Foxp3酵母双杂交诱饵表达载体的构建、鉴定和其毒性及自激活效应检测

目的利用酵母双杂交系统,构建人Foxp3酵母双杂交体系中的诱饵载体,并对其进行鉴定.方法获得正常人外周血 PBMC,抽提mRNA,通过巢式 RT-PCR 在人外周血PBMC中获得Foxp3基因片断,纯化后连接至 pMD18-T 载体,测序正确,EcoRⅠ、SalⅠ双酶切pMD18-T-Foxp3和酵母表达载体 pGBKT7,回收产物并连接,重组质粒命名为 pGBKT7-Foxp3,测序正确,用醋酸锂法将重组质粒转化酶母菌 AH109,在缺陷性培养基上观察pGBKT7-Foxp3 在AH109中的表达情况,检测诱饵载体有无毒性作用和自激活功能.结果 RT-PCR 扩增出的DNA 片段约1 203 bp,大小正确,与pMD18-T载体连接,测序正确.构建的诱饵载体pGBKT7-Foxp3,测序结果表明序列完全正确,融合区域的读码框正确.pGBKT7-Foxp3转化酵母感受态AH109,在SD/-Trp 板上生长良好,在SD/-Trp/X-α-Gal平板上长出白色菌落,在SD/-His/-Trp/X-α-Gal、SD/-Ade /-Trp/X-α-Gal平板上不能生长,说明AH109[pGBKT7-Foxp3]转化成功,对酵母菌株AH109不具有毒性且不具自主激活报告基因的功能.结论成功获得了在酵母细胞中正确表达,并对酵母细胞无毒性且未自主激活报告基因的诱饵表达载体pGBKT7-Foxp3,可作为酵母双杂合系统中的"诱饵", 为下一步利用酵母双杂交系统筛选Foxp3相互作用蛋白创造了条件.     

阻断PLC-γ1通路对TNF-α抑制胶质瘤细胞增殖并诱导其凋亡的影响

目的 探讨磷脂酶C-γ1（PLC-γ1）在肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导胶质瘤细胞凋亡中的作用。方法 应用PLC-γ1的特异性抑制剂U73122抑制SW0胶质瘤细胞PLC-γ1活性,用MTT法观察在阻断PLC-γ1通路前后,TNF-α对SWO胶质瘤细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪检测TNF-α诱导SWO胶质瘤细胞凋亡的情况;Western免疫印记法检测TNF-α是否激活caspase-3以及抑凋亡蛋白bcl-2表达的情况。结果 抑制PLC-γ1活性后,SWO胶质瘤细胞对低浓度TNF-α的敏感性显著增加。结论 阻断PLC-γ1通路本身虽不能直接启动凋亡,但却能增加SW0胶质瘤细胞对某些调亡因素（如TNF-α）的敏感性,其分子机制之一可能是下调抑凋亡基因bcl-2的表达。     

131I-rituximab对B细胞淋巴瘤细胞生物学效应的实验研究

目的 研究^131Ⅰ标记的rituximab对CD20高表达的B细胞淋巴瘤细胞的生物学效应,为放射免疫导向治疗提供实验依据。方法 IODO—GEN法将^131Ⅰ标记于抗CD20单抗rituximab,用AnnexinV—FITC／PI双染法检测^131Ⅰ-rituximab对Raji细胞的诱导凋亡作用,PI染色法检测细胞周期分布。结果 AnnexinV—FITC／PI双染法检测凋亡率：^131Ⅰ-rituximab组凋亡率为51．99％,^131Ⅰ组为42．71％．rituximab组为29．42％,对照组为26．17％。对照组和rituximab组凋亡率明显低于^131Ⅰ组和^131Ⅰ—rituximab组（P〈0．05）。PI染色法对比各组的凋亡率（亚二倍体峰）：^131ⅠI-rituximab组细胞凋亡率为4．32％,^131Ⅰ组为1．47％,rituximab组为1．39％,对照组仅0．37％,^131Ⅰ-rituximab组凋亡率明显高于其他各组（P〈0．05）。^131Ⅰ-rituximab组Raji细胞周期发生变化,细胞大部分被阻滞于G1／G2期。结论 ^131Ⅰ-rituximab能够调控Raji细胞的细胞周期并诱导其凋亡,从而抑制Raji细胞增殖。     

硬膜外腔吗啡对全髋置换术围手术期D-二聚体的影响

目的 研究阿片类药物硬膜外腔持续注射对全髋置换手术围术期D-二聚体的影响。方法选择40例择期全髋关节置换手术患者,随机分成两组。吗啡组：手术开始前15min于硬膜外腔给予吗啡4mg＋0．9％生理盐水10ml,术毕硬膜外腔吗啡80μg／h持续给药48h;对照组：术前15min给予0．9％生理盐水10ml,术毕硬膜外腔给予0．15％罗哌卡因2．0ml／h持续给药48h。分别于麻醉前5min、术毕、术后24h、术后48h4个时点抽取静脉血测定血浆IL-6、D-二聚体含量和凝血酶原时间。结果两组患者术毕、术后24、48h的IL-6、D-二聚体含量较麻醉前均显著升高（P〈0．01）,术毕时达到峰值,随后逐渐回落。吗啡组患者术毕、术后24、48h时间点IL-6、D-二聚体含量均显著低于对照组（P〈0．05）;硬膜外腔注射吗啡对围手术期凝血酶原时间和出血量均无明显影响。结论硬膜外腔注射吗啡可抑制凝血系统的过度激活．减少D-二聚体的生成,改善围术期高凝状态。     

鳖甲煎丸对 H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及对增殖细胞核抗原表达的影响

目的研究鳖甲煎丸对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及机制探讨。方法建立H22荷瘤小鼠动物模型,随机分成4组:鳖甲煎丸高剂量组、鳖甲煎丸低剂量组、阴性对照组、环磷酰胺组。连续用药15d。第15天处死小鼠,计算胸腺指数、脾指数;剥离瘤块称重并计算抑瘤率;用免疫组织化学方法检测各组荷瘤小鼠肿瘤组织的增殖细胞核抗原的表达强度。结果鳖甲煎丸有较好的抑瘤作用;鳖甲煎丸对H22荷瘤小鼠肿瘤组织的增殖细胞核抗原有显著的抑制作用。结论鳖甲煎丸抑瘤作用机制之一可能是通过抑制肿瘤组织的增殖细胞核抗原来实现的。     

云南省2016-2018年流行性感冒监测分析

目的 分析2016-2018年云南省流行性感冒(流感)监测结果,探讨云南省流感流行特征,为云南省流感防控提供科学依据.方法 利用描述流行病学方法,对2016-2018年云南省19个哨点医院监测到的流感样病例(influenza like illness,ILI)的流行病学特征、病毒分离鉴定结果、暴发疫情信息进行分析.结...     

前列地尔联合左卡尼汀对终末期糖尿病肾病患者血清Toll样受体-4、视黄醇结合蛋白及前白蛋白的影响

目的 分析前列地尔联合左卡尼汀对终末期糖尿病肾病(ESDN)血清Toll样受体-4(TLR-4)、视黄醇结合蛋白(RBP)及前白蛋白(PA)的影响.方法 回顾分析2017年1月—2019年10月我院收治的ESDN患者96例的临床资料,根据治疗方式不同分为对照组41例和观察组55例.对照组给予前列地尔,观察组在对照组基础...     

中医治疗骨创伤后期肢体肿胀临床效果分析

目的:研究中医治疗骨创伤后期肢体肿胀的临床效果。方法:选取四会市中医院2015年7月至2017年5月收治的106例骨创伤后期肢体肿胀患者,根据计算机随机法分两组,各53例,西医组采用西药进行治疗;中医组采用中医方法进行治疗。就两组患者肢体肿胀消退时间、住院时间和肢体肿胀治疗总有效率、治疗前后症状积分、患肢与健肢周径差进行比较。结果:中医组患者肢体肿胀消退时间、住院时间均明显短于西医组,差异具有统计学意义(P<0.05);中医组患者肢体肿胀治疗总有效率明显高于西医组,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗前两组患者症状积分、患肢与健肢周径差无显著差异,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后中医组患者症状积分、患肢与健肢周径差明显优于西医组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:中医治疗骨创伤后期肢体肿胀临床效果确切,可有效促进肿胀消退,改善患者临床症状,缩短住院时间。     

高频振荡通气治疗重症新生儿呼吸窘迫综合征的疗效分析

〔摘 要〕 目的：探讨高频振荡通气（HFOV）治疗重症新生儿呼吸窘迫综合征（RDS）的疗效及安全性。方法：纳入 2017 年 1 月至 2019 年 12 月入住厦门大学附属福州第二医院新生儿科的重症 RDS 新生儿 76 例,随机分为两组,观察组 39 例采用 HFOV 治疗,对照组 37 例常频机械通气（CMV）治疗,比较两组疗效及安全性。结果：机械通气 2 h、12 h、24 h、 48 h 后,两组患儿的氧分压（PaO2）均显著升高,且观察组均高于对照组;氧浓度分数（FiO2）升高、氧合指数（OI） 降低,且观察组变化大于对照组,差异均具有统计学意义（P ＜ 0.05）;观察组患儿的机械通气时间、氧疗时间及住院时 间均短于对照组,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）;观察组使用第二剂表面活性物质例数占比 5.13 %,低于对照组的 24.32 %,差异有统计学意义（P ＜ 0.05）;两组患儿的并发症发生率、存活率比较,差异均无统计学意义（P ＞ 0.05）。 结论：HFOV 治疗重症 RDS 患儿,患儿的血气指标有所改善,机械通气、氧疗及住院时间均有缩短,疗效确切,且存活率高, 并发症情况下降,该方法具备高安全性。     

眼针及体针联合西药治疗脑卒中后呃逆30例临床研究

目的:观察常规西药治疗基础上加用眼针结合体针治疗脑卒中后呃逆的临床疗效。方法:将60例脑卒中后呃逆患者随机分为治疗组和对照组,每组30例。2组均予阿司匹林肠溶片口服,治疗组联合眼针及体针治疗,对照组联合巴氯芬口服。2组均治疗10d为1个疗程。比较2组患者临床疗效及治疗前后呃逆伴随症状评分。结果:治疗组总有效率为86.7%,明显优于对照组的60.0%(P0.05)。治疗组治疗后睡眠、进食、焦虑症状评分及总分均较治疗前明显降低(P0.05),其中进食、焦虑症状评分及总分均明显低于对照组(P0.05)。结论:常规西药治疗基础上加用眼针结合体针治疗脑卒中后呃逆患者有效,能减少患者呃逆发病时间及发作次数,改善睡眠、进食、焦虑伴随症状,提高生活质量。