Sysmex XE2100血液分析仪散点图对检测异型淋巴细胞的价值

目的探讨存在异型淋巴细胞的血液标本在Sysmex XE2100全自动血液分析仪(简称XE2100)白细胞分类(DIFF)通道散点图的变化规律。方法观察40例异型淋巴细胞>10%和异型淋巴细胞<10%且其图像有明显变化的患者标本在XE2100 DIFF通道的散点图,总结其变化规律。结果存在异型淋巴细胞的标本在XE2100的散点图特定区域出现异常散点图。13例以单核细胞型为主的异型淋巴细胞标本在单核细胞散点图的上方出现异常均匀分布的呈椭圆形或近似长方形的散点图;27例以浆细胞型和幼稚型为主的混合型异型淋巴细胞标本中有19例标本在DIFF通道上淋巴细胞和单核细胞所在区域融合成灰白色并且向上延升,另外8例标本提示淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞在各自的分布区域出现,但其周围散点增多并相互之间有交叉,分界不清。结论对仪器提示有异型淋巴细胞存在的患者,结合血液分析仪的DIFF通道散点图形和血涂片镜检,可以降低漏诊和误诊概率。     

乙酰胆碱受体阻断剂对脂多糖活化THP-1细胞作用的影响

目的 观察乙酰胆碱受体阻断剂对脂多糖活化人单核细胞白血病细胞THP-1分泌细胞因子的影响,探讨乙酰胆碱通路在脓毒症中作用.方法通过细胞培养,实验细胞为THP-1细胞,分别加入不同浓度银环蛇毒素培养24h后,每孔加入100ng/ml脂多糖,同时做空白对照,CO2孵箱孵育6h,离心取上清液,检测TNF-α和IL-6,结果采用SPSS 17.0进行分析.结果 THP-1呈悬浮生长,使用不同浓度的银环蛇毒单独与THP-1细胞孵育24h后,检测上清TNF-α和IL-6分泌,比较是否加银环蛇毒两组间,P分别为0.71和0.32,结果无显著性差异.加入不同浓度银环蛇毒与THP-1细胞预孵育后,再使用LPS刺激6h,在银环蛇毒浓度为10μmol/L时,TNF-α和IL-6分泌大大增加.结论 银环蛇毒单独不能明显刺激THP-1细胞分泌TNF-α和IL-6,银环蛇毒对THP-1细胞Ach受体封闭存在一个剂量效应.     

儿童特发性血小板减少性紫癜治疗过程中血小板参数的变化及意义

目的探讨儿童特发性血小板减少性紫癜(ITP)治疗前、中、后血小板参数的变化及意义。方法检测47例ITP小儿患者使用地塞米松联合丙种球蛋白治疗前、用药后3 d(治疗中)、用药后1周(治疗后)的血小板数目(Plt)、平均血小板体积(MPV)、血小板平均分布宽度(PDW)、大血小板比率(P-LCR),并比较其治疗前、中、后的差异。结果Plt、PDW、P-LCR治疗前、中、后相互间比较均有显著性差异,MPV治疗前与治疗中、后有显著性差异,而治疗中与治疗后比较无显著性差异。结论ITP使用地塞米松、丙种球蛋白治疗效果明显,血小板的上述参数可以作为ITP治疗疗效的观察指标。     

脂多糖结合蛋白和可溶性CD14对小鼠体内脂多糖结合作用的研究

目的 研究血清中脂多糖结合蛋白(lipopolysaccharide binding protein,LBP),可溶性CD14(soluble CD14,sCD14)对小鼠体内脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)结合作用的影响.方法 ICR小鼠分组,共5组,分别注射蛋白终浓度均为100ng/ml的LPS与LBP、LPS与sCD14的混合液作为实验组,以及分别单独注射LPS、LBP、sCD14液作为对照组,30min后检测小鼠血清LPS浓度.结果 第2组LBP组和第4组sCD14组的LPS检测浓度明显低于第1组、第3组和第5组的结果(P＜0.01),第3组LPS与LBP混合组的LPS浓度明显高于第1组LPS组结果(P＜0.01).第5组LPS和sCD14混合组的LPS浓度高于第1组LPS组结果(P＜0.05),第3组LPS和LBP混合组的LPS浓度明显高于第5组LPS和sCD14混合组(P＜0.01).结论 100ng/ml外源性LBP比sCD14能更好地结合小鼠体内LPS,减轻了LPS对机体的损害.     

sCD14在内毒素诱导巨噬细胞活化中的调节机制

目的 观察不同浓度的sCD14和脂多糖（LPS）经过孵育和不孵育同时刺激佛波醇酯（PMA）诱导分化的THP-1细胞分泌肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,以研究sCD14在LPS转运和活化过程中的重要调节作用.方法 通过细胞培养,实验细胞为PMA诱导分化的THP-1细胞;同时将实验分为sCD14组（终浓度分别为1、0.5、0.1、0.01μg/ml）、sCD14～LPS混合物预孵育组（LPS终浓度分别为10、1ng/ml;sCD14终浓度为分别1、0.5、0.1、0.01μg/m1）、sCD14-LPS不孵育组（LPS终浓度分别为10、1ng/ml;sCD14终浓度为1、0.5、0.1、0.01μg/ml）,并分别培养4h后,吸出上清液至1.5ml的离心管中,于-70℃内保存并采用化学发光法检测TNF-α.结果 sCD14本身不能刺激单核细胞分泌TNF-α;LPS浓度为1ng/ml、sCD14浓度为0.01μg/ml和0.1μg/ml时,与LPS单独刺激TNF-α分泌量的差异均无统计学意义（均P＞0.05）;sCD14浓度为0.5μg/ml和1μg/ml时,TNF-α分泌量的差异均有统计学意义（P＜0.05或0.01）.在LPS浓度为10ng/ml、sCD14浓度为0.5μg/ml和1μg/ml时,与LPS单独作用TNF-α分泌量均有显著性差异（均P＜0.01）.sCD14/LPS混合物预孵育组曲线低平,无明显分泌高峰.结论 适当浓度的sCD14可明显增强LPS对单核巨噬细胞的活化作用,且在LPS高浓度时尤为明显,而将sCD14和LPS混合孵育可使上述效应减少甚至消失.     

Sysmex XE-2100定量分析网织红细胞的性能评价

目的:评价Sysmex XE-2100血液分析仪(以下称XE-2100)定量分析网织红细胞(reticuloeyte,RET)的性能,并探讨其影响因素.方法:通过XE-2100的线性、稳定性、精密度、准确度及携带污染率等各方面评价性试验观察其性能,并与Coulter STKKS(以下称STKS)和手工法相比较,同时做受试者工作特征曲线(ROC).结果:XE-2100计数RET在7.33×109/L～543.7×109/L的范围内线性良好(r=0.999).短期稳定性试验表明,RET在室温条件下放置1 h对其检测结果无影响;长期稳定性试验提示标本放置在4℃其稳定性最佳,22℃次之,37℃稳定性最差.批内精密度和批间精密度试验显示其检测RET的平均变异系数(CV%)分别为0.77%和3.22%;携带污染率为0.78%;XE-2100和手工法测定RET结果之间有良好的相关性(r=0.973,P＜0.05).ROC曲线显示其灵敏度和特异度分别为97.8%和92.5%.结论:XE-2100检测RET具有简便、快捷、精密度高、准确性好、线性范围宽、检测参数多等优点;除大血小板外,脂浊黄胆、含异淋、小红细胞的标本均未见对仪器产生干扰.     

一例P．Gly400Val和P．Arg532Ter导致的遗传性FXI缺陷症患者的临床表型CSCD

目的分析1例遗传性凝血因子XI（FXI）缺陷症患者的临床表型和基因突变特征。方法用凝固法检测先证者及家系成员活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time, APTT）、凝血酶原时间（prothrombintime,PT）、凝血因子Ⅺ活性（FⅪactivity,FXI：C）,ELISA方法检测凝血因子Ⅺ抗原（FXI antigen,FXI：Ag）。对F11基因第1～15外显子及其侧翼序列进行PCR扩增、纯化和测序,寻找突变位点并用Pymol软件对突变进行分析。结果先证者APTT为70．3S,明显延长,FXI：C和FⅪ：Ag同时下降为6％和1．9％。先证者儿子FⅪ：C和FⅪ：Ag均下降为31％和39％。测序结果显示先证者携带F11基因第11外显子C．1296G〉T（P．Gly400Val）错义突变和第14外显子C．1691A〉T（P．Arg532Ter）无义突变;先证者儿子为C．1296G〉T（P．Gly400Val）杂合突变携带者。Pymol软件分析显示P．Gly400Val突变导致FⅪ蛋白氢键数量变化,使蛋白质二级结构改变。根据人类基因突变数据库（HGMD professional 2016．4）,F11 NM_13142C．1691A〉T（p．Arg532Ter）为未报道过的新突变,根据美国医学遗传学与基因组学学会（ACMG）2015年指南判断为功能缺失型突变。结论F11NM_13142 C．1296G〉T（p．Gly400Val）和F11 NM_13142C．1691A〉T（P．Arg532Ter）复合杂合突变是导致先证者遗传性FXI缺陷症的致病原因,引起FXI抗原和活性同时下降。     

三种检测血小板数方法的初步评价

目的以测定血小板的参考方法评价电阻抗法、光学法,寻求一种理想的测定异常血液标本血小板数方法。方法血液标本分为大血小板组、血小板聚集组、小红细胞组以及血小板和红细胞正常组,使用参考方法和Sysm ex XE-2100全自动血液分析仪的电阻抗通道、光学通道同时测定同一标本血小板数并以参考方法为准进行配对t检验和相关分析。结果电阻抗法和光学法的重复性良好,互染率低,大血小板增多组、血小板聚集组以及血小板和红细胞形态正常组中3种方法检测结果差异无显著性(P>0.05),小红细胞组电阻抗法和参考方法差异有显著性(P<0.05),光学法和参考方法则差异无显著性(P>0.05)。相关分析结果显示光学法测定结果比电阻抗法更接近参考方法。结论光学法是解决异常血液标本检测血小板数的一个准确而客观的重要手段,为临床提供可靠的诊疗依据具有重要的意义。     

光学法纠正血小板计数假性减少1例

我们遇到1例因大血小板比例过高引起的电阻抗法测定血小板时结果假性减少的患者，改用光学法测定血小板，纠正了结果偏差。     

碳酸酐酶法测定乳汁锌

目的建立灵敏、准确、特异且试剂稳定的碳酸酐酶法测定乳汁锌.方法乳汁灰化后溶于0.1mol/L HCl,测定前先用0.01mol/L NaOH稀释并中和酸,测定时待分析液中锌离子复活脱辅基的碳酸酐酶,以醋酸对硝基酚作为酶促反应底物进行测定.结果线性范围达61.2μmol/L,回收率95.6%～103.8%,批内和批间变异系数分别小于3.5%与4.9%,本法(X)与原子吸收分光光度法(Y)比较具有良好的相关性,Y=0.986X+0.033,r=0.988.Cu2+、Fe2+、Mn2+各200μmol/L对锌测定均无影响;Co2+10μmol/L以下对本法测定乳汁锌结果也无干扰.结论该法具有特异、准确、灵敏且试剂稳定等优点,适合于生化分析仪检测乳汁锌.