理气补肾方对DES诱发勃起障碍大鼠阴茎eNOS蛋白表达的影响

目的观察理气补肾方对乙烯雌酚(diethylstilbestrol,DES)诱发的勃起功能障碍Wistar大鼠阴茎功能及一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,eNOS)蛋白表达的影响。方法 11周龄雄性Wistar大鼠30只,适应性饲养1周后,分为空白组8只、实验组22只,实验组采用腹腔注射DES诱发大鼠勃起功能障碍,8周后根据大鼠血清睾酮(testosterone,T)及阿扑吗啡(apomorphine,APO)实验筛选勃起功能障碍模型大鼠,并将其按照随机数字表法分为两组,模型组8只,中药组9只。中药组给予理气补肾颗粒剂水溶液灌胃,空白组、模型组给予等体积蒸馏水灌胃。干预4周后,APO实验评价大鼠阴茎勃起功能,腹主动脉取血检测血清促黄体生成素(luteninizing hormone,LH)、卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)及T,HE染色观察大鼠阴茎海绵体组织形态变化,免疫组化观察大鼠阴茎eNOS蛋白表达。结果与模型组相比,理气补肾中药组显著增加大鼠30分钟内阴茎勃起次数(P0.05)、缩短勃起潜伏期(P0.05),升高大鼠血清T水平(P0.05),增加了阴茎海绵体血窦数量,增加阴茎海绵体eNOS蛋白表达(P0.05)。结论理气补肾中药可以显著改善DES诱发勃起功能障碍并增加血清T水平,其机制可能与增加阴茎海绵体eNOS蛋白表达有关。     

一株变异SARS冠状病毒N蛋白的原核表达及活性测定

目的 :克隆编码严重急性呼吸综合征冠状病毒 (SARS CoV)N蛋白的DNA ,构建原核表达质粒pGEX 2T/N ,并诱导表达。方法 :采用RT PCR方法从病毒培养液中获得N基因片段 ,并克隆入T EASY载体中。经PCR、双酶切鉴定后 ,测序。将N蛋白基因序列定向插入原核表达载体pGEX 2T中 ,表达融合蛋白。用表达产物与抗SARS CoV抗体阳性血清做Westernblot。结果 :N蛋白DNA测序的结果与GenBank比对缺失 2 0个bp。GST N融合蛋白以可溶形式表达。Westernblot检测表明 ,其与抗SARS CoV抗体阳性血清的反应呈阳性。结论 :成功地构建原核表达质粒pGEX 2T/N ,并表达GST N融合蛋白 ,为下一步的研究奠定了基础。     

子宫动脉栓塞术治疗剖宫产术后子宫瘢痕妊娠112例临床分析

目的 探讨子宫动脉栓塞术治疗剖宫产术后子宫瘢痕妊娠(CSP)的临床效果.方法 对宁波市妇女儿童医院2012年1-12月收治的112例接受双侧子宫动脉栓塞术治疗的子宫瘢痕妊娠患者的临床资料进行回顾性分析.结果 112例患者入院前均经阴道超声检查,101例明确诊断,11例怀疑为CSP;94例患者治疗前行核磁共振成像检查以明确子宫瘢痕肌层厚度、孕囊大小.所有患者均成功行双侧子宫动脉栓塞术,术中双侧子宫动脉灌注甲氨蝶呤50～100 mg,术后95例患者在B超引导下行清宫术,17例患者在宫腔镜下行妊娠物清除术,手术顺利,术后痊愈,随访均无严重并发症出现.结论 子宫动脉栓塞术治疗剖宫产术后子宫瘢痕妊娠可保留患者生育功能,安全有效,值得临床推广应用.     

Genistein对去卵巢后大鼠基底前脑神经元一氧化氮合酶表达及认知功能的影响

目的：观察去卵巢大鼠植物雌激素替代治疗后基底前脑一氧化氮合酶阳性神经元的表达和其认知功能在去卵巢后的时程变化。 方法：实验于2004—07／2005-07在南通大学基础医学院人体解剖学教研室完成：3月龄雌性大鼠48只随机抽签法分为假手术组、去势组、Genistein替代组和雌激素替代组，每组12只。卵巢切除前，各组大鼠行避暗回避实验行为学检测。各组大鼠的处理：①去势组：切除双侧卵巢。②Genistein替代组：切除双侧卵巢后进行Genistein替代，剂量100μg（溶于200μL DMSO）。③雌激素替代组：切除双侧卵巢后进行雌激素替代，皮下注射苯甲酸雌二醇，剂量10μg（溶于100μL无菌芝麻油）。④假手术组：只切开双侧腰肌不触及卵巢，随即缝合伤151，相同条件下存活4周。药物注射隔日1次，时间固定，持续4周，分别于最后1次注射24h后进行灌注固定。各组大鼠在灌注前1周进行避暗回避实验。脑切片用NADPH—d组织化学方法染色，观察基底前脑内侧隔核、斜角带核垂直支脑区一氧化氮合酶阳性神经元的分布，并进行计数和统计分析。结果：实验过程中无动物死亡，全部进入结果分析。①去势前各组大鼠避暗回避实验的探索次数和滞留时间差异无显著性（P均〉0．05）；去势后行替代治疗1，2周后，各组大鼠避暗回避实验的探索次数和滞留时间差异无显著性（P均〉0．05）；替代治疗4周后，Genistein替代组和雌激素替代组大鼠的探索次数比去势组明显减少，滞留时间比去势组明显延长（P〈0．05）。②大鼠基底前脑一氧化氮合酶阳性神经元染色为深蓝色，胞体边界清晰，突起明显，为双极或多极细胞。内侧隔核的一氧化氮合酶阳性细胞主要分布于中线两侧，呈倒“V”字形排列，体积较小，胞体多呈梭形，各组大鼠的神经元数目在术后各时间点的差异不明显。在斜角带核垂直支则呈”人”字形排列，胞体较内侧隔核大，多呈锥形或椭圆形，多为多极神经元。各组大鼠神经元的数目呈动态变化，Genistein或雌激素替代组一氧化氮合酶阳性神经元数目上升，而去势组减少，替代治疗后1，2周内，Genistein或雌激素替代组与去势组之间差异无显著性（P〉0．05）；第4周时Genistein或雌激素替代组一氧化氮合酶阳性神经元的数目接近于假手术组水平，与去势组间差异有显著性（P〈0．01）。 结论：去卵巢后行替代治疗能增加大鼠基底前脑一氧化氮合酶阳性神经元的表达，改善大鼠认知功能，可能对中枢神经系统退行性病变起保护作用。     

自噬在HPV持续感染中的研究进展

自噬是双膜囊泡包裹胞内受损蛋白质及异常细胞器等组分并运输至溶酶体降解的生物过程,将降解内容物再利用以维持细胞内稳态。人乳头瘤病毒(HPV)持续感染是宫颈癌发生和发展的主要因素。研究发现,HPV内吞过程可抑制细胞自噬,促进病毒感染,同时还可能通过调节自噬反应影响先天免疫应答和DNA损伤修复等途径维持病毒持续状态。现就自噬与HPV感染及病毒持续状态之间的研究进展作一综述,为探讨HPV持续状态的发生机制及建立新的治疗方案提供思路。     

急性心肌梗死后心肌炎症反应及其意义

目的：探讨急性心肌梗死后心肌是否发生炎症性损伤。方法 在体结扎Wistar大鼠冠状动脉左前降支（LAD）复制急性心肌梗死大鼠模型和假性手术大鼠对照。6周后，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测大鼠血清抗肌球蛋白重链抗体。组织学检查心肌病理改变，免疫组织化学染色分析浸润心肌组织T淋巴细胞的表型。结果：急性心肌梗死大鼠（5／12例）血清中检测到抗肌球蛋白重链抗体，阳性率为41．7％，对照组（0／10例）均为阴性（P〈0．05）。在大鼠非梗死区心肌组织中出现散在分布的血管周围炎和间质淋巴细胞浸润，免疫组织化学染色显示心肌组织CD4^＋T细胞浸润占有显著优势。结论：急性心肌梗死后心肌组织发生了异常的炎症反应。     

人工合成HIV多肽的抗原性比较研究

为了建立检测HIV感染的敏感方法,根据文献报道的HIV-1和HIV-2基因组核苷酸序列、氨基酸序列,利用计算机分析其亲水性和抗原决定簇位点,自行设计合成了HIV-1gp41、gp120、P24和HIV-2pg36区域的10条多肽,以此多肽作抗原包被反应板,建立了检测HIV抗体的间接ELISA方法,同时检测10份抗HIV-1阳性病人血清和4份抗HIV-2     

中空纤维生物反应器的建立及其功能的初步鉴定

目的构建生物反应器并评估其生物学功能。方法采用自主建立的永生化HepG2细胞系为生物材料,以中空纤维构建生物反应器,观察肝细胞在生物反应器内生长情况,同时进行肝细胞功能检测,以肝衰竭患者血浆置换出的废弃血浆作为试验因素,试验性行生物人工肝治疗。结果该系统内肝细胞生长良好,每个生物反应器培养72h后细胞数量达7．60×10^8个,肝细胞活力保持90％以上。AST、LDH低水平波动;利多卡因转化实验良好;对细胞培养液进行细菌培养监测及支原体检测,均未发现异常。应用肝衰竭患者血浆500ml培养肝细胞6h,总胆红素平均下降98．6μmol／L。结论建立的永生化肝细胞系应用中空纤维构建生物反应器,肝细胞功能良好,经进一步改进有望应用于生物人工肝治疗。     

外周血E-selectin、P-selection及K-ras基因突变水平在胰腺癌中的表达及意义

目的 探讨外周血内皮细胞选择素(E-selectin)、血小板选择素(P-selection)及K-ras基因突变水平在胰腺癌中的表达及意义.方法 选择2019年2月—2020年2月收治的胰腺癌60例作为胰腺癌组,选择同期健康体检的健康人60例作为对照组.应用双抗夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)检测2组外周血E-s...