不同功能状态滋养层对人胚胎生殖嵴干细胞生长作用的实验研究

目的筛选并建立高效胚胎干细胞滋养层体外培养的最佳条件,利于人胚胎生殖嵴原始生殖细胞（PGC）的增殖。方法分离培养孕14.5 d（E14.5 d）和新生0 d（P0）昆明小鼠原代胚胎成纤维细胞（MEF）并传代制备滋养层,以60Coγ射线照射后继续培养并接种人PGC。采用活细胞拒染法、免疫细胞化学染色,对比观察滋养层的生长活性和照射后分泌功能;采用碱性磷酸酶（AKP）染色技术鉴定人PGCs的生长状态。结果 （1）E14.5 d和P0来源的第3～5代MEF生长旺盛。P0来源第6代与E14.5 d来源同代MEF相比深染变形细胞增达32%,经60Coγ照射后衰老细胞明显增多（P〈0.05）。（2）E14.5 d来源第3～6代和P0来源第3～4代MEF经60Coγ照射后培养5 d时,Ⅰ型胶原蛋白免疫阳性细胞数目较多,染色较深;但P0来源第5代其阳性细胞数目明显减少,染色变浅。（3）人PGCs接种于E14.5 d第3代制备的滋养层3～4 d后见典型的ESC小克隆团,细胞呈圆形;AKP染色呈深蓝色团;而接种于P0来源第6代MEF制备的滋养层5～6 d,可见ESC克隆松散、变大,周围边界不清,细胞紊乱。结论以60Coγ射线照射小鼠E14.5 d来源第3～6代MEF是制备滋养层的最佳来源,可维持人PGCs增殖。     

肌源性干细胞治疗压力性尿失禁的实验研究

目的 探讨肌源性干细胞(muscle-derived stem cells,MDSCs)移植至压力性尿失禁(stress urinary incontinence,SUI)大鼠近端尿道后体内形态、分布以及尿动力学变化,为压力性尿失禁的干细胞移植治疗提供理论基础.方法 采用坐骨神经离断法建立压力性尿失禁模型,改良差速贴壁技术分离MDSCs,pEGFP-N1转染作标记,注射至SUI大鼠近端尿道.尿动力学仪检测MDSCs移植后1、2周的漏尿点压力(leak point pressure,LPP)和最大膀胱容量.显微镜观察MDSCs移植后1、3、7、10、14 d荧光细胞的形态和分布.结果 MDSCs移植后第7、14天,SUI大鼠的LPP均显著提高,移植后2周LPP显著高于移植后1周.在MDSCs移植后第1、3天,细胞保持小圆形和短梭形,局限于注射部位;第7天,一部分移植的MDSCs开始分化,分布范围扩大;第10天,一部分MDSCs分化为平滑肌细胞,部分死亡;第14天,一部分细胞分化为肌纤维,而其余细胞发生变性、死亡.结论 MDSCs移植后能存活并分化而整合至尿道括约肌,尿道括约肌功能得到改善,提示MDSCs移植可能是治疗压力性尿失禁的有效方法.     

“本科生知识论坛”是早期培养医学生科研创新能力的新模式

结合实践,介绍了本校组胚教研室连续开展了7届＂本科生知识论坛＂的实践和效果,指出论坛是早期培养医学生科研创新意识和创新能力的一种新模式。     

改良PBL教学法在组织学与胚胎学教学中的实践

PBL（Problem-Based Learning,以问题为基础的学习法）是目前国内正在迅速发展的一种新颖医学教育模式,但在我国和我校具体实施过程中尚存在一些问题。在组织学与胚胎学的教学中,我们对PBL教学方式进行了一些改良,让其适合我国国情和学校校情的方式,实践显示改良的PBL教学法锻炼了学生们综合能力,激发了学生们对基础医学的学习兴趣和热情,并且对学生创新性思维的培养起了较大的推动作用。     

BC023882基因克隆及其对细胞周期的影响

目的获得基因BC023882全长真核表达载体及检测该基因对培养细胞生长的影响.方法利用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)扩增基因BC023882的编码区序列,克隆到pcDNA3.1(-)/Myc-His( )/lac Z真核表达载体中,构建基因BC023882的真核表达载体;脂质体法转染小鼠胚胎成纤维细胞和COS-7细胞,并且通过细胞生长曲线测定和流式细胞仪观察该基因对细胞生长的影响.结果酶切并测序鉴定证明获得的重组子符合基因BC023882的编码序列;转染该基因后细胞增殖减慢,细胞增殖指数减低.结论成功构建了基因BC023882的真核表达载体,并且观察到该基因对细胞生长起到一定的抑制作用.     

氯乙烯诱导小鼠胚胎神经管发育畸形的研究

目的观察孕早期不同剂量氯乙烯(VC)染毒后胎鼠神经系统发育以及神经上皮细胞增殖和凋亡的变化情况,明确VC对神经系统发育的致畸作用。方法将孕鼠21只按完全随机设计分组法分为实验组和对照组,实验组分别用不同剂量的VC对孕6.5 d的小鼠进行腹腔染毒,对照组注射花生油,均于E12.5取胚胎。观察胎鼠的表观发育情况,计算胚胎畸形率以及神经系统异常的发生率。运用PCNA免疫组织化学技术和TUNEL染色技术检测并观察神经管上皮细胞的增殖及其凋亡的变化。结果①中剂量VC组胎鼠活胎率下降,活胎中畸胎发生率高达51%,其中神经管畸形发生率占40%,与正常对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);高剂量VC组胎鼠活胎率仅占55%,活胎中畸胎率明显增高占71%,其中神经管畸形发生率占50%,与正常对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。②中剂量和高剂量VC组胚胎神经管上皮厚薄不一致;高剂量组神经管多数呈明显未闭合状,神经管周围的间充质细胞肿胀,轮廓不清。③正常小鼠神经管神经上皮内可见PCNA阳性细胞与TUNEL阳性细胞分布;实验组各型阳性细胞分布与对照组相似,但随着染毒剂量的增加,PCNA阳性细胞表达减少,而TUNEL阳性细...     

胰腺发育学研究进展

1胰腺的解剖学特征 两种不同的组织构成：一是分泌酶类进入消化道的外分泌腺；二是分泌激素进入血液循环的内分泌腺。胰腺的外分泌部为小叶状多分支的复管泡状腺，成群分泌细胞组成腺泡。大部分消化酶类，包括蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和核酸酶，都是以无活性酶原的形式分泌，进入十二指肠后再被激活成为有活性的酶。胰腺的内分泌细胞分布于郎格汉斯胰岛内，胰岛为紧密的球团状组织，嵌于外分泌腺中。     

复方诃黄液治疗消化道出血98例疗效分析

我院自1984年4月至1991年3月采用自制复方诃黄液经内镜局部喷洒(53例)或口服(45例)治疗消化道出血,取得良好止血效果,现分析如下。一、药剂配制取诃子30克大黄30克枯矾30克加入水600毫升煎至300毫升过滤浓缩至200毫升加入防腐剂少许装瓶备用。     

胃康散治疗消化性溃疡138例临床观察

我院自1983年11月～1990年12月采用自制中药胃康散治疗消化性溃疡及慢性胃炎,疗效较好。现将资料较完整的138例消化性溃疡治疗效果小结如下。一、临床资料本组均为住院病例,临床上都有不同程度反复发作的上腹部疼痛病史、局部压痛体征。经本院纤维胃镜或X线钡餐检查证实为消化性     

四诊观察战伤489例瘀证表现

本文从四诊观察了489例战伤患者的受伤部位、面色、口唇、指甲、眼、舌质、脉象、声音、气味等,从中发现半数以上的伤员有一项或数项瘀证表现。部分病人给予活血化瘀治疗,亦取得了较好的效果。大部分患者随着外伤的好转、愈合,瘀证的表现亦随之减轻或消失。