牛去抗原松质骨载体的生物相容性研究

目的：用胶原修饰松质骨载体表面，增加其生物相容性。方法：新鲜牛松质骨经脱指、H2O2浸渍及部分脱钙处理，制成去抗原牛松质骨载体(MBC)，载体表面经胶原处理后，将体外培养的兔骨膜成骨细胞复合在其表面，分别于4d、10d和21d取材，行扫描电镜观察，比较对照组。结果：4d后，松质骨面及孔内即有了细胞粘附生长,21d全部长满，有胶原纤维形成；对照组细胞没有长满。结论：以MBC作为载体，其表面经胶原处理后与成骨细胞有更好的生物相容性。     

腺病毒介导人VEGF_(165)和ANG-1双基因转染大鼠BMSCs及对其增殖的影响

[目的]探讨携带人血管内皮细胞生长因子165(VEGF165)和血管生成素-1(ANG-1)双基因的腺病毒表达载体pAd-VIA转染大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)的体外表达及对BMSCs增殖的影响。[方法]将本室构建的编码人VEGF165和ANG-1双基因的腺病毒质粒pAd-VIA在QBI-293A细胞内进行包装和扩增,体外转染大鼠BMSCs,通过绿色荧光蛋白(GFP)表达、Western-blotting、酶联免疫吸附分析(ELISA)方法检测外源基因的表达,利用MTT法检测MOI(multiplicity of infection)=50、100、200、400 pfu/cell不同浓度腺病毒转染后对BMSCs增殖活性的影响。[结果]重组腺病毒质粒pAd-VIA在QBI-293A细胞内成功包装和扩增,体外转染BMSCs后,有大量的GFP表达,Western-blotting检测显示,转染组与VEGF165和ANG-1抗体结合,在45 KD和14.4 KD左右出现印迹条带;ELISA结果显示:转染组第1、2、3 d,上清中的VEGF165浓度和ANG-1浓度持续增加,未转染组均未检测到外源基因的表达,差异...     

老年骨质疏松合并颈椎病患者颈椎椎体骨吸收的扫描电镜观察

目的：对老年骨质疏松颈椎椎体小梁经制备行扫描电镜检查,观察骨小染的骨吸收发生机制,方法：收集8例因老年骨质疏松合并颈椎病而行颈前路椎体钻洞减压植骨手术老年患（平均年龄55岁）的颈椎椎体,同年轻成年人的颈椎椎体骨小梁相比,结果：老年骨质疏松患的柱状骨小染椎椎体骨小梁相比,结果：才年为骨小兴的变细,穿孔,圆形,狭长卵圆或梭形的吸收陷窝,陷窝的大小,深浅及内容物都不一致,陷窝四周原来具完整胶原纤维层的静止骨面也先后出现骨吸收,骨吸收过程中,无机盐可以行吸收,殖粗糙不规则的胶原纤丝,骨形成现象较少见到,说明在老年梁异常改建是以不断增多的吸收陷窝导致骨小梁穿孔,变细,吸收其至消失完成的,是造成椎体变形的主要原因。     

平时突发事故大批伤病员的院前急救与护理

目的探讨平时突发事故大批伤病员院前急救疗效,提高有效的救护水平。方法在2004-01/2008-12月期间,全组经院前抢救伤病员203批次,伤病员1837例。对有关伤病员进行分类,心、肺、脑复苏,急救手术、并发症的防治和快速后送。结果本组伤病员1837例,存活1720例（94%）,死亡117例（6%）。在死亡病人中,死于院前47例（40%）;死于伤后24h以内73例（62%）;死于创伤115例（98%）,死于热射病2例（2%）。结论平时突发事故大批伤病员的主要特点是因伤多、伤病员数量多、病情重和诊断难度大的特点。快速、高效的现场急救,全面、细致、早期、准确的院前救护处理,是提高平时突发事故大批伤病员抢救成功率的关键。     

海上救护重症伤病员护理记录单的设计

海上救护重症伤病员护理记录是护理工作的重要内容.是反映其伤情变化的客观资料,同时也是重症伤病员后续救治的重要依据.目前,有关海上救护危重伤病员护理记录单的书写与规范,在文献中尚无报道.为适应未来海上救护工作需要,及时、客观、准确地记录重症伤病员的护理过程,使其得到全面救治,减少死亡率和伤残率[1],笔者参考了张恩华等[2]研究报道的未来海战中医院船重伤员72 h直接护理项目,结合海上作战伤病员伤情特点及护理工作实际,设计了海上救护重症伤病员护理记录单,现报告如下.     

结肠肠管不同区域对热耐受性差异的研究

目的 :观察正常结肠肠管不同区域对热耐受性的差异。方法 :用腺体计数法来测定加热后结肠肠管不同区域的腺体数。结果 :在加热 43℃、30min时 ,肠管的左右侧和系膜对侧的腺体数与对照组比较差异非常显著 (P <0 .0 1)。而肠管系膜侧的腺体数加热到 44℃、30min时才与对照组有差异。另外 ,在 43℃和 44℃温度组 ,肠管左右侧和系膜对侧的腺体数丢失明显比系膜侧严重 (P <0 .0 1)。结论 :结肠左右侧和系膜对侧对热的耐受性明显比系膜侧差。对于这种差异 ,提示可能是结肠肠管不同区域的血供差异造成     

重组人骨形态发生蛋白-2诱导脂肪成体干细胞成异位软骨的研究

目的探索重组人骨形态发生蛋白-2（rhBMP-2）诱导脂肪成体干细胞异位软骨的生成能力。方法将获取的兔脂肪组织机械分割，通过Ⅰ型胶原酶消化后得到脂肪成体干细胞。经rhBMP-2诱导培养14d的脂肪成体干细胞微球种植在BALB／C裸鼠肌袋内。术后4、8周各处死2只动物，取材固定、脱钙、包埋后切片染色。镜下观察。结果经过rhBMP-2连续诱导培养14d的脂肪成体干细胞已具有软骨细胞的表型（细胞基质中富含蛋白多糖和Ⅱ型胶原），并不向成骨方向分化（Von kossa染色阴性）。术后4、8周有软骨细胞形成。结论rhBMP-2具有诱导脂肪成体干细胞向软骨细胞分化的潜能。     

明胶-硫酸软骨素-透明质酸钠作为组织工程软骨支架的实验研究

目的探索明胶-硫酸软骨素-透明质酸钠多孔支架的制备方法和其作为组织工程软骨支架的可行性。方法光镜和扫描电镜观察-20℃、-80℃及液氮条件下冷冻抽真空干燥制备的明胶-硫酸软骨素-透明质酸钠支架的孔径、孔隙率、交通孔和密度;测定不同条件制备的支架材料与正常软骨的压缩载荷-形变曲线;分离、扩增兔骨髓基质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs),接种于不同条件制备的支架材料上培养,MTT检测MSCs在支架上的黏附率及多孔支架对细胞增殖功能的影响。结果在-20℃、-80℃及液氮条件下制备的支架材料具有疏松多孔结构,孔径依次为300±45μm、230±30μm和45±10μm,孔隙率为81%、79%和56%,密度为9.41±0.25μg/mm3、11.50±0.36μg/mm3和29.50±0.61μg/mm3;-80℃和液氮条件下制备的支架材料,力学强度接近于正常软骨;MTT测得细胞在-20℃、-80℃及液氮条件下制备的支架材料,黏附率分别为85.0%、87.5%和56.3%;可轻度促进MSCs增殖。结论-80℃条件下抽真空干燥制备的明胶-硫酸软骨素-透明质酸钠多孔支架,具有良好的孔径、孔隙率和抗压缩载荷能力,与MSCs具有较好的相容性,是软骨组织工程中的一种新型仿生支架材料。     

基因胜肽胶的促骨髓间充质干细胞粘附作用

目的：了解PLGA经基因胜肽胶修饰后的促进骨髓间充质干细胞(MSC)粘附作用。方法：抽取成年兔骨髓，以密度梯度离心法获得间充质干细胞，置含10％小牛血清RPMI 1640培养基培养。取第3代MSC，分别接种于4块6孔培养板，其中8孔预先放入包被PLGA膜的盖玻片作为对照组，8孔放入包被经基因胜肽胶处理的PLGA膜的盖玻片为实验组，剩余8孔放入不做任何处理的盖玻片为空白对照组。分别于不同时间点检测细胞数，分析细胞的粘附情况。并采用免疫荧光技术观察细胞形态。结果：结果显示基因胜肽胶能明显促进MSC在高分子材料上的粘附。6h和8h时间点与对照组相比，有非常显著差异(P＜0．01)。免疫荧光染色照片显示，实验组细胞以铺展型为主，对照组细胞明显皱缩。结论：基因胜肽胶能促进MSC在高分子材料上的粘附。     

改良组织块混合酶消化法成骨样细胞培养

目的应用组织块与混合酶消化联合使用进行大鼠颅骨成骨细胞体外培养.方法取新生2～3 d的SD大鼠颅骨剪碎依次用不同浓度的胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶混合分2次对颅骨进行消化.纯化、接种后进行原代和传代培养并对细胞进行鉴定.结果原代培养的细胞ALP染色阳性区域可以达90%以上,传代培养后细胞阳性率为100%.18 d左右有钙结节形成.电镜观察示细胞表面有微绒毛,粗面内质网丰富.原代培养细胞BMP免疫组化呈弱阳性表达,传代培养后细胞BMP表达逐渐增强,以第5代左右细胞表达强度最高.结论改良组织块混合酶消化法成骨细胞培养具有细胞成分单一、表型稳定的特点.可为成骨细胞的代谢和生理的体外研究提供高纯度的细胞.