重组Akt腺病毒的构建及其在肝硬化大鼠肝脏中的表达

目的:探讨持续活化Akt且带有HA标签(myr-HA-Akt)基因的重组腺病毒在肝硬化大鼠肝脏中的表达特性。方法:酶切正向插入目的基因的真核表达载体pcDNA3.1-myr-HA-Akt,获得myr-HA-Akt cDNA后，将其定向克隆到穿梭质粒pDC316中,然后将重组质粒与病毒骨架质粒pBHGloxΔE1,3Cre共转染293 细胞,获得复制缺陷型重组腺病毒Ad-myr-HA-Akt,并进行扩增、纯化。通过观察腺病毒感染293细胞后是否出现细胞病变效应;PCR和基因测序方法对所构建病毒进行鉴定，并采用TCID50法检测病毒滴度。自尾静脉注射重组腺病毒Ad-myr-HA-Akt感染肝硬化模型大鼠。免疫印迹法检测大鼠肝组织内Akt 和p-Akt蛋白的表达。结果:感染的293 细胞出现明显的细胞病变效应，PCR产物电泳证实重组腺病毒的存在，基因测序证实myr-HA-Akt的cDNA正确插入穿梭质粒且与pBHGloxΔE1,3Cre正确同源重组;病毒滴度为5.5×1011 vp/mL。从蛋白水平证实感染病毒的肝硬化模型大鼠有外源性Akt基因的表达。结论:构建的重组腺病毒Ad-myr-HA-Akt能有效地感染肝硬化模型大鼠,并可在模型大鼠中正确转录和翻译，为进一步研究腺病毒介导的Akt基因对肝硬化的治疗奠定了实验基础。     

抗菌药物在严重烧伤病人中的应用

目的：探讨抗菌药物防治严重烧伤病人继发感染的合理方案，以指导临床用药。方法：对36例烧伤面积在50％TBSA以上深度烧伤患。在烧伤早期无明显感染前提下，预防性应用抗菌药物1周后停用，以后仅围手术期或在有明显感染时才再次使用。结果：36例病人无一例死亡，亦无一例发生发生真菌二重感染。结论：大面积烧伤后，中挡抗菌药物联合应用1周后停药，能有效的防治烧伤感染和避免二重感染。     

湿润烧伤膏治疗69例烧伤病人的临床报告

本文报告应用湿润烧伤膏治疗69例烧伤,最大面积80％,平均总面积18.25,伴有深Ⅱ度烧伤26例,最大面积33％,伴Ⅲ度烧伤22例,最大面积32.5％,成片的Ⅲ度烧伤脱痂后的肉芽创面均进行了植皮手术。5例中小面积因中途出院,另64例全部治愈。本文对应用烧伤湿润膏的适应症及主要优点进行了讨论。     

瘢痕内微循环的变化

目的探讨皮肤瘢痕从增生到萎缩成熟过程中组织内微循环的变化。方法采用免疫组织化学法检测烧伤创面肉芽组织、不同时期瘢痕组织和正常皮肤组织中CD34的表达，并根据CD34的表达进行血管计数，比较瘢痕浅、深层组织和不同时期瘢痕组织的血管数量、分布及形态的变化。结果各组浅、深层血管计数差异有统计学意义（P〈0．01），浅、深层血管计数，肉芽明显大于其他组（P〈0．01），1年内各组瘢痕大于1年后组瘢痕和正常皮肤组（P〈0．01）。表现为各组浅层微血管密度明显高于深层，随着皮肤瘢痕时间的增长，瘢痕组织内微血管数目逐渐减少，分布逐渐转变为有序，血管管腔通畅度逐渐增大。结论随着瘢痕时间的增长，瘢痕内微血管逐渐由新生态变为成熟态。瘢痕内正常微循环的形成可能有促进瘢痕成熟的作用。     

Nrf2因子在烫伤脓毒症大鼠免疫脏器中的表达

研究表明,核转录因子Nrf2是脓毒症中调节氧化应激的关键因子[1],对许多细胞因子和炎症介质基因均有特异性调控作用.本研究以烫伤合并金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌感染大鼠模拟烫伤脓毒症模型,观察Nrf2在烫伤脓毒症大鼠各免疫脏器组织中的表达并分析其可能机制.     

小鼠肿瘤坏死因子α启动子荧光素酶表达载体的构建及鉴定

目的 构建小鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)启动子荧光素酶表达载体.方法 利用PCR技术扩增小鼠TNF-α启动子序列,将其插入荧光素酶表达载体pGL3-basic中.将经过鉴定的重组载体pGL3-TNFα-promoter转染巨噬细胞264.7,应用萤光素酶检测系统检测其活性.结果 测序结果 表明,扩增的启动子序列正确.荧光素酶活性检测表明,pGL3-TNFα-promoter具启动荧光素酶基因表达的活性.结论 成功构建小鼠TNF-α启动子荧光素酶表达载体pGL3-TNFα-promoter,为进一步研究TNF-α奠定了物质基础.     

MicroRNA在调控物质代谢方面的作用

MicroRNA通过干预靶基因表达水平构建了复杂的调控网络,调控生命活动的进行.目前已发现microRNA广泛参与葡萄糖、脂类、氨基酸的代谢及生物氧化过程,在一些重要位点上发挥调控作用.在人体摄取和利用葡萄糖过程中,microRNA参与调控胰岛素分泌、胰岛素敏感性、细胞对葡萄糖摄取、细胞内糖酵解途径等,并可影响线粒体功能及有氧氧化.在脂类代谢中,microRNA作用于脂类合成、分解及转运相关的靶基因,调控体内脂类代谢.此外,microRNA还与谷氨酰胺异化代谢有关.     

汽车内火药爆炸烧伤的特点及其救治

目的:探讨公交车内火药爆炸致伤特点、救治方法及施治中的组织工作。方法:以2001年元月-2004年12月所救治的3大批46例汽车内火药爆炸烧伤为样本,分析受伤人员其成分构成、烧伤部位、烧伤深度、复合伤、并发症等特点及其急救治疗、创面处理和施治中的组织方法。结果:伤员以中小学生为主(69.57%):烧伤面积较大且较深(平均面积/Ⅲ度面积48.31±12.42%TBSA/25.30 6.83%TBSA):伤员几乎均含颜面部和双手烧伤;合并伤及复合伤多(65.22%):治愈45例(治愈率98%);创面愈合时间:浅Ⅱ度6-12天,深Ⅱ度16-26天,Ⅲ度24-36天,未发生明显功能障碍和过度瘢痕形成;其中5例较深部位经异体皮复合自体表皮干细胞移植,经免疫组化法对角蛋白19型细胞的检测和临床愈合过程观察,其结果令人满意。结论:①MEBT/MEBO作为成批伤员救治中创面处理的首选方法具有无可替代的作用:②以异体皮复合自体表皮干细胞移植于较深创面能加速创面的原位再生,进一步提高愈合质量:③公交车内火药爆炸烧伤其伤员多为社会特殊群体组成,且人员集中,伤势严重,社会影响大,医务人员工作量大。因此,做到严密组织和科学分工才能保障对突发事件中的大批伤员实施快捷高效的救治。     

皮肤软组织扩张术用于烧伤晚期瘢痕整形的疗效观察

目的研究皮肤软组织扩张术在烧伤晚期瘢痕整形中的应用效果。方法观察皮肤软组织扩张术用于烧伤晚期瘢痕整形中并发症的发生情况、扩张器的有效扩张率及手术后效果。结果本组44例97只扩张器,并发症的发生率为11.4%,96只扩张器达到扩张效果,扩张有效率为98.97%,手术效果满意。结论深度烧伤后引起的皮肤及周围组织器官的瘢痕畸形采用皮肤软组织扩张术能取到较好的效果。充分的术前准备、术中的细心操作、术后的仔细观察及及时处理能显著降低并发症的发生率及提高扩张器的有效扩张度。