高效液相色谱法测定人血清盐酸劳卡尼浓度

介绍了一种测定人血清盐酸劳卡尼(lorcainide hydrochloride)浓度的高效液相色谱法(HPLC)。不锈钢分析柱(200mm×5mmID)固定相为YWG C₁₈H₃₇,5μm颗粒。流动相为甲醇-水-0.625mol·L^-1醋酸铵(86:13:1v/v),用浓氨水调至pH8.0。流速1ml·min^-1。取地尔硫(diltiazem)为内标物。紫外检测波长226nm。低、中、高3种浓度方法回收率分别为95.85%,100.63%,100.09%,由低至高四种浓度日内、日间RSD小于7%。血清最低检测浓度为5μg·L^-1。在20～800μg·L^-1浓度范围内线性良好,r=0.9996。     

直接原位RT-PCR检测人成骨肉瘤MG-63细胞株雌激素受体亚型表达

目的观察人成骨肉瘤MG63细胞株雌激素受体亚型mRNA表达特征。方法用直接原位RTPCR及激光共聚焦显微镜观察MG63细胞株在培养第6及第9天ERα、ERβmRNA表达。结果各检测点均见一定量的荧光弥散于细胞内。阳性对照点荧光较其他两点强,阴性对照点荧光明显减弱,仅见少量背景荧光。ERα的荧光强度强于ERβ。结论(1)MG63细胞株作为成骨细胞模型,存在ERα和ERβ基因的mRNA表达。(2)骨基质成熟早期阶段MG63细胞株的ERα表达比ERβ丰富,这表明两者在功能上存在差异。     

甲状旁腺激素抑制成骨细胞MT1-MMP表达、介人RANKL信号通路

目的 研究甲状旁腺激素(PTH)对人成骨样MG-63细胞膜型基质金属蛋白酶—1(MT1—MMP)表达、NF—κB受体活化素配体(receptor activator of NF—κB ligand，RANKL)信号通路的影响，探讨PTH调节骨代谢作用机制。方法 MG-63细胞用PTH(1-34)干预。Western杂交检测MT1—MMP蛋白质表达，Northern杂交检测RANKL mRNA表达。结果 观察到PTH(1-34)抑制MG-63细胞MT1—MMP蛋白质表达呈剂量依赖性。10^-8M PTH(1．34)干预2～48h抑制MT1—MMP蛋白质表达。蛋白激酶A(PKA)抑制剂H—89阻断PTH(1-34)介导的MT1—MMP表达减低反应，而PKA激动剂Forskolin抑制MT1—MMP表达。蛋白激酶C(PKC)抑制剂Staurosporine亦阻断PTH介导的MT1—MMP表达减低反应。PTH(1-34)诱导MG-63细胞RANKL mRNA表达呈剂量依赖性、时限性。并且PTH对RANKL的诱导效应与对MT1—MMP的抑制效应平行。结论 PTH通过PKA、PKC信号转导途径调控成骨细胞MT1—MMP表达。PTH可能通过抑制成骨细胞MT1—MMP表达，进入RANKL信号通路，促进骨吸收。     

17β-雌二醇对人骨肉瘤MG-63细胞株IL-6、IL-11和NF-κB表达的作用

目的观察17β-雌二醇（17β-E2）对人骨肉瘤（Osteosarcoma）MG-63细胞株IL-6（interleukin-6）、IL-11及NF—kB（nuclear factor-kappa B）表达的影响。方法用RT—PCR技术、Northern blot和Western Blot观察17β-E2对人骨肉瘤MG-63细胞株IL-6、IL-11及NF-kB表达的影响。结果17β-E2下调MG-63细胞IL-6 mRNA及蛋白质的表达；17β-岛下调MG-63细胞IL-11 mRNA及NF—kB蛋白质的表达。结论17β-E2下调MG-63细胞NF-kB、IL-6和IL-11的表达，此可能是妇女绝经后雌激素补充治疗的依据之一。     

人成骨肉瘤MG-63细胞株和正常成人成骨细胞MMP及TIMP的表达

骨重建 (ｂｏｎｅｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ)由按一定时序交替进行的骨吸收和骨形成组成 ,是骨吸收与骨形成不断交替进行的过程。骨吸收包括骨基质的降解 ,其中由成骨细胞和破骨细胞产生的基质金属蛋白酶 (ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ ,ＭＭＰ)起着重要的作用[1] 。基质金属蛋白酶抑制因子 (ｔｉｓｓｕｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ,ＴＩＭＰ)能够特异性地抑制ＭＭＰ的功能 ,ＭＭＰ和ＴＩＭＰ之间的平衡状况调控着骨基质降解的速度和数量[1] 。骨组织表面覆盖一层由成骨细胞和未矿化的Ｉ型胶原等骨基质构成的屏障 ,阻止破骨细胞活化和与矿化骨基质接触 ,     

Seminar教学法在儿科临床实习教学中的应用

目的探讨Seminar教学法在儿科临床实习教学中的应用效果。方法选择2017年8月至2018年7月在我院儿科实习的92名医学生为研究对象,按照不同教学方法分为研究组和对照组,每组46名。对照组采用传统授课法进行教学,研究组采用Seminar教学法。学生实习结束后,对两组学生进行出科考核,并发放教学效果评价调查问卷。结果研究组的出科考试成绩显著高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05);研究组对教学效果的满意度显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Seminar教学法在儿科临床实习教学中应用效果显著,可以增强学生的学习积极性及学习兴趣,值得推广应用。     

形成性评价在儿科临床实习教学中的应用

目的探讨形成性评价在儿科实习教学中的应用效果。方法选择2017年6月至2018年6月在我院儿科实习的128名医学生作为研究对象,按照所用教学方法分为观察组和对照组,每组46名。对照组采用传统授课法,观察组引入形成性评价。教学结束后,进行出科考试,发放调查问卷,比较两组教学效果。结果观察组出科考试成绩高于对照组,两组差异有显著性(P<0.05);观察组教学满意度高于对照组,两组差异有显著性(P<0.05)。结论形成性评价在儿科实习教学中的应用效果显著,可以提高学生学习积极性及学习兴趣,增强临床应用能力,值得推广。     

综合性医院门诊病人负性情绪影响因素调查

目的 探讨门诊就诊病人负性情绪的影响因素.方法 采用偶遇法对480例候诊病人进行了调查.结果 病人的性别、年龄、婚姻状况、学历、身体主观评价、已候诊时间均对情绪反应有影响,病人的身体主观评价越差者越容易产生负性情绪(P=0.020,OR=6.307);已候诊时间越长越容易出现负性情绪(P=0.046,OR=3.893).病人的职业对情绪不影响.结论 性别、年龄、婚姻、学历、身体主观评价、已候诊时间均为门诊病人候诊过程中负性情绪的影响因素,其中身体主观评价越差,已候诊时间越长者越容易出现负性情绪.     

男性骨特异性碱性磷酸酶、骨钙素、I型胶原氨基末端肽与骨密度的关系

目的探讨男性人群血清骨特异性碱性磷酸酶(BAP)、血清骨钙素(sOC)和血清Ⅰ型胶原氨基末端肽(sNTX)与BMD的相互关系。方法用ELISA方法测定309名20~80岁男性志愿者的血清骨特异性碱性磷酸酶(sBAP)、血清骨钙素(sOC)和血清Ⅰ型胶原氨基末端肽(sNTX),用DEXA(双能X线吸收法)测定腰椎正位(AP)L1-L4总体、腰椎侧位、股骨颈、Wards区(华氏区)及髋部总体的面积BMD。结果(1)直线相关分析显示,sOC、sNTX与腰椎正位总体BMD呈负相关,r分别为-0.007,-0.100。BAP与腰椎正位总体、腰椎侧位、髋部总体、股骨颈及Wards区BMD均负相关,r分别为-0.190、-0.087、-0.175、-0.128、-0.128(P<0.05)。(2)校正年龄、体重指数和吸烟的影响后,sOC和各部位BMD相关性消失;sNTX与腰椎正位总体BMD;BAP与腰椎正位总体、髋部总体、股骨颈及Wards区BMD相关性仍存在,r分别为-0.164、-0.171、-0.148、-0.191、-0.105(P<0.05)。(3)以50岁为切点,将所有样本按年龄分两段,偏相关分析显示50岁以前sOC、sNTX和BAP与各部位BMD无显著相关;50岁以后除腰椎侧位外,BAP与腰椎正位总体、髋部总体、股骨颈及Wards区BMD负相关,偏相关系数分别为-0.206、-0.256、-0.183、-0.126(P<0.05)。sOC与各部位BMD无显著相关,sNTX与腰椎正位总体显著负相关,偏相关系数为-0.202(P<0.05)。(4)按BMD分组,方差分析显示50岁以上年龄匹配男性骨质疏松组BAP高于正常对照组与低骨量组,NTX高于正常对照组(P<0.05)。(5)分别以各部位BMD为应变量,年龄、BMI、吸烟(每日吸烟数量×烟龄)、BAP、sOC和sNTX为自变量,进行多元逐步线性回归分析。年龄、体重指数为各部位BMD的独立决定因子;吸烟为腰椎正位总体、髋部总体及Wards区BMD的独立决定因子。BAP为腰椎正位总体,髋部总体,股骨颈及Wards区BMD的独立决定因子,解释其BMD变化的百分数分别为16.5%、18.0%、13.4%、10.8%。(P均<0.05);sNTX为腰椎正位总体BMD的独立决定因子,解释腰椎正位总体BMD变化的15.7%。结论(1)校正年龄、体重指数和吸烟后,50岁以上男性BAP与腰椎正位总体、髋部总体、股骨颈及Wards区BMD,sNTX与腰椎正位总体BMD均呈负相关,BAP与sNTX均为50岁以上男性BMD的独立决定因子。(2)50岁以上男性骨质疏松组BAP显著高于正常对照组与低骨量组,NTX高于正常对照组,较高的骨代谢转换水平与较低的BMD相关联。(3)年龄、体重指数与吸烟均为各部位BMD的独立影响因素。