RNAi沉默Survivin基因抑制人鼻咽癌细胞生长

目的观察RNA干扰沉默Survivin基因对人鼻咽癌CNE2细胞在体内外生长的抑制作用。方法将Survivin特异性shRNA表达载体pGenesil-1-survivin经Lipofectamine。”2000介导转染人鼻咽癌CNE2细胞,经G418筛选获得稳定转染的CNE2细胞,荧光显微镜和流式细胞仪检测细胞转染效率;逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Westernblot分别检测Survivin基因mRNA和蛋白表达水平;噻唑蓝（MTF）法检测细胞增殖能力的变化。以稳定转染细胞建立裸鼠荷瘤模型,观测瘤体积的变化,绘制移植瘤生长曲线。结果流式细胞仪检测pGenesil-1-survivin细胞转染百分率为（87．13±2．21）％;RT．PCR和Westernblot结果显示,pGenesil-1-survivin组对人鼻咽癌CNE2细胞SurvivinmRNA和蛋白的抑制率分别为64．55％和51．24％,均较随机序列构建载体的阴性对照（pGenesil-1-NC）组和空白对照组明显下调（均P〈0．05）;MTT结果显示,pGenesil-1-survivin组细胞增殖能力明显较pGenesil-1-NC组和空白对照组降低（均P〈0．05）;体内实验表明,pGenesil-1-survivin组较pGenesil-1-NC组和空白对照组能有效抑制BALB／C裸鼠人鼻咽癌的生长（均P〈0．05）。结论沉默Survivin基因可以有效抑制人鼻咽癌CNE2细胞在体内外的增殖,Survivin基因有望成为鼻咽癌基因治疗的有效靶点。     

针对K-ras基因点突变的反义寡核苷酸对人胰腺癌Patu 8988细胞的抑制作用

目的 检测人胰腺癌Patu8988细胞K-ras基因点突变形式，并观察针对该点突变的硫代反义寡核苷酸在体内外对Patu8988细胞增殖和凋亡的影响。方法顺序特异引物聚合酶链反应（PCR-SSP）法和基因测序检测Patu8988细胞K-ras点突变形式，根据点突变形式设计并合成硫代反义寡核苷酸（K-ras mutation ASODN）作用Patu 8988，通过噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞生长情况；流式细胞术（FCM）检测K-ras蛋白表达和细胞凋亡；逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测K-ras mRNA表达水平；以Patu8988细胞建立裸鼠胰腺癌模型观察K-ras mutation ASODN在体内的抗肿瘤效果。结果 PCR-SSP法和基因测序检测表明Patu 8988细胞存在K-ras基因第12密码子点突变，其突变方式为GGT→GTT.体外实验表明K-rasmutation ASODN组较正义寡核苷酸（SODN）组、随机寡核苷酸（RODN）组和空白对照组可明显抑制Patu8988细胞生长（P〈0．01），并呈时间．剂量效应关系；转染48h后，K—ras mutation ASODN组的K-ras蛋白和mRNA表达程度较SODN组、RODN组和对照组均明显降低（P〈0．01），而细胞凋亡明显增多（P〈0．05）。体内实验表明K-ras mutation ASODN较SODN组、RODN组和对照组能有效抑制BALB／C裸鼠人胰腺癌的生长（P〈0．01）。结论 针对K-ras基因第12密码子点突变的反义寡核苷酸可明显抑制人胰腺癌Patu 8988细胞生长，促进细胞凋亡，其机制可能是通过下调K-ras蛋白和K—ras mRNA表达而起作用。     

伴t(1;7)易位骨髓增生异常综合征的双色荧光原位杂交研究

目的 通过对5例伴有t（1；7）易位的骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndromes,MDS）患者进行研究，并进一步确定易位杂色体着丝粒的组成和来源。方法 采用骨髓细胞直接法或短期培养法制备染色体，应用R显带技术进行核型分析，应用荧光素SpectrumRed标记的1号染色体着丝粒特异性α卫生DNA探针和荧光素SpectrumGreen标记的7号染色体着丝粒特异性α卫星DNA探针，对其中3例患者进行双色荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH）研究。结果 5例患者均有t(1;7)易位。双色FISH显示其中3例患者t（1;7) 位所致衍生染色体的着丝粒均由红绿两个信号融合而成。结论 双色FISH证实MDS患者t(1;7）易位染色体着丝粒由1号和7号染色体着丝粒共同组成。     

论21世纪高等医科学生综合素质教育

医学教育日益关注的焦点是关于跨世纪高等医科学生综合素质教育的问题。笔者就此探讨如下。１　新世纪医学科学的发展特点需要综合素质的医学人才展望２１世纪医学科学的发展前景,越来越清晰地显示以下特点,这些特点决定了２１世纪的社会需要综合素质的医学人才。１．１　医学模式的转变：医学模式从生物医学模式向生物－心理－社会医学模式转变,对医学教育、医学科学发展、社会卫生保健都将产生极大的影响。社会对医学的要求不仅限于看病治病,更多的是要求提供预防、康复的指导,提供社会卫生保健和医学心理卫生服务。这就要求医学人才…     

恶性淋巴瘤单克隆抗体的制备和初步鉴定

采用人恶性淋巴瘤细胞株Raji细胞作为免疫原免疫BALB/C小鼠, 按常规方法融合并经间接ELISA法筛选, 成功地制备了1株抗Raji细胞单克隆抗体(MAb), 命名为SZ138.用琼脂糖双扩散鉴定其为IgG1类, ELISA法测定其腹水效价为1:3.2×104.MAb流式细胞仪检测表明, 该抗体与Raji和Daudi呈阳性反应;与外周红细胞、白细胞(包括淋巴细胞和中性粒细胞)、未活化血小板、内皮细胞株ECV呈阴性反应.免疫组化SP法显示, MAb SZ138识别的抗原在胃肠道的腺体和肝脏有所表达, 而在心、脑、扁桃体、脾、脂肪组织、动脉血管壁、神经节、横纹肌、平滑肌等组织不表达或表达很低.Western blotting分析显示, MAb SZ138可特异识别还原条件下相对分子量为170kD的蛋白多肽.结果提示: MA SZ138对恶性淋巴瘤的诊断和治疗可能具有一定的临床意义.     

糖尿病患者GFR和血、尿β2-MG测定及其临床价值探讨

探讨GFR、血及尿β2-MG测定早期判断糖尿病肾功能损害的临床价值.本文对不同病程组的糖尿病患者GFR、血及尿β2-MG、BUN和Scr进行对比分析.研究结果表明,GFR和糖尿病病程呈明显的负相关(r= -0.771,P<0.01),而血、尿β2-MG则和病程呈正相关(r分别为0.560和0.544,P<0.01).联合检测GFR和血、尿β2-MG水平,可以早期判断糖尿病患者肾功能损害,并对糖尿病肾病的临床分期有一定的意义.     

介绍一种鼻饲胶布固定法

<正> 我科近几年采用双三角形胶布固定鼻饲管,经临床应用,效果满意。方法:1.将稍宽的胶布剪成下上两个连接的三角形。2.上面的三角形(即等边三角形长度为4cm)贴于插管侧鼻翼旁。3.下面的三角形(即剪掉两个直角三角形各1cm,余下部分为4cm),贴于鼻饲上。     

SLE病人外周血T淋巴细胞Fas的表达及其与ANA的关系

应用流式细胞仪检测系统性红斑狼疮（SM）20例及正常人外周血新鲜分离的T淋巴细胞Fas抗原的表达；并采用ELISA法检测病人血浆中抗核抗体（ANA）的含量。结果发现，SLE病人外周血T淋巴细胞Fas的表达明显高于正常对照组（P＜0．01）；且活动期明显高于非活动期（P＜0．01）。活动期血浆ANA含量明显高于非活动期（P＜0．05）。外周血T淋巴细胞Fas阳性率与血浆ANA含量呈正相关。结果提示：在SLE发病过程中存在自身基因Fas的表达异常，Fas表达的增强反映SLE病人体内T淋巴细胞处于异常活化状态。     

全国临床治疗学术会简介

<正> 全国临床治疗学术会于1992年6月8日～12日在河南省郑州市举行。来自各省市自治区和部队医院的代表233人参加了会议。会议共收到论文1300篇,经审定选出23篇大会交流,210篇小会交流。河南省郑州市心血管病研究所教授汪民章、临床医学杂志社主编魏太星在会上分别作了《心源性休克的治疗进展》及《难治性心衰治疗的进展》的专题讲座。会议重点交流了临床治疗七个方面,包括(1)内科病人的诊疗(2)外科病的诊疗(3)妇产科病的诊疗(4)眼耳鼻喉科病的诊疗(5)中西医结合的诊疗(6)诊疗教训(7)临床报告,还就丙型肝炎研究的发展,腹痛的发生机理与诊断思路,有关心脏急症药物治疗的若干问题,进行了学术报告和答疑。