大鼠眼挫伤后视网膜BDNF及其受体TrkB的表达

目的 探讨眼挫伤后视网膜脑源性神经营养因子（BDNF）及其受体-酪氨酸蛋白激酶受体B（TrkB）的表达。方法 重击法致2个月龄SD雄性大鼠眼挫伤,伤后1、4、7、14d分别取材,冰冻切片,免疫组化检测BDNF和TrkB,并与正常同龄大鼠视网膜BDNF和TrkB相比较。结果 正常同龄大鼠视网膜有少量BDNF和TrkB表达;而挫伤眼,在伤后不同的时间有不同程度的BDNF和TrkB表达增加。结论 眼挫伤后视网膜BDNF和TrkB表达增加,说明BDNF和TrkB参与眼挫伤后视网膜的修复过程。     

基因治疗中非病毒载体的基因导入方法

随着基因治疗研究的深入,人们发现,基因治疗的关键是选择恰当的载体及导入方法,使目的基因获得靶向性导入,稳定有效的表达,可控性增强。目前用于基因治疗的载体有两种:病毒载体和非病毒载体。虽然基因治疗的临床实验研究多采用病毒载体,但是不同的病毒载体由于各自存在许多不足     

抑癌基因PTEN的研究新进展

PTEN是一种抑癌基因,与细胞骨架张力蛋白同源,其产物具有双磷酸酶活性——蛋白磷酸酶活性和脂质磷酸酶活性,是至今为止发现的第一个具有双磷酸酶活性的抑癌基因,结合到质膜上的PTEN可通过PIP,等途径来调节细胞信号转导和生长,并在肿瘤细胞浸润、血管发生以及肿瘤转移中起到一定的作用。     

基因工程IFNα_(2a)对肿瘤细胞生长的抑制作用

采用α－干扰素抑制各种肺癌细胞生长的MTT法。结果：不同品牌的10000,1000,100IU／ml的IFNα2a对人脑胶质瘤细胞（SHG—44）、人骨肉瘤细胞（HOS－8603）、人白血病细胞（HL－60）、红白血病细胞（K562）和淋巴瘤细胞（Raji）的生长抑制率分别为20％,10％,5％左右。结论：进口和国产的不同品牌IFNα2a。对上述5种肿瘤细胞株均有较明显的生长抑制效应,且抑制率相近。     

抑郁症与免疫功能的相关性

抑郁症属于情感性精神障碍,是指心境显著而持久的低落至少2周以上,并伴有相应思维和行为异常的疾病。该病常有反复发作倾向,缓解期病人精神状态基本正常。抑郁症是一种发病率较高的精神疾病,长期存在会对病人的生理、     

LIF基因修饰的ECV-304细胞对脐血造血细胞体外培养的影响

目的 观察经LIF基因修饰的ECV-304细胞对脐血造血干/祖细胞(HSC/HPC)体外培养的影响.方法 用脂质体转染法将pcDNA3.0-LIF真核表达质粒导入ECV-304人脐静脉内皮细胞,并通过G418筛选获得能稳定表达LIF的ECV-304转基因细胞.用LIF基因修饰的ECV-304细胞与脐血CD34 细胞共培养,检测培养前后CD54 细胞、CD34 CD54 细胞和CD34 CD62L 细胞数量的变化,观察转LIF基因的ECV-304细胞对脐血造血细胞的影响.结果 成功获得经LIF基因修饰的ECV-304转基因细胞,该细胞能支持脐血CD34 细胞的扩增,且能维持细胞表面与归巢有关的黏附分子的表达, 培养后CD34 CD54 和CD34 CD62L 细胞亚群数量显著增加.结论 经LIF基因修饰的ECV-304细胞可改善脐血造血细胞体外培养的微环境,有助于抑制HSC/HPC的分化并保持其归巢能力.     

脐血造血细胞体外扩增及在再生障碍性贫血治疗中的应用

目的：探索脐血造血细胞体外培养后生物学特性变化及输液后对再生障碍性贫血（AA）患者造血恢复和重建的影响。方法：将脐血造血细胞在多种细胞因子组合下体外培养，同时进行CD34＋细胞及粘附分子表达检测，3天后收集输液给用常规治疗方法无效的急，慢性AA患者共50例。结果：脐血造血细胞在体外培养3天后CD34＋细胞和粘附分子的表达均增加，输注后的治愈率达56％，总有效率88％，随访3－5天，50％以上患者已不再服用任何药物，各项血液指标均正常。结论：脐血造血细胞经恰当的体外培养后可明显提高CD＋细胞和粘附分子的表达及归髓能力，输液治疗AA具有良好的疗效，值得进一步尝试。     

热疗和顺铂对放射治疗人卵巢癌细胞的增强作用研究

目的观察热疗和顺铂对放射治疗的增强作用,以探索一种临床更为有效的肿瘤治疗方法。方法采用Ｘ线照射或后的人卵巢癌细胞Ａ２７８０－Ｓ（对顺铂敏感）和Ａ２７８０－ＣＰ（抗顺铂）用顺铂和热疗处理,观察两者对亚致死剂量辐射损伤修复（ＳＬＤＲ）的抑制作用。结果热疗（４０℃,１小时）或顺铂处理１小时均不能抑制这一修复,但两者联合应用则对两个细胞系均有明显效果。ＳＬＤＲ的受抑程度取决于处理的时机。对于抗顺铂的Ａ２７     

腺病毒介导的PTEN对A549肺癌细胞体内外生长的影响

目的：研究携带第10号染色体缺失的磷酸脂酶和张力蛋白同源基因（phosphatase and tensin homologue-deleted chromosome ten gene，PTEN）的腺病毒表达载体对A549肺癌细胞体内外生长的抑制作用。方法：从人外周血淋巴细胞中通过RT—PCR扩增出PTEN基因片段，将其克隆到pAdTrack—CMV转移载体上，构建了PTEN重组腺病毒载体。体外用MTT法检测Ad—PTEN对A549肺癌细胞生长的抑制作用，以流式细胞术检测肿瘤细胞的周期和凋亡率。建立荷瘤裸鼠模型，体内检测Ad—PTEN对A549肺癌细胞移植瘤生长的影响，以免疫组化法检测移植瘤中微血管密度。结果：克隆的P陋Ⅳ基因测序结果与基因Bank数据库完全相符。Ad—PTEN体外感染A549肺癌细胞48h后其凋亡率为10．5％，明显高于对照细胞；4d后细胞生长与对照组细胞相比抑制了57％。肺癌细胞移植瘤治疗结束时，Ad—PTEN组瘤重为（0．58±0．29）g，对照组瘤重为（1．42±0．24）g，其生长抑制达59％（P〈0．05）；同时移植瘤中微血管密度降低约49％（P〈0．05）。结论：成功构建的Ad—PTEN腺病毒载体能在体内外抑制A549肺癌细胞及其移植瘤的生长。     

选择肿瘤基因治疗策略的原则及研究进展

肿瘤的发生是极其复杂的,通常是由于某些原癌基因的异常激活、抑癌基因的失活以及凋亡相关基因的突变导致细胞恶性增生和凋亡失调的结果。针对肿瘤发生的遗传学背景,将外源性目的基因引入肿瘤细胞或其他体细胞内以纠正过度活化或补偿缺陷的基因,从而达到治疗肿瘤的目的,即为肿瘤的基因治疗。肿瘤基因治疗的策略大致可分为以下几种：（1）基因置换：就是用正常的基因原位替换病变细胞内的致病基因,使细胞内的DNA完全恢复正常状态。这种治疗方法最为理想,但目前由于技术原因尚难直接用于临床,多半是用于动物胚胎实验研究。（2）基因修复：是指将缺陷基因的突变碱基序列纠正,而正常序列予以保留。这种基因治疗方式最后也能使缺陷基因得到完全恢复,操作上要求高,技术难度大。上述两种基因治疗策略若用于人都有伦理学问题。（3）基因修饰：又称基因增补,或基因补充,即将目的基因导人缺陷细胞或其它细胞,使目的基因的表达产物能修饰缺陷细胞的功能或使原有的某些功能得以恢复或加强。在这种治疗方法中,缺陷基因仍然存在于细胞内,目前基因治疗大多采用这种方式。（4）基因失活：即利用核酶等反义技术及其RNAi技术能特异地封闭、阻断和干扰原癌基因异常表达,抑制一些有害基因表达的功能,以达到治疗疾病的目的。（5）免疫调节：将抗体、抗原或细胞因子等基因导人患者体内,改变患者免疫状态,达到预防和治疗疾病的目的。（6）其它：增加肿瘤细胞对放疗或化疗的敏感性,采用给予前体药物的方法减少化疗药物对正常细胞的损伤。根据不同肿瘤发病机制的不同,应采取上述后3种不同的治疗策略,归纳起来又可分为特异性和非特异性基因治疗策略。