持续性压力培养环境对兔骨髓基质干细胞增殖的影响

背景：骨髓基质干细胞来源的成骨细胞是骨髓腔内主要的受力细胞,在人工关节置换病例中,其生命活动状况与假体传导压力有密切关系。 目的：观察持续性压力培养环境对兔骨髓基质干细胞增殖的影响,揭示持续压力致假体松动下沉进展及其置换后活动影响的生物学机制。 设计、时间及地点：随机分组设计,细胞学体外观察,于2004-02/2007-10在解放军第四军医大学骨科研究所完成。 材料：出生1个月的新西兰幼兔1只,体质量0.5 kg,取其骨髓基质干细胞用于实验。 方法：传代培养兔骨髓基质干细胞,将生长良好的第3代骨髓基质干细胞按1×104个/孔随机接种于7块24孔培养板,14 h后细胞完全贴壁,换新鲜含体积分数为10%胎牛血清的DMEM。实验随机将4块培养板分为4组：对照组不予加压,20 kPa持续压力组,60 kPa持续压力组,100 kPa持续压力组分别在规定的时间内每天施以20,60,100 kPa的持续3 h压力。 主要观察指标：四甲基偶氮唑盐法检测培养1,3,5,7 d各组骨髓基质干细胞的吸光度值变化。 结果：除培养第1天外,第3,5,7天各压力组骨髓基质干细胞的吸光度值均低于对照组(P < 0.01)。其中第3天20 kPa持续压力组与60 kPa持续压力组吸光度值差异无显著性意义(P > 0.05),但均高于100 kPa持续压力组(P < 0.05)。第5天不同持续压力组吸光度值两两比较差异具有显著性意义(P < 0.05),压力越高,吸光度值越低。第7天100 kPa持续压力组吸光度值低于压力20 kPa持续压力组(P < 0.05)。 结论：关节置换后早期患者不宜过早下地,否则将产生持续性应力,可以引起骨髓腔内骨髓基质干细胞的抑止,从而不利于骨质愈合,容易产生假体下沉和松动。     

医院船手术人员锐器伤发生现状的调查

目的了解医院船手术人员锐器伤的发生现状并分析原因,为采取有针对性的防治措施提供依据。方法采用自行设计的《医疗锐器伤登记表》对2009-2011年参加各种海上遂行保障任务的医院船手术人员进行调查。结果参加各种海上遂行保障任务的120名医院船手术人员中,发生锐器伤61名,占50.83%;锐器伤的类型主要有针刺伤、刀片划伤、安瓿割伤及注射针头刺伤4种,发生时段主要集中在手术操作中、术后整理物品和处理废弃物过程中。结论应提高医院船手术人员的防护意识,规范其操作行为,提高医院船的救治能力。     

rhBMP-2/卵磷脂复合材料修复犬长骨节段性骨缺损的实验研究

目的：观察rhBMP-2／卵磷脂复合材料修复犬长骨节段性骨缺损的能力，检验rhBMP-2的诱导成骨活性，方法：手术造成20mm桡骨中上段骨缺损，实验组植入rhBMP-2／卵磷脂的复合材料片，对照组植入单纯卵磷脂片，通过影像学、组织学观察及骨密度测定，评价rhBMP-2／卵磷脂复合材料修复犬长骨节段性骨缺损的效果，结果：影像学检查示实验组术12周骨痂桥接缺损，术后24周皮质骨连接；对照组无骨痂形成，组织学检查示实验组术后12周组织和肌组织充填，骨密度测定示术后12周骨痂密度达到正常值的76％，24周达正常值的85％，结论：rhBMP-2具有良好的诱导成骨活性，rhBMP-2／卵磷脂复合材料能够很好的修复犬桡骨20mm的骨缺损。     

兔脂肪干细胞的分离培养鉴定及成骨诱导分化研究

[目的]探讨在成骨诱导条件下兔脂肪干细胞的体外诱导分化情况：[方法]取3个月龄日本大耳白兔颈背部皮下脂肪，用Ⅰ型胶原酶消化获得细胞。Stro-1免疫细胞化学染色鉴定细胞性质；加入成骨诱导液后依次进行形态学、Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶及钙盐沉积相关检测。[结果]（1）原代所获细胞Stro—1表达阳性？（2）在诱导条件下，Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶及钙盐沉积均呈阳性表达。[结论]脂肪干细胞来源广、易获取、对机体创伤小，与骨髓间充质干细胞类似，经体外诱导后可实现成骨分化，为骨组织工程提供了一种新的种子细胞：     

骨髓基质细胞与两种不同载体材料生物相容性的实验研究

目的 :采用体外细胞培养法对 2种不同生物材料 (胶原海绵和PLGA )的生物相容性进行研究 ,探讨它们作为软骨组织工程载体材料的可行性。方法 :取 2个月龄新西兰兔 ,麻醉后在无菌条件下自双侧股骨粗隆处用 16号穿刺针抽取骨髓 4～ 6ml,用D -Hanks液洗涤离心 2遍 ( 10 0 0rpm× 10min) ,悬浮于含 10 %FBS的DMEM培养液中 ,行原代及传代培养 ,将传代细胞以 1 5× 10 4/孔定量接种于 2 4孔培养板 ,每孔加DMEM培养液 1ml。实验分为 3组 ,即PLGA组、胶原海绵组和对照组 ,其中PLGA组、胶原海绵组分别加入直径 5mm ,厚度 2mm大小的材料 ,对照组单纯接种细胞 ,于不同时间进行处理 ,用于相差显微镜及扫描电镜观察 ,绘制生长曲线 ,流式细胞仪检测。结果 :骨髓基质细胞可以在胶原海绵和PLGA周围生长 ,逐渐粘附 ,并在其表面连接成片 ,分泌细胞外基质 ;对照组与实验组、各实验组之间生长曲线相近 ,统计学分析无显著性差异 ;流式细胞仪 (FCM )检测发现 2种材料对细胞周期无影响 ,未发现异倍体细胞。结论 :胶原海绵和PLGA对兔MSC的形态学、细胞生长增殖、细胞周期、DNA含量及倍体水平均无影响 ,2种生物材料具有良好的生物相容性 ,可作为软骨组织工程的载体材料安全应用。     

骨生长相关因子对兔骨膜细胞生长分化的量效作用

目的　研究地塞米松 (dexamethasone)、重组人碱性成纤维细胞生长因子 (recombinanthumanbasicfibroblastgrowthfator,rhFGF)、重组人骨形态发生蛋白 -2 (recombinanthumanbonemorpho geneticprotein -2 ,rhBMP -2 )三种骨生长相关因子对兔骨膜细胞生长及分化的量效作用 ,为其在骨组织工程中的应用提供实验基础。　方法　体外分离培养兔骨膜细胞 ,分别与终浓度为 10 - 8,10 - 7,10 - 6 mol/L的地塞米松 ;终浓度为 50 ,2 0 0 ,50 0ng/ml的rhFGF ;终浓度为 50 ,50 0 ,10 0 0ng/ml的rhBMP -2共培养。分别于 4,7d后终止培养并测定细胞生长及分化指标。　结果 10 - 6 mol/L地塞米松显著抑制细胞蛋白合成 ,且对骨膜细胞碱性磷酸酶 (alkalinephosphatase ,ALP)表达无明显影响。各浓度组rhFGF显著促进了细胞蛋白合成量 ,而表现出明显的ALP活性抑制。各浓度组rhBMP -2对细胞增殖无明显影响 ;50ng/ml的rhBMP -2不影响骨膜细胞的ALP活性 ;当浓度增加到 50 0ng/ml与 10 0 0ng/ml时 ,ALP活性显著增加 (P <0 .0 1)。　结论　rhBMP -2在不影响骨膜细胞增殖的前提下 ,适当的浓度能够显著促进骨膜细胞向成骨细胞转化 ,在骨组织工程的研究中有重要的应用价值     

永生化人骨髓基质干细胞株MSCxj的转化特征

我们通过转染外源性人端粒酶催化亚单位(hTERT)基因建立永生化人骨髓基质干细胞株MSCxj[1].我们已报告了MSCxj细胞形态学和生长增殖等两个方面的生物学特征[2].本实验旨在观察该细胞株是否具有其他转化特征.     

护理技术强化训练对训练者身心不良影响的分析及预防

笔报道护理技术训练常见损伤情况如失眠，头痛，月经不调，手指外伤，肌肉劳损等，并分析其原因有外部因素和内在因素，为防止不良反应的发生，提出预防措施有；合理安排训练项目及时限；培养良好的心理素质和身体素质；科学训练，及时进行心理疏导，以充分发挥技术竞赛的促进作用。     

转化生长因子明胶微球制备及体外缓释研究

目的: 研制转化生长因子β1 (TGFβ1 ) 缓释明胶微球, 探索将微球药物控释系统引入组织工程学领域的可行性。方法: 采用改良的双相乳化冷凝聚合法制备明胶微球, 将其与TGFβ1 复合, 观察微球分散度、粒径及外观形态; 计算微球包封率、载药率及体外释药特性;分别使用缓释微球、诱导液 (含TGFβ1 4. 5ng/ml) 诱导兔骨髓间充质干细胞 (MSCs) 6d, 免疫组化检测Ⅱ型胶原、S 100蛋白表达。结果: 微球大小均匀, 平均直径 ( 15. 1±3. 4 )μ, 载药量为 900ng/g, 包封率为90. 0%, 体外 7d内药物缓释 92%; 缓释微球可持续释放具有生物活性的TGFβ1 诱导MSCs, 6d后细胞Ⅱ型胶原、S 100蛋白免疫组化染色阳性, 而诱导液组Ⅱ型胶原、S 100蛋白免疫组化染色阴性。结论: TGFβ1 明胶微球具有良好的药物缓释功能, 体外可持续诱导MSCs向软骨细胞分化, 维持细胞表型。为软骨组织工程中生长因子能够持续高效发挥作用提供一种新途径。     

胶原杂化去抗原松质骨载体复合自体间充质干细胞修复骨软骨缺损

目的制备胶原杂化去抗原松质骨载体并复合自体间充质干细胞修复关节骨软骨缺损。方法脱脂、脱蛋白和脱钙的方法来制备去抗原松质骨载体，酸解-酶解法制备胶原进而杂化松质骨载体。扩增间充质干细胞，接种到胶原杂化松质骨载体，植入左膝关节（实验侧），右膝关节植入没有复合细胞的胶原杂化去抗原松质骨载体（对照侧），在第6、12、24、48周时结合Pineda评分观察实验侧和对照侧的骨软骨缺损的组织修复情况。结果实验侧自12周时出现初步的软骨表型，24周时最为明显，48周有部分退变；软骨下骨部分逐渐恢复。对照侧软骨缺损一直以纤维组织充填，软骨下骨有部分恢复。上述各时间点实验侧和对照侧的Pineda评分为16．600±0．966。17．600±0．699（6周）；6．600±0．843、14．800±0．789（12周）；3．300±0．483、13．600±0．843（24周）；3．500±0．527、14．100±0．876（48周），差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论胶原杂化的去抗原松质骨载体复合自体间充质干细胞能够修复关节的骨软骨缺损。