结核分支杆菌诊断抗原ESAT6在大肠杆菌中的表达及纯化

结核病近几年有死灰复燃的趋势,现在全世界每年大约有300万人死于结核病,约800万人患结核病.军队作为特殊群体,结核病总体发病率水平明显高于全国同龄组人群[1],在军队的发病排序中是仅次于肝炎和痢疾的第3大传染病[2].海军舰船上人口密度高,舱室空间相对狭小,一旦传播将很快蔓延,对结核病的早期、特异诊断是控制结核病在舰船上蔓延的关键环节之一.     

缺血/再灌注心肌к阿片受体的变化及其与抗I/R性心律失常的关系

目的 观察κ阿片受体(κ opioid receptor,κ-OR)在抗大鼠心肌缺血/再灌注(ischemia and reperfusion,I/R)中的变化及其与抗I/R性心律失常的关系。方法 将48只SD大鼠随机分为6组,每组8只,即对照组、U50,488H组、I/R组、U50,488H+I/R组、BNI+U50,488H+I/R组和BNI+I/R组,用于建立在体的大鼠I/R模型,观察κ-OR激动剂U50,488H对大鼠心肌I/R模型室性心律失常的影响。另取18只SD大鼠随机分为6组,每组3只,即对照组、假手术组、再灌注即刻组、60、180和360 min组,用于RT-PCR及Western blot检测I/R处理后心肌组织中κ-OR mRNA转录及其蛋白的表达。结果 对照组偶发早搏,I/R组心律失常的发生率明显增加(P<0.01)。给予U50,488H可以明显降低I/R引起的室速和室颤的发生率(P<0.01)及心律失常的评分(P<0.05)。U50,488H抗心律失常的作用可被选择性的κ-OR拮抗剂nor-BNI完全阻断(P<0.01),而nor-BNI本身对I/R所致心律失常没有影响。RT-PCR的结果发现,κ-OR mRNA的转录水平在再灌注的即刻、再灌注后60及180 min时,明显高于对照组(P<0.01),在60 min时达到高峰,360 min时恢复到正常水平。Western blot检测表明,在再灌注的即刻、再灌注后60,180 和360 min时,κ-OR蛋白的表达量均明显高于对照组(P<0.05)。结论 在心肌I/R时,κ-OR基因的转录和其蛋白表达的水平明显上调,可能与其抗I/R性心律失常的作用相关。     

κ阿片受体在抗缺血/再灌注大鼠心律失常中的作用机制

目的研究κ阿片受体在抗缺血/再灌注性心律失常中的作用机制,并初步探讨κ阿片受体选择性激动剂U50488H(U50)对大鼠血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、内皮素(ET)和一氧化氮(NO)的调控作用。方法实验大鼠随机分为7组,即对照组(Control),缺血再灌注组(I/R),U50+I/R组,PTX组(pertussis toxin,百日咳毒素,G i/o蛋白抑制剂),G lib组(glibenc lam ide,KATP通道阻断剂),Che组(chel-erythrine,PKC选择性抑制剂)和Gen组(gen iste in,酪氨酸激酶TK抑制剂),观察心律失常发生情况并计算心律失常评分;检测血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、内皮素(ET)和一氧化氮(NO)水平。结果①与I/R组相比,U50488H+I/R组大鼠心律失常评分明显下降,该作用可被选择性κ阿片受体阻断剂nor-BNI阻断。②分别提前给予PTX,glibenc lam ide和chelerythrine后,U50488H的抗心律失常作用可被明显减弱或阻断;③提前给予gen iste in对U50488H的抗心律失常作用无明显影响。④与正常大鼠血浆AngⅡ、ET和NO含量比较,I/R组血浆AngⅡ和ET含量明显增加,NO含量明显降低;给予U50488H处理后,U50+I/R组大鼠血浆AngⅡ和ET含量比I/R组降低,而NO含量则明显升高。结论①κ阿片受体介导了抗缺血/再灌注性心律失常的作用,该作用的信号转导途径可能涉及G i/o、PKC和KATP等通道。②激活κ阿片受体还可能通过下调大鼠血浆AngⅡ和ET或上调NO等因子的水平来发挥抗心律失常作用。     

昆明市一起甲型副伤寒流行的临床分析

目的对昆明市一起甲型副伤寒的流行进行调查,以了解其流行病学和临床发病特点。方法从2008年9月22日～11月28日,收集105例发热患者的临床资料,均为昆明市某职业技术学院师生。采用自制《发热病人个案调查表》行流行病学调查和临床特点分析。结果 78例血培养发现甲型副伤寒杆菌生长,主要症状为发热（100%）、相对缓脉（95.2%）;4例合并伤寒肝炎,5例合并支气管肺炎。经敏感抗生素治疗后,全部105例患者治愈出院,未发生肠穿孔及肠出血等严重并发症。其中复发2例,经治疗后治愈出院。结论甲型副伤寒除发热及相对缓脉外,症状多不典型,并发症不多且较轻,对多种头孢类抗生素及三代氟喹诺酮药物敏感,治疗效果良好。     

U50,488H抗大鼠缺血/再灌注损伤心律失常作用与抑制钠通道电流有关

目的观察κ阿片受体选择性激动剂(U50,488H)对大鼠心脏缺血/再灌注(ischemia and reperfusion,I/R)室性心律失常的影响并探讨其可能的机制。方法观察U50,488H对大鼠I/R整体动物模型血浆肌酸磷酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)水平的影响;分离正常大鼠心脏,采用Langen-dorff离体心脏灌流方法,预先给予U50,488H(5mmol·L-1)和NE(100μmol·L-1),测定其对血流动力学指标和对心律失常的影响;常规酶解法分离成年大鼠心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术观察U50,488H对钠电流的作用。结果①U50+I/R组血浆中CK和LDH的含量较I/R组明显降低(P<0.01)。②与I/R组相比,给予U50,488H后,心率明显下降(P<0.05)。③对照组偶发早搏,I/R组心律失常发生频率明显增加,与I/R组相比较,I/R+NE组心律失常评分明显增高(P<0.01);如果提前给予U50,488H,发现不仅可以明显降低I/R组缺血和再灌注期间室速和室颤的发生率(P<0.01)及降低I/R组心律失常的评分,而且明显降低I/R+NE组心律失常的评分(P<0.01)。④U50,488H(100μmol·L-1)可以明显降低心室肌细胞的钠电流(P<0.01)。结论κ阿片受体激动剂U50,488H对I/R时的心律失常有拮抗作用,其作用可能是通过抑制心肌细胞的钠电流而实现的。     

靶向HBV C基因的siRNA在HepG2.2.15细胞中对HBV的抑制作用

目的研究靶向HBV C基因的短发夹状RNA(shRNA)表达质粒对HepG2.2.15细胞中HBV的抑制作用。方法设计构建两个靶向HBV C基因的shRNA表达质粒S1和S2,以及用于对照的非同源shRNA表达质粒S3。转染HepG2.2.15细胞后,通过RT-PCR和ELISA方法分别检测细胞中HBV C基因表达和细胞上清中HBV DNA、HBsAg和HBeAg表达。结果在转染后24 h时,HBV C基因mRNA表达量下降58%～83%,HBV DNA下降了2.44～3.36个log值,HBsAg和HBeAg的表达水平分别降低了51%～79%和50%～77%。S1、S2联合运用可以提高对HBV的抑制作用,而S3无抑制效果。结论靶向HBV C基因的shRNA表达质粒S1、S2及其联合运用,均能有效地抑制HepG2.2.15细胞中HBV的复制和表达。     

发生部位对残胃癌临床病理特征及预后的重要意义

目的探讨发生部位对残胃癌临床病理特征及预后的重要意义。方法回顾性分析84例残胃癌患者的临床病理资料及生存资料。结果发生于吻合口部位的残胃癌发病年龄较大、首次术后间隔时间较长、原发疾病以良性疾病多见,吻合口部位的残胃癌肿瘤直径≤4cm者、无淋巴结转移者较非吻合口多见,且根治性切除率较高(P<0.05)。位于吻合口的残胃癌患者预后较非吻合口者较好(P<0.05)。结论残胃癌的发病部位常提示不同的临床病理特征、疾病性质及预后,可以帮助外科医师明确残胃癌的诊断,判断残胃癌的外科治疗方式及预后。     

全血γ干扰素释放试验在拟诊结核患者中的应用价值

目的：探讨全血γ干扰素释放试验在结核病中的诊断价值。方法对92例拟诊结核病例和22例非结核阴性对照病例进行全血γ干扰素释放试验,同时将92例拟诊病例根据其结核诊断依据强度分为可能结核病例组（17例）、疑似结核病组（58例）和确诊结核病例组（20例）3组,观察各组病例γ干扰素释放试验阳性率。结果92例拟诊结核病例中,阳性73例,总体阳性率为79.34％。其中可能病例、疑似病例和确诊病例组阳性率分别为38.89％（7/17）、87.27％（48/55）、90.06％（18/20）;22例阴性对照组中仅1例阳性,特异性为95.45％（21/22）。所有14岁以下拟诊儿童病例阳性率为57.14％（4/7）,明显低于总体阳性率和成人阳性率。在确诊和疑似结核病例的9例阴性结果中,包括2例儿童,1例高龄患者,1例合并2型糖尿病,1例 HIV 抗体阳性。结论全血γ干扰素释放试验是一种敏感性和特异性均较高的结核病诊断方法,对肺及肺外结核病的诊断和鉴别诊断有重要的应用价值。同时,患者免疫状况和基础疾病（如 HIV 感染、糖尿病等）对γ干扰素释放试验结果存在一定影响。     

U50488H对缺血-再灌注大鼠心肌的直接保护作用

目的：研究选择性κ阿片受体激动剂U50488H对缺血-再灌注大鼠心肌梗死范围和对其血浆肌酸磷酸激酶（CK）及乳酸脱氢酶（LDH）的影响。方法：将实验大鼠按随机原则分为四组，即对照组、缺血．再灌注（I／R）组、U50488H＋I／R组和Nor—BNI＋U50488H＋I／R组。观察各组大鼠心肌梗死范围，检测各组大鼠CK及LDH。结果：①U50488H可明显减少心肌缺血-再灌注引起的心肌梗死范围，但该作用可被选择性K阿片受体阻断剂NorBNI所阻断；②L／R组大鼠血浆CK和LDH含量明显高于对照组，US0488H＋I／R组较Nor-BNI＋U50488H＋I／R组明显降低。结论：U50488H可明显减少心肌缺血-再灌注大鼠心肌梗死范围，减少心肌细胞蛋白酶的漏出，对缺血-再灌注心脏具有明显的保护作用。