、61.4%和74.4%,特异性分别为90.6%、83.9%和91.0%,rHpsX-MPT64为包被抗原敏感性明显高于rHpsX和rMPT64抗原(P<0.01)。结论 基于rHpsX-MPT64为包被抗原的ELISA有较高的敏感性和特异性,重组融合蛋白为抗原有助于进一步提高检测结核病血清学诊断的敏感性。     

Nuck氏管囊肿误诊斜疝嵌顿1例报告

患者,女性,28岁。因右侧腹股沟部肿块2年,突然增大,不能回纳并伴疼痛12小时,急诊入院。体检:右下腹股沟中点上方可触及一2×3cm大小较硬的囊性包块,表面光滑,压痛明显,可活动,但不能还纳,咳嗽时有冲击感,肿块上方未闻及肠鸣音。     

723例结核病住院患者结核分枝杆菌耐药性分析

目的 了解结核病住院患者结核分枝杆菌耐药情况.方法 收集2010年全年新收治结核病住院患者主要临床特征信息并进行统计分析,包括性别、年龄、糖尿病史、吸烟史及结核治疗史.回顾分析结核分枝杆菌临床分离株药敏试验结果.结果 2010年新分离分枝杆菌723株,其中结核复合群共671株,非结核分枝杆菌52株.671例结核病患者中,总耐药率43.82%、初治耐药率56.30%、复治耐药率32.07%;其中单耐药率、多耐药率和泛耐药率分别为13.41%、24.74%和5.66%.男女患者比例为2.2：1,患者年龄最小8岁,最大88岁.女性患者患耐药结核病风险低于男性,OR值为0.63（95%CI：0.42～0.94）,差异有统计意义（P〈0.05）.结核病治疗史和吸烟史是患者发生耐药结核的危险因素,OR值分别为1.62（95%CI：1.21～2.09）和2.72（95%CI：2.35～3.05）,差异有统计学意义（P均〈0.05）.非结核分枝杆菌株检出量及其检出率逐年上升,检出率由2006年的4.61%上升到2010年的7.19%.结论 应采取有效措施控制结核分枝杆菌感染及其耐药情况的进一步恶化.     

椎动脉型颈椎病发病机制研究进展

椎动脉型颈椎病（cervical spondylosis of vertebral arterytype,CSA）是临床常见的一种疾病,症状复杂。临床又称为椎动脉压迫综合征、颈性眩晕、椎动脉缺血综合征、椎-基底动脉供血不足等。1926年Barre和Lieon首先提出时认为CSA是由于颈部交感神经受激惹致椎动脉受累。     

马尾神经根松弛症的临床诊断及治疗

本文报告马尾神经根松弛症（ＲＮＲ）１５例。介绍了ＲＮＲ的临床及椎管造影特点与诊断方法。根据其临床与病理特点，将ＲＮＲ分成三种临床类型：Ⅰ型：无临床症状，亦称无症状型，仅在造影时或尸检，手术中偶然发现，可不做特殊处理。Ⅱ型：有典型神经根受压症状，但无神经根、硬膜囊粘连，发病后经活动可缓解，需行手术扩大椎管，充分减压。Ⅲ型：临床症状较重，硬膜囊及马尾神经根有粘连，活动后难以缓解，手术需切开硬膜囊减压并松解粘连。本组平均随访３年，手术优良率７７％。还从临床角度探讨了ＲＮＲ的发病机制。     

兔小腿缓慢延长对神经影响的电生理研究

对15只家兔以不同速度与幅度缓慢延长小腿,进行电生理与组织形态学研究,观察胫神经功能变化。结果表明:以每天1mm速度延长肢体,不会引起神经形态改变与功能损害,运动神经传导速度及肌肉动作电位均正常。以每天2mm速度延长,肢体延长40％以内也是安全的。认为周围神经对缓慢牵引延长具有很大适应性。     

手残指缓慢延长术的临床应用

肢体缓慢延长术已成功地用于临床。近年来这一方法正越来越广泛地用于手指延长,为解决手指缺损、短小畸形等提供了一种新的简便安全的治疗方法。本文综述了这一方法在临床应用的适应证、操作方法、并发症及注意事项。