磷酸钙骨水泥/骨形态发生蛋白复合人工骨的生物相容性

目的：将自行合成的磷酸钙骨水泥（CPC）作为载与BMP复合成人工骨,检测其生物相容性,方法：制备CPC／BMP及CPC骨块,免疫原性,对血液系统的影响街道一物相容性指标,结果：动物实验表明材料属无毒级,不含致热原,体外试验不引起溶血反应,对凝血功能无明显影响,植入兔或小鼠肌内未检测出特异性抗体,组织学检查未见免疫排斥反应,对肌肉无刺激作用,对体外培养的细胞增殖没有明显抑制作用,结论：材料有较好的生物相容性,临床使用安全。     

牛松质骨力学强度与去抗原处理时限的相关性实验

采用材料力学实验方法研究了牛松质骨力学强度与去抗原处理时限的相关性。     

大鼠脊髓损伤局部空洞瘢痕的量化分析

目的: 对脊髓损伤后形成的空洞和瘢痕进行量化分析。方法: 成年雄性SD大鼠 32只, 随机分为术后7、14、21和 28d4组。切断大鼠T9 平面脊髓制备脊髓完全横断损伤模型, 术后相应时间灌注取材, 切片行HE、天狼猩红染色以及GFAP (胶质细胞酸性蛋白 )、NF (神经丝蛋白 ) 免疫荧光染色。计算机图像分析测算脑膜瘢痕面积, 胶质瘢痕面积, 空洞直径和脊髓残端间距。结果: 脑膜瘢痕面积为 0. 052mm2, 胶质瘢痕面积为 0 .026mm2。脑膜瘢痕面积接近胶质瘢痕的 2倍, 差异显著 (P<0. 05)。脑膜瘢痕和胶质瘢痕主要成分均为Ⅰ型胶原。在胶质瘢痕内可见NF阳性标记的再生神经纤维, 而在脑膜瘢痕中却全然没有, NF标记的再生神经纤维无法逾越脑膜瘢痕。结论:空洞和瘢痕形成了再生神经纤维无法逾越的巨大障碍, 脑膜瘢痕要甚于胶质瘢痕。在脊髓损伤修复中移植桥接脊髓就成为必须。     

重组合异种骨移植成骨活性实验研究

为观察重组音异种骨(RBX)的成骨活性和量效关系，采用RBX移植建立BALB／C小鼠肌袋模型。结果显示：①含不同比例的牛骨形态发生蛋白(bBMP)的RBX组，成骨活性与bBMP含量呈正相关(r=0.7204，P<0．01)，存在着剂量依赖关系；②RBX Ⅰ组成骨良好，同样含量的纯bBMP组电出现可见的骨效应，但最终未能成骨；③碱性磷酸酶活性以术后7天最高，42天仍较明显。提示：RBX是高效诱导成骨材料，经处理的同源松质骨粒是良好的缓释载体，提高了bBMP的骨诱导能力。植骨初期应注意维持植骨区环境的稳定，以保障成骨能顺利进行。     

氯化锌烧灼对骨巨细胞瘤细胞及移植骨愈合影响的实验研究和临床应用

对骨巨细胞瘤的治疗至今争论尚多。我院采用彻底刮除肿瘤,以50％氯化锌水溶液烧灼骨腔壁和植骨的方法,治疗邻近大关节的Ⅰ、Ⅱ级骨巨细胞瘤,经平均五年的随访,治愈率为87.5％,复发率为12.5％。对3例复发者仍用同法治疗,其中2例治愈。总治愈率为95.8％。     

岛状肌瓣促进骨修复能力的实验研究

目的:利用一种动物岛状肌瓣的模型,探讨肌瓣在四肢骨折修复中促进骨修复的能力。方法:切除家兔的股四头肌和其下前半侧骨膜,暴露股骨干,用电踞切下一块1.5cm×0.4cm大小的皮质骨,半小时后骨块回植原位。以腹壁下动脉为蒂的腹直肌肌瓣和以腹壁浅动脉为蒂的下腹部皮瓣,转位修复兔大腿创面。4周后运用r计数方法测量游离骨块的代谢情况,以确定局部成骨能力。结果:肌瓣组4周后游离骨块的r计数值明显高于岛状皮瓣组,成骨能力强于岛状皮瓣。结论:肌瓣在四肢开放性粉碎性骨折的修复中具有很强的促进骨修复的能力,在四肢骨折伴软组织缺损的修复中是一种良好的选择。     

使用hTERT启动子实现肿瘤特异性RNA干扰

目的：修饰hTERT核心启动子，构建shRNA表达载体，实现肿瘤特异性RNA干扰。方法：使用人工TATA盒修饰hTERT核心启动子，重建转录起点。将含有修饰后hTERT启动子的MluI／XhoI片段克隆至pGL3-OCP—shLuc的相应酶切位点，获得pGL3-mhTERT—shLuc。设计针对p53的shRNA编码序列，并以XhoI／XbaI克隆至pGL3-mhTERT-shLuc的相应酶切位点之间，获得pGL3-mhTERT—shp53。使用pGL3-mhTERT—shLuc与pGL3-control共转染人骨肉瘤细胞U20S、MG-63和HOS，48h后测定虫荧光素酶活性，计算相对活性。使用pGL3-mhTERT—shp53不同的人骨肉瘤细胞，利用Western Blot分析转染前后p53的表达水平。结果：双酶切鉴定和DNA测序证实pGL3-mhTERT—shLuc和pGL3-mhTERT-shp53的序列与设计完全一致。pGL3-mhTERT—shLuc与pGL3-control共转染实验发现，在hTERT—U20S细胞虫荧光素酶相对活性与对照组相比没有明显差异，而在hTERT 的MG-63和HOS细胞在转染后虫荧光素酶相对活性显著降低，与对照组相比抑制效率可分别达到69．7％和71．0％。Western Blot分析表明，与转染pGL3-mhTERT相比，使用pGL3-mhTERT—shP53转染MG-63和HOS后可显著抑制p53的表达，而U20S的p53的表达水平与对照组没有明显改变。结论：我们成功使用TATA盒对hTERT核心启动子进行了修饰，利用其构建了shRNA表达载体，并实现了肿瘤特异性RNAi，为进一步提高基于RNAi技术的基因治疗方法的安全性奠定了实验基础。     

新型聚左旋乳酸/磷酸三钙多孔材料构建工程化骨的体外研究

由两种或两种以上不同材料优化而成的组织工程替代材料是近年来骨组织工程发展的新趋势[1] ,这些复合材料可望获得比单种材料更优良的物理化学性能、生物相容性和生物降解性能。本研究旨在检测聚左旋乳酸与磷酸三钙的复合材料的生物性能和细胞承载能力,为组织工程化骨的构建奠定实验基础。一、材料和方法1.PLLA/TCP复合材料的制备:实验方法见文献[2 ]。2 .PLLA/TCP复合材料孔径、孔隙率及力学性能的检测:材料经常规处理,扫描电镜下观察其空隙情况,测定出孔径。用排液法测定其孔隙率。所选择的液体为乙醇,因为它能和PLLA/TCP很好的…     

外源性TNF-α对bBMP异位诱导成骨的影响

目的：了解局部注射重组人α肿瘤坏死因子（ｒｈＴＮＦ－α）对牛骨形态发生蛋白（ｂＢＭＰ）在小鼠体内异位诱导成骨的影响。方法：采用Ｘ线检查成骨面积图像分析、碱性磷酸酶活性测定、钙含量测定和组织学检查等方法，对局部注射不同剂量ｒｈＴＮＦ－α后ｂＢＭＰ诱导成骨活性的变化进行评价。结果：①ｂＢＭＰ５ｍｇ植入小鼠肌袋内可诱发一个完整的骨发育过程，导致异位骨软骨组织发生；②在ｂＢＭＰ植入区注射ｒｈＴＮＦ－α后，ｂＢＭＰ诱导成骨活性受到干扰，表现为成骨活性随ｒｈＴＮＦ－α注射剂量的增加而减小；③ｒｈＴＮＦ－α使ｂＢＭＰ诱导的间充质细胞分化成骨过程受到影响，导致成骨时间延长或完全阻滞。结论：ｒｈＴＮＦ－α在小鼠体内可削弱ｂＢＭＰ的异位诱导成骨能力并抑制间充质细胞分化成骨     

异种骨抗原性的免疫组织化学实验研究

异种骨来源广泛,简单经济,但由于植骨引起的免疫排斥使其无法应用于临床。为了消除这种免疫反应,必须探明异种骨各组织成份的抗原性,该问题长期以来无明确答案。本实验用免疫组织化学技术和新鲜骨不脱钙切片方法,成功地解决了这一问题。本实验方法用于骨移植免疫的研究,国内外文