未分化型白血病的细胞来源和化疗方案选择

本文研究了10例AUL的细胞来源和化疗方案选择。结果显示6例来源于B或早期B细胞,2例来源于早期粒细胞,2例为干细胞或来源不明者。并发现表达DR~+、BA_2~+者对ALL方案效果好,表达DR~+、HI98~+或HI15~+者对ALL方案差、对AML方案效果好,建议按其免疫标志采用相应的化疗方案。     

猕猴单倍体相合非清髓造血干细胞联合间充质干细胞移植的实验研究

目的 用非清髓预处理建立猕猴单倍体相合造血干细胞移植(HSCT)模型，研究间充质干细胞(MSC)在单倍体相合移植中的作用。方法采用健康、单倍体相合的猕猴亲子配对，受非清髓性预处理用氟达拉滨 环磷酰胺 ^60Co(200cGy)全身照射 兔抗人胸腺细胞球蛋白，移植物抗宿主病(GVHD)预防用环孢菌素A、霉酚酸酯、抗CD25单抗。实验分为单纯造血干细胞(HSC)移植组和HSC联合MSC移植组；检测供受体嵌合水平，观察造血恢复、GVHD等情况。结果单倍体相合的子代猕猴采用非清髓预处理方案，可获稳定植入?比较了单纯非清髓HSC移植组和HSC联合MSC移植组的造血恢复，发现造血恢复时间主要与嵌合状态有关；MSC可促进植入；相同条件下，HSC联合MSC移植组更容易形成供受混合嵌合；GVHD的发生率低。结论成功建立了猕猴非清髓性单倍体相合HSCT的模型，非清髓HSCT联合MSC可能在单倍体相合移植中有较好效果。     

链亲和素-胶体金原位杂交研究急性白血病的髓过氧化物酶基因表达

用链亲和素-胶体金原位杂交(ISH-SAG)检测了87例急性白血病、7株白血病细胞系和7例正常骨髓细胞的髓过氧化物酶(MPO)的基因表达。结果发现,7例正常骨髓细胞几乎不表达MPO mRNA;粒(单核)细胞系和急性髓性白血病(AML)细胞不同程度表达MPO mRNA;淋巴细胞系和急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞不表达MPOmRNA;7例难分类急性白血病(UAL)中,4例表达MPO mRNA并对髓系抗原阳性;诊断为极低分化的AML;2例只表达免疫球蛋白重链基因,考虑为早期B细胞ALL;1例无任何细胞标志,考虑为急性未分化细胞白血病。上述结果表明,用ISH-SAG检测MPOmRNA敏感性高,特异性强,为确诊AML和区分ALL提供了一个更为有用的新手段,特别对识别停滞在细胞分化早期的AML意义更大。     

链亲和素胶体金原位杂交检测急性白血病细胞的Bax基因表达

Bax是bcl-2基因家族中最重要的基因之一,它是细胞程序性死亡的促进剂并和bcl-2—起对调控肿瘤和白血病细胞对化疗和放疗的耐药性起重要作用。为了进一步研究Bax基因在急性白血病(AL)发病和治疗中的作用,我们采用链亲和素胶体金原位杂交(ISH-SAG)方法检测了30例急性白血病病人和4株白血病细胞系的Bax基因表达,现将结果报告如下。     

非清髓异基因外周血造血干细胞移植后巨细胞病毒感染的危险因素分析

本研究旨在探讨非清髓异基因外周血造血干细胞移植（NST）后CMV感染及CMV病的发生特点及其危险因素,为NST后cMV感染的诊断、监测和抢先治疗提供参考。用实时定量聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测了80例在本院血液科行NST患者外周血白细胞巨细胞病毒（CMV）DNA载量,并对其临床资料进行了回顾性分析。结果表明,NST后62／80例发生cMV感染（77．5％）,首次检出CMV—DNA阳性的中位时间为移植后35d（17—133）,经抢先治疗后,移植后100d内CMV病累积发生率为11．3％。单因素分析及多因素分析均显示,预处理方案中使用抗人胸腺细胞免疫球蛋白（ATG）、合并其它疱疹病毒感染（单纯疱疹病毒、EB病毒、水痘-一带状疱疹病毒等）及移植前有真茵感染病史均为CMV感染的危险因素。单因素分析提示,CMV血症及预处理方案中使用ATG是CMV病的危险因素。合并Ⅱ-Ⅳ度aGVHD23例患者CMV感染率为91．3％（21／23）,但与0-I度aGVHD组的CMV感染率71．9％相比,无统计学差异（P=0．06）。多因素分析未发现与CMV病相关的危险因素。结论：预处理过程中使用ATG有可能增加NST后CMV感染和CMV病的发生率,CMV感染容易与其它疱疹病毒感染及真菌感染伴发。移植后亦应当重视对其它疱疹病毒及真菌的监测及预防。     

白血病小鼠H-2全不相合微移植模型的建立及鉴定

本研究旨在建立白血病小鼠H-2全不相合微移植模型并进行鉴定。受、供鼠分别为雌性BALB／c和雄性C57BL／6J,H-2为全不相合。受鼠微移植前5d静脉接种WEHI-3细胞约1×10^6个,微移植前3d开始给予MA化疗（米托蒽醌＋阿糖胞苷）,0d末次化疗后8h之内回输经G—CSF动员的供体脾单个核细胞,回输细胞数分别为（3、6、12）×10^7个。化疗对照组用等量生理盐水。所有受鼠不予GVHD预防。比较各组早期死亡率、白细胞恢复及白血病负荷情况。RT—PCR法检测微移植后供体嵌合率。从临床表现和病理情况综合评价微移植组小鼠GVHD情况。结果表明,化疗对照组早期死亡率为25％,（3、6、12）×10^7组分别为16．67％、8．33％、8．33％。（3、6）×10^7组白细胞恢复明显优于化疗对照和12×10^7组（P〈0．05）。白血病负荷（3、6、12）×10^7组明显低于化疗对照组（P〈0．01）,而（6、12）×10^7组明显低于3X10^7组（P〈0．05）。微移植后供体成分在2周之内以微嵌合形式存在。微移植组小鼠均未发生明显GVHD证据。结论：成功建立了白血病小鼠H-2全不相合微移植模型,为后续研究及临床微移植相关研究提供了基础。     

HGF基因修饰增强间充质干细胞的免疫抑制作用

目的：探讨HGF基因在间充质干细胞（mesenehymal stem cell，MSC）中过表达对细胞生物学的影响，为扩充MSC临床应用范围提供依据。方法：用携带HGF基因的重组腺病毒感染人骨髓来源的间充质干细胞后。与对照细胞相比，进行以下项目的检测：FCM测定细胞表型；MTT法测定细胞增殖能力；ALP和钙定量以及组织化学染色检测细胞体外成骨和成脂肪能力；^3H—TdR掺入法测定MSC—HGF对混合淋巴细胞反应中效应细胞增殖活性的抑制作用。结果：HGF基因转染后MSC表型、体外增殖和分化能力无改变；混合淋巴细胞反应中，MSC—HGF对异基因抗原诱导的淋巴细胞增殖活性的抑制效应存在剂量依赖关系；MSC—HGF／MSC与效应细胞比例为1：80时，MSC组淋巴细胞增殖活性（cpm值）降低19．8％，MSC—HGF组降低68．3％，抑制率是MSC组的3．45倍。结论：HGF基因转染的人骨髓MSC仍维持固有的增殖和分化能力，而对体外细胞免疫反应具有更强的抑制效果，提示MSC—HGF在造血干细胞移植和器官移植中的潜在应用价值。     

关于成人难治性急性白血病诊断标准的再讨论和再认识

编者按 :由于近代医药科技的发展 ,急性白血病已不是不治之症。如今 ,80 %左右的患者经治疗可以完全缓解 ,其中部分患者能长期无病生存 ;但是仍有 2 0 %左右的患者是难治性的 ,不能缓解。面对这些患者 ,临床工作者常感棘手 ,因而难治性白血病成为目前急性白血病治疗中亟待解决的难题。鉴于这种情况 ,中国癌症研究基金会和白血病杂志社于 1997年和 1999年在乌鲁木齐和福州举办了两届全国难治性白血病的研讨会。两届会上 ,与会代表对难治性白血病的诊断标准和治疗方案进行了热烈而深入的讨论 ,并两次草拟了诊断标准和治疗方案的建议。现在 ,我们刊登了福州会上草拟的两个方案 (乌鲁木齐草案详见本刊第 6卷第 3期封 2 ) ,同时发表了 4位热衷于这方面问题的专家对此诊断和治疗的认识与建议。此举的目的在于抛砖引玉 ,以图引起大家对难治性白血病予以更多的关注 ,寻找更好的措施 ,以便尽早地解决这一棘手的问题 ,从而提高急性白血病的治疗水平 ,造福于白血病患者     

间充质干细胞促进半相合骨髓移植治疗急性放射病小鼠的实验研究

目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)促进半相合造血干细胞移植(haploid-SCT)治疗急性放射病小鼠的作用及机制。方法 ⁶⁰Co γ射线照射BALB/C(H-2^d)雌性小鼠8Gy,单独输注半相合CB6F1(H-2 bd) 雄性小鼠骨髓细胞1×10⁹/kg(I组),或联合CB6F1 雌性小鼠MSCs不同数量级1.5×10⁸/kg (a组)、5×10⁷/kg (b组)和2.5×10⁷/kg (c组)治疗,比较放射病小鼠的生存分析。同时,MSCs组小鼠尾静脉输注经cm-DiI膜染剂标记的CB6F1雌性小鼠MSCs和CB6F1雄性小鼠的骨髓细胞,与只输注CB6F1骨髓细胞的对照组比较,观察移植后不同时间供者细胞在受者骨髓的植入率、供者MSCs在受者体内发布、外周血象、T淋巴细胞亚群、胸骨骨髓病理和慢性移植物抗宿主病(GVHD)发生情况。结果 a组小鼠早期死亡率增加;b和c组存活率高于I组(P<0.05),但二组之间差异无统计学意义。移植后30 d,MSCs组受者骨髓的sry基因高于对照组。移植后MSCs主要集中在胸腺、骨髓、肝和小肠中,有形态改变。MSCs组的白细胞、血小板恢复较快。照射后15和30 d,MSCs组小鼠骨髓腔中的巨核细胞明显高于对照组。移植后7、14和30 d,MSCs组CD3高于对照组(P<0.05);移植后14和30 d,MSCs组CD4阳性细胞率和CD4/CD8值高于对照组(P<0.05)。MSC组慢性GVHD症状出现较对照组晚30 d。结论 MSCs通过促进干细胞植入,改善造血微环境,促进造血恢复,加快T淋巴细胞的恢复,延缓GVHD的发生时间和促进放射损伤的组织器官的修复,加强了半相合骨髓移植对急性放射病的治疗作用。     

非清髓异基因外周造血干细胞移植治疗高龄血液病临床研究

目的 探讨非清髓异基因外周造血干细胞移植(NAST)在治疗高龄血液病中的作用。方法 采用NAST、治疗高龄血液病患者5例。5例患者平均年龄55岁(53～59岁)。预处理方案主要由环孢素、抗淋巴细胞球蛋白和环磷酰胺等组成。结果 5例患者均顺利度过移植后造血抑制期，3例供者细胞完全植入，2例为供受者混合嵌合体。2例出现移植物抗宿主病(GVHD)，治疗后好转。结论 NAST简便安全，并发症少，疗效好，为高龄血液病的治疗开辟了新途径。