全国活血化瘀会议内容简介

1982年12月11～15日在上海召开了中国中西医结合研究会活血化瘀专业委员会成立大会暨全国第一次学术会议。大会共收到各省、市、自治区报送的活血化瘀研究论文276篇。这些论文反映了近十年来我国在活血化瘀领域内中西医结合研究的进展,临床应用范围有所扩大,疗效有所提高,新的观察指标有所增多,在阐明血瘀症及活血化瘀治则的实质方面也有新的进展。现将大会资料综述如下:     

NT3基因的克隆、鉴定及高表达胚胎干细胞的构建与筛选

目的从小鼠肝脏组织中克隆神经营养因子NT3基因,在此基础上构建能稳定表达NT3的MESPU35细胞株.方法RT-PCR扩增目的基因,克隆入穿梭载体pExchange-1neo,酶切及测序鉴定.重组载体转染MESPU35胚胎干细胞株,G418长期筛选,RT-PCR检测转染细胞NT3水平.结果RT-PCR得到长度为777bp的基因片段,克隆后酶切鉴定正确,测序结果经BLAST对比,与GenBank中小鼠NT-3序列完全一致.成功构建了NT3真核表达载体及高表达细胞株.结论从小鼠肝脏组织中PCR克隆了正确的NT3基因,所获得的NT3稳定表达MESPU35-NT3细胞株为后续相关实验提供了保证.     

人胰腺干细胞的体外分离培养、鉴定和分化特性

目的：体外分离培养人胰腺干细胞，进行鉴定并初步观察其分化为胰岛内分泌细胞的能力。方法：用酶消化法从人胎儿胰腺分离胰腺干细胞，培养并传代，应用胰腺干细胞特异性标志物CK－19、胰岛β细胞特异性成分胰岛素和α细胞特异性成分胰高血糖素的抗体进行免疫细胞化学染色鉴定细胞种类和分化特性。结果：分离培养的人胎儿胰腺干细胞呈梭形，最初1周生长较慢，以后增殖较快，约培养3周后即可传代培养。传代细胞约生长2周即可再次传代，免疫细胞化学染色显示细胞呈CK－19免疫阳性反应。经诱导分化后，细胞形成类胰岛样组织，此时免疫细胞化学染色显示部分细胞呈随岛素免疫阳性反应，少数细胞呈胰高糖素免疫阳性反应。结论：人胰腺干细胞能在体外培养条件下快速增殖，并具有多向分化潜能，能分化形成胰岛β细胞和α细胞。     

体外培养神经干细胞分化为类胰岛样组织的研究

目的：观察体外培养的神经干细胞是否可以被诱导分化为类胰岛样组织。方法：体外培养神经干细胞，在胰岛素等外源性复合成分（ITS）诱导分化后，分别进行胰腺上皮干细胞特异性标志物CK－19、胰腺β细胞特异性成分胰岛素和胰腺α细胞特异性成分胰高糖素等的免疫细胞化学染色鉴定。结果：体外培养的神经干细胞经诱导分化3d后，在神经干细胞集落附近可见散在或成群分布的上皮样细胞，并呈CK－19免疫阳性反应。继续培养2－4周后，上皮样细胞增多，细胞圆形或呈鹅卵石样排列，进一步增生形成类胰岛样组织，其中大多数细胞呈胰岛素免疫反应阳性，少数细胞呈胰高糖素免疫反应阳性。结论：体外培养的神经干细胞具有向类胰岛样组织分化的潜能，它能分化为胰岛的α细胞和β细胞。     

昆明小鼠胰腺干细胞分离培养及特性鉴定

目的：分离培养昆明小鼠胰腺干细胞并进行鉴定和观察其分化胰岛细胞的能力。方法：用酶消化法分离生后不同时期昆明小鼠胰腺干细胞，用细胞角质蛋白19（Cytokeratin19,CK19）、胰岛素（Insulin）和胰高血糖素（Glucagon）抗体进行免疫细胞化学染色，鉴定细胞各类和分化特性。结果：分离初，可见少量上皮样细胞存活，更换含有生长因子的培养基后，可见细胞分裂增殖，呈长梭形，逐渐形成集落。传代后鉴定呈CK19阳性。高糖诱导分化后，细胞形成胰岛样结构，免疫细胞化学染色显示大部分细胞胰岛素阳性，少数细胞呈胰高血糖素阳性。结论：昆明小鼠胰腺干细胞能在体外培养条件下增殖，具有分化形成胰岛β细胞和α细胞的能力。     

胚胎干细胞与神经干细胞的神经分化

胚胎干细胞 (ES细胞 )是从哺乳类动物囊胚的内细胞群或原始生殖细胞分离经体外培养获得的具有发育全能性的细胞 ,能广泛地分化为各种组织细胞并能参与包括生殖系的嵌合体形成。已经证明维甲酸(RA)能诱导 ES细胞分化产生具有神经元和胶质细胞特性的细胞 ,大约 40 %～ 6 0 %的细胞显示神经元表型 ,其余许多细胞显示为星形胶质细胞。神经干细胞是指中枢神经系统中具有自我更新能力和多种分化潜能的特殊细胞群。它们不仅存在于发育的哺乳动物神经系统中 ,而且还存在于成年哺乳动物神经系统内 ,其中 ,位于侧脑室附近的室管膜下区和海马是目前…     

胰岛干细胞的体外培养和生长特性

无论是Ⅰ型还是Ⅱ型糖尿病 ,成功应用组织细胞移植进行治疗的主要障碍之一是能产生胰岛素的胰岛组织来源极其困难。传统观念认为胰岛 β细胞在出生后就不能新生 ,但近年的研究显示 ,胰腺通过胰岛 β细胞功能变化和细胞量的增加或减少来维持血糖浓度局限于一个狭窄的生理范围内。现在的观念认为 ,成年机体的胰岛管组织能在体外培养条件下快速增殖 ,并转变为具有多向分化潜能的胰岛干细胞 ,进而能分化形成胰岛 β细胞。最近 ,特别是在小鼠和人的胰岛干细胞的体外培养、生成分化方面取得了一些进展 ,本文简述了这一新技术及相关进展     

目标教学法在军护大专组胚教学中的初步实践

应用目标教学理论进行了军护大专组胚教学，着重于课堂目标的制定，实施和评估等，目标教学对教学具有导向作用，发挥了教学双方的积极性，有利于提高教学质量。     

运用多媒体课件讲授医学本科人体胚胎学

多媒体课件将图、结合在一起，并具有动态三维效果，可以将人体胚胎发生中连续、复杂的形态变化过程清晰地呈现出来。我们教研室制作了人体胚胎学的多媒体课件，并将其用于医学本科学员的人体胚胎学教学，通过教学评估表明该多媒体课件对人体胚胎学教学有很大帮助，在一定程度上促进了学员们对人体发生过程的认识和理解，提高了学员学习胚胎学的兴趣。