狗烧伤前后脂质过氧化物含量及超氧化物歧化酶活性的变化

许多实验研究和临床观察证实,氧自由基及其引发的脂质过氧化作用,在缺血——再灌流损伤中起着重要的致病作用。预先给动物超氧化物歧化酶(SOD)或别嘌呤醇,可不同程度地提高烧伤休克动物的存活率。而烧伤后体内脂质过氧化物(Lpo)含量增加,可导致组织细胞的损伤。由此说明,烧伤后的病理生理改变,可能伴有氧自由基的继发性损伤作用。本实验在于观察烧伤前后血清中Lpo含量及红细胞中SOD活性的变化规律,探讨烧伤后自由基的损伤作用。     

五联悉生大鼠的人工构建和肠道粘膜菌群分析

用五联菌人工接种无菌大鼠培育悉生大鼠,建立肠道粘膜菌群分析方法,检测各肠段微生态状况。实验结果表明,五联菌定植状态好,厌氧菌定植数量大,细菌无肠外易位,人工接种及微生态分析方法稳定,重复性好。     

碱性成纤维细胞生长因子加速慢性难愈合创面愈合

目的　观察碱性成纤维细胞生长因子（ｂ Ｆ Ｇ Ｆ）对慢性难愈合创面（溃疡）的促修复作用并探讨其促修复机制。方法　２８ 例共３３ 个慢性难愈合创面,其中创伤性溃疡１２ 例（１４ 个创面）,压迫性溃疡 ９ 例（１２ 个创面）,糖尿病溃疡 ４ 例,放射性溃疡 ３ 例。所有创面经清创后用ｂ Ｆ Ｇ Ｆ 治疗（１５０ Ｕ／ｃｍ ２ 创面,每天１ 次）。结果　所有经ｂ Ｆ Ｇ Ｆ治疗的创面都产生了明显的愈合,其中２ 周内愈合者２０ 个创面,３ 周内愈合者 ３ 个创面,４ 周内愈合者８ 个创面,超过４ 周愈合者２个创面。４ 周内总愈合率为９３．９％ 。结论　ｂ Ｆ Ｇ Ｆ可以显著地加速慢性难愈合创面愈合,其可能的机制涉及外源性ｂ Ｆ Ｇ Ｆ能够补充内源性ｂ Ｆ Ｇ Ｆ 的不足或调控内源性ｂ Ｆ Ｇ Ｆ活性。     

血清新喋呤与烧伤病人内毒素血症及脓毒症的关系

为探讨血清新喋呤与大面积烧伤后内毒素血症及脓毒症的关系，对３５例烧伤面积大于３０％（３０％～９８％）患者的血清新喋呤、血浆内毒素的变化进行了动态观察。结果表明，烧伤后第３天大多数患者新喋呤升高（Ｐ＜０．０５），但与烧伤面积无显著相关（Ｐ＞０．０５）。严重烧伤第２周以后内毒素血症患者新喋呤水平显著高于无内毒素血症患者（Ｐ＜０．０５～０．０１）。同时，伤后第１４，２１天内毒素血症患者的循环内毒素与新喋呤呈显著正相关（第１４天：ｒ＝０．３６８，Ｐ＜０．０５；第２１天：ｒ＝０．４３９，Ｐ＜０．０１）。在整个监测期间，脓毒症患者（１５例）血清新喋呤水平持续升高，伤后第１４，２８天与非脓毒症患者相比差异有显著或非常显著意义（Ｐ＜０．０５～０．０１）。提示烧伤可引起血清新喋呤升高，但与烧伤面积无关。烧伤后内毒素血症对新喋呤的不断产生可能有显著影响。血清新喋呤的持续升高与严重烧伤后脓毒症的发生与发展密切相关。     

不同胎龄胎儿皮肤和增生性瘢痕中细胞外信号调节激酶5及MAPKK基因表达的变化

目的　探讨细胞外信号调节激酶 5 (extracellular signalregulatedproteinkinase 5 ,ERK5 )及其上游信号分子MAPKK(MEK5 )在不同胎龄的胎儿皮肤和不同形成时期的增生性瘢痕中的基因表达变化规律。方法　用病理学技术检测不同发育时期的皮肤和增生性瘢痕的结构特征后 ,提取 18例不同胎龄 (13～ 32周 )的胎儿皮肤、6例少儿皮肤、16例不同发生时期的增生性瘢痕 (4个月～ 11年 )和 8例正常皮肤组织的总RNA后 ,用RT PCR方法检测ERK5和MEK5在不同组织中的表达变化特征。结果　随着胎龄的增加 ,胎儿皮肤中ERK5和MEK5基因表达水平逐渐降低 ;而在少儿皮肤中 ,基因的转录本含量明显减少 (P <0 0 5 )。在正常皮肤和不同形成时期的增生性瘢痕中 ,MEK5基因表达水平相近 ,而ERK5基因在正常皮肤中的表达水平较低 ,在增殖期和成熟期瘢痕中表达水平明显增强 (P <0 0 1)。结论　在早期妊娠胎儿皮肤中ERK5和MEK5基因的高表达可能是胎儿皮肤创面无瘢痕愈合的机制之一 ,而增生性瘢痕发生和形成也可能与这两种基因表达增强有关。     

选择性脱细胞猪皮研制及早期临床应用

目的介绍选择性脱细胞猪皮覆盖大面积烧伤早期创面的研制方法及临床应用效果. 方法 2001年1月～2002年5月,对1例深Ⅱ度15%、Ⅲ度25%烧伤患者的右前臂和右小腿,行选择性脱细胞中厚猪皮早期覆盖.戊二醛交联后表皮面黏贴于容器,边缘包埋.在含0.25%胰酶的PBS液中37℃消化2小时,去污剂处理24小时后,漂洗备用.将处理后猪皮应用于1例切削痂自体微粒植皮创面覆盖约2%,大体和光镜观察其功能和外观恢复情况. 结果组织学观察见表皮层基本完整,真皮内无细胞.初步临床观察显示,选择性脱细胞猪皮的真皮可在创基成活,失活表皮可被宿主自体表皮替代. 结论选择性脱细胞猪皮有望替代现有材料用于大面积烧伤切削痂创面的早期覆盖.     

烫伤大鼠细胞免疫抑制与肠源性内毒素血症的关系

采用大鼠40%TBSAⅢ度烫伤模型,将动物随机分成烫伤对照组和选择性消化道脱污染(SI)D)防治组,探讨烫伤大鼠全身性细胞免疫抑制与肠源性内毒素血症的关系。结果显示,大鼠40%Ⅲ度烫伤后睥细胞对促有丝分裂原增殖应答反应、诱生白介素-2(IL-2)活性及 T 细胞亚群(Th/Ts)比值明显下降。预防性进行 SDD 动物,内毒素血症发生率显著降低,脾细胞增殖应答反应和 IL-2活性的诱生能力均明显恢复(P0.05)。提示烫伤所致肠道细菌/内毒素移位可能与诱发机体细胞免疫功能异常密切相关。SDD 预处理可防止动物细菌/内毒素移位,从而减轻创伤后的免疫抑制。     

高迁移率族蛋白B1诱导小鼠腹腔巨噬细胞凋亡的受体机制

目的 了解高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对小鼠腹腔巨噬细胞凋亡的影响及其受体机制.方法 分离培养小鼠腹腔巨噬细胞,在巨噬细胞中加入不同的刺激物,分为HMGB1组:加入10 μg/ml的HMGB1;HMGB1+抗晚期糖基化终末产物受体(RAGE)组:先加入RAGE多克隆抗体5μg/ml孵育2 h后,再加入HMGB1;HMGB1+重组鼠(rm)RAGE/Fc组:将10 μg/ml的HMGB1与10μg/ml的rmRAGE/Fc混合作用2 h后,再加入巨噬细胞;对照组:加入磷酸盐缓冲液.采用流式细胞仪检测细胞表面RAGE的表达强度.激光共聚焦显微镜观察细胞凋亡情况,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 HMGB1组RAGE阳性细胞率(54±12)%明显高于对照组[(13±5)%,P＜0.01],其荧光强度(126±10)也显著高于对照组(34±8,P＜0.01).HMGB1+rmRAGE/Fc组、HMGB1+抗RAGE组凋亡细胞明显多于对照组,而HMGB1组晚期凋亡及坏死细胞明显多于其他3组.HMGB1组细胞凋亡率(39.5±2.3)%高于HMGB1+rmRAGE/Fc组[(17.3±3.6)%]、HMGB1+抗RAGE组[(14.8±4.8)%]及对照组[(5.4±2.3)%,P＜0.01].结论 HMGB1可诱导RAGE表达上调,RAGE是HMGB1诱导巨噬细胞凋亡的主要受体之一.     

高迁移率族蛋白B1诱导小鼠腹腔巨噬细胞凋亡

目的观察高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对小鼠腹腔巨噬细胞凋亡的影响。方法分离培养小鼠腹腔巨噬细胞,经不同浓度的HMGB1(10、100、1000、10000ng/ml)作用24h,或以10000ng/ml的HMGB1作用不同时间(6、12、24、48h)后,以连接素Ⅴ/放线菌素D双染法,采用流式细胞术和激光扫描共聚焦显微镜检测巨噬细胞凋亡情况。结果经不同浓度的HMGB1刺激24h,其中10000ng/ml组HMGB1诱导巨噬细胞凋亡的作用最强,为(39.84±5.98)%,与对照组(4.49±1.72)%比较,差异具有显著性(P<0.01)。以10000ng/ml的HMGB1作用巨噬细胞不同时间,其中24h组凋亡率发生最高,为(38.30±6.95)%,显著高于对照组(P<0.01)。结论HMGB1可诱导小鼠腹腔巨噬细胞凋亡。     

高迁移率族蛋白B1的组织损伤效应及其干预途径

高迁移率族蛋白B1(HMGB1)是严重感染所致脓毒症的重要晚期介质,参与了包括肺脏、肝脏、肠道在内的多器官损害过程。采用HMGB1中和抗体或特异性拮抗剂抑制其分泌(丙酮酸乙酯、α7烟碱乙酰胆碱受体激动剂)或下调其基因表达(正丁酸钠、信号通路抑制剂)的干预方法有助于减轻组织损伤效应,并可能为严重脓毒症的防治开辟新途径。