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201.
目的 研究apelin及其受体APJ在人成骨细胞的表达和apelin对成骨细胞的作用。方法 RT-PCR和Western印迹法检测apelin和APJ在人成骨细胞的表达。用apelin处理人成骨细胞,^3H掺入法(^3H-TdR)和细胞计数法测定细胞的增殖,通过测定细胞内碱性磷酸酶(ALP)活性、骨钙素分泌水平和Ⅰ型胶原的生成来分析细胞功能。Western印迹法检测信号通路的激活。通过小分子干扰核糖核酸(siRNA)技术阻断APJ,观察其对细胞增殖和信号通路的影响。结果Apelin和APJ在人成骨细胞均有表达,Apelin能促进人成骨细胞增殖,但对其ALP活性、骨钙素的分泌和Ⅰ型胶原的生成无影响。通过siRNA技术阻断APJ能消除apelin对细胞增殖的促进作用。Apelin能诱导人成骨细胞磷脂酰肌醇3激酶(P13K)下游底物蛋白激酶B(Akt)的活化,但不能诱导c-junN一端激酶(JNK)、p38和细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)等丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的活化。siRNA干扰APJ对Akt的活化起抑制作用。P13K抑制剂(LY294002)能消除apelin对细胞增殖的促进作用和Akt的活化。结论 人成骨细胞表达apelin和APJ,Apelin通过APJ/P13K/Akt途径促进人成骨细胞增殖,但对其分化无影响。 相似文献
202.
背景: 护骨素是一种由成骨细胞表达的蛋白, 可抑制破骨细胞分化和活化。目的: 观察比较 17 β- 雌二醇与孕激素对人成骨细胞护骨素基因表达的调控作用。设计: 对比观察。单位: 中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所。材料: Ⅳ型胶原酶( Sigma 公司), 胎牛血清(Gibico 公司), MEM(Sigma公司), 骨钙素放射免疫法测定试剂盒(Dia2Sorin 公司)。方法: 实验于 2003- 01/2006- 03 在中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所完成。采用正常人髂前上棘松质骨进行成骨细胞的提取和培养, 人成骨细胞用 17β- 雌二醇与孕酮干预, 采用 Northern 杂交检测护骨素mRNA 表达及酶联免疫吸附法检测护骨素蛋白质表达。主要观察指标: ①人成骨细胞鉴定。②Northern 杂交分析 17β- 雌二醇、孕酮对人成骨细胞护骨素 mRNA 表达的影响。③酶联免疫吸附分析17β- 雌二醇、孕酮对人成骨细胞护骨素蛋白质分泌的影响。结果: ①人成骨细胞鉴定: 人成骨细胞分泌的碱性磷酸酶活性为(74.3±4.7) U/g; 培养上清液中骨钙素浓度为(3.84±0.39) μg/L。表明分离培养的人成骨细胞具有成骨细胞的特性。②Northern 杂交分析 17β- 雌二醇、孕酮对人成骨细胞护骨素 mRNA 表达的影响: 人成骨细胞对照组护骨素 mRNA 表达条带弱, 与对照组相比, 1×10-10, 1×10-9, 1×10-8 mol/L17β- 雌二醇干预组护骨素 mRNA 表达条带逐渐增强; 与 0 h 相比, 干预12, 24 及 48 h 护骨素 mRNA 表达逐渐增强; 孕酮对人成骨细胞护骨素mRNA表达无影响。③酶联免疫吸附分析 17β- 雌二醇、孕酮对人成骨细胞护骨素蛋白质分泌的影响: 与对照组比较, 1×10 -10, 1×10-9, 1×10-8 mol/L雌二醇组护骨素蛋白质分泌增加[(0.64 ±0.14), (1.27±0.26), (2.34±0.35),(3.62 ±0.23) μg/ L, P < 0.01]。与对照组相比, 1×10-8 mol/L 17β- 雌二醇干预 12, 24, 48 h, 护骨素蛋白质分泌增加[(0.62±0.12)比(1.30±0.30),(3.07±0.14), (3.50±0.33) μg/L, P < 0.01]。1×(10-10~10-8) mol/L 孕酮干预 12~48 h 对成骨细胞护骨素蛋白质表达无影响(P > 0.05)。结论:17β- 雌二醇促进人成骨细胞护骨素基因表达, 孕酮对其无影响,表明雌激素与孕激素对骨代谢有不同的调节机制。 相似文献
203.
204.
目的 通过对一中学校结核病疫情中得到的临床分离菌株进行全基因组测序和分析,确定其耐药、分型特征及传播特点,探讨全基因组测序技术在学校结核病疫情处置中的应用价值。方法 对2020年南充市一中学结核病疫情中得到的17株菌株进行全基因组测序,并使用结核分枝杆菌全基因组数据库分析平台SAM-TB对其菌型、耐药、分型特征进行分析,并结合患者信息分析其传播特点。结果 该学校结核病疫情得到的17株临床菌株,13株为结核分枝杆菌(Mycobacterium Tuberculosis,MTB),2株为脓肿分枝杆菌(Mycobacteroides abscessus),2株为支气管戈登氏菌(Gordonia bronchialis),13株MTB中12株属于L2.2.1,1株属于L4.5。L2.2.1谱系的12株菌株中10株为同一株菌,且来自于发生聚集性疫情的班级,由此确定该次疫情由此株菌传播引起。结论 该次学校结核病疫情是由谱系为L2.2.1的结核分枝杆菌引起的聚集性传播事件,全基因组测序技术在学校结核病疫情处置中具有确定传播链的重要作用。 相似文献
205.
目的 探讨慢性束缚应激(CRS)对小鼠海马星形胶质细胞表型转换及抑郁样行为的影响。方法 48只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组(control)、模型组(CRS)、氟西汀(FLX)药物干预组(CRS+FLX),每组各16只。慢性束缚应激3周建立抑郁小鼠模型,应激的第8天至第21天,CRS+FLX组于应激前30 min腹腔注射FLX(10 mg/kg),control组及CRS组注射等体积生理盐水。采用旷场实验以及糖水偏好实验检测各组小鼠行为变化;采用免疫组织化学法和Western blotting检测星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达;Real-time PCR检测海马A1和A2型星形胶质细胞标记物的表达。结果 与control组相比,CRS组小鼠表现出明显的抑郁样行为,包括糖水偏好百分比显著降低(P<0.0001),体重明显较低(P<0.05),旷场实验在中央区域活动的距离明显降低(P<0.0001),FLX干预可逆转CRS所诱导的抑郁样行为表现(P<0.05);与control组相比,CRS组小鼠海马星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白(... 相似文献