Ⅰ型胰岛素样生长因子重组真核表达载体的构建及在烫伤大鼠皮肤中的表达

目的：构建Ⅰ型胰岛素样生长因子重组真核表达载体pcDNA3．1／Ⅰ型胰岛素样生长因子，并观察其在烫伤大鼠皮肤中的表达情况。 方法：实验于2003-07／12在解放军第一军医大学热带卫生学系实验室完成。利用原核表达质粒pUChIGF-I，通过分子克隆技术扩增Ⅰ型胰岛素样生长因子基因，将其克隆至真核表达载体pcDNA3．1中，构建重组真核表达质粒pcDNA3．1／Ⅰ型胰岛素样生长因子。取20只Wistar大鼠，全麻后背部浸入95℃水浴锅中，烫伤12s，造成30％Ⅲ度烫伤，烫伤后随机分为两组（n=10），即cDNA3．1／Ⅰ型胰岛素样生长因子组及pcDNA3．1组。①pcDNA3．1／Ⅰ型胰岛素样生长因子组：烫伤后当天及第1，2，3，4周后于大鼠左后背部创面边缘（距创面边缘0．5cm）皮下注射脂质体和重组质粒的混合物192μL（3．6μg pcDNA3．1／Ⅰ型胰岛素样生长因子（2μL）＋10μL脂质体＋180μL生理盐水]。②cDNA3．1组：注射时间和方法同前，脂质体和质粒混合物为3．0μg pcDNA3．1（2μL）＋10μL脂质体＋180μL生理盐水。伤后5周断头处死大鼠，取注射点附近皮肤，应用免疫组化方法检测Ⅰ型胰岛素样生长因子基因的表达情况。 结果：20只大鼠全部进入结果分析，无脱失。①大鼠重组质粒经酶切鉴定与预期结果一致。DNA测序结果表明Ⅰ型胰岛素样生长因子基因已分别正确插入到pcDNA3．1质粒，提示成功构建了重组真核表达载体。②pcDNA3．1／Ⅰ型胰岛素样生长因子组大鼠皮肤组织中Ⅰ型胰岛素样生长因子呈现强阳性表达，pcDNA3．1组大鼠呈表达缺失或弱阳性表达。 结论：应用分子克隆技术可以成功构建重组真核表达载体pcDNA3．1／Ⅰ型胰岛素样生长因子，Ⅰ型胰岛素样生长因子在烫伤大鼠皮肤中呈阳性表达。     

术中给予小剂量碳酸氢盐治疗的安全性——双盲、随机、前瞻性研究

为了确定手术中无低氧血症的代谢性酸中毒给予小剂量碳酸氧钠治疗是否安全、有效,选40例因冠状动脉疾患而实施大手术的男性病人,其术中血清碳酸氢盐降低>3mmol/L者,随机分为两组,每组20例,分别使用7.2％碳酸氢钠或5％氯化钠液静脉快速输入。补钠剂量(mmol)按血清碳酸氢盐浓度下降数(mmol/L)×体重(kg)×0.2计算。治疗期间避免使用任何影响血液动力学的药物。术中均予气管内插管,使用机械通气供氧FIo_20.5～1.0,终末潮气Pco_2维持35～45torr(4.7～     

重度吸入性损伤16例救治体会

我院 2 0 0 1年 1～ 12月共收治 16例大面积烧伤并吸入性损伤 ,治愈 14例 ,死亡2例。现总结报告如下。1　临床资料1 1　一般资料　 16例中男 13例 ;女 3例 ,年龄 17～ 39岁 ,平均 30岁。烧伤面积分别为 95 / 10 0 (Ⅲ度 /总面积 ) 1例 ,95 / 982例 ,85 / 982例 ,80 / 972例 ,75 / 95 4例 ,35 / 5 2 3例 ,2 6 / 30 3例。均伴有重度吸入性损伤。1 2　治疗方法1 2 1　气管切开 ,氧气治疗　伤后立即行气管切开 ,吸入高浓度氧 ,数小时后 ,血中ＨｂＣＯ可降至正常 ,再改为低于 35 %氧气。方法先经鼻给氧 ,待气管切开后再从气道给氧 ,可提高血氧浓…     

严重烧伤合并骨髓抑制1例

患者 ,男 ,2 5岁。密闭空间救火时被火焰烧伤全身 ,伤后 1h被送入当地医院急救 ,予抗休克抗感染等处理 ,因病情危重于伤后 2 4h飞机转送我科。入院诊断 :火焰烧伤总面积 98%、Ⅲ度 95 % ,合并重度吸入性损伤。入院后予特级护理 ,创面清创后涂SD -Ag糊剂暴露 ,双下肢行焦痂切开减张 ,继续抗休克 ,加强全身抗感染及支持治疗等。休克期渡过平稳。因病情危重 ,于伤后第 6 4小时行四肢创面切痂自体微粒皮加大张异体皮植皮术。伤后 6d下午行胸腹切痂自体微粒皮加大张异体皮植皮术。此后继续行抗感染及对症支持治疗 ,伤后 3周左右因异体皮排斥较…     

亚胺培南在烧伤早期家兔痂下组织液的药动学实验研究

目的　研究亚胺培南在严重烧伤早期家兔痂下组织液中的药代动力学变化。方法　烧伤组 :烧伤早期家兔 ;对照组 :正常非烧伤家兔于 2 0min内iv10 0mg泰能后 ,用微生物琼脂打孔扩散法测定痂下组织液和血浆中亚胺培南的浓度 ,利用 3P87软件计算其相关药代动力学参数 ,采用SPSS8.0软件包进行统计学处理。结果　与对照组相比 ,烧伤组亚胺培南药代动力学参数发生显著改变。烧伤组血浆和痂下组织液中亚胺培南T1/ 2　明显延长 ,分别为血浆 (1.4 9± 0 .2 1)h、痂下组织液 (2 .4 9± 0 .4 3)h ;对照组血浆 (1.10± 0 .18)h ;亚胺培南在痂下组织液中在用药后 1h即可以检测到 ,有效浓度可维持 6～ 8h。结论　亚胺培南在烧伤早期痂下组织液和血浆中T1/ 2　明显延长 ,其在痂下组织液中形成抗生素保护屏障 ,有效地防止创面细菌的侵袭性感染     

慢性难愈创面修复方法及护理

目的总结难愈创面较为有效的治疗与护理方案。方法回顾近2年来治愈的10例经治疗3月以上的慢性难愈创面的治疗与护理方案,总结治疗与护理成功及失败的经验和教训。结果4例褥疮患者经采用局部皮瓣转移术均痊愈;对于各类原因导致的皮肤软组织坏死,经全身综合治疗并采用局部皮瓣转移或游离的中厚皮移植均获成功。结论结合患者病情,有针对性地进行心理护理、创面护理、营养支持、医护协助加强创面清创换药,创造良好的皮瓣皮片移植局部条件,是难愈创面手术成功的关键。     

40%体表面积烫伤犬早期切痂对血浆花生四烯酸代谢产物的影响

目的　探讨烧伤后早期切痂对血浆花生四烯酸代谢产物含量的影响。方法　以 4 0 %体表面积Ⅲ°烫伤犬为模型 ,随机分为切痂组 (A组 )和非切痂组 (B组 ) ,A组于伤后 3h行切痂植皮术 ,动态观察血浆前列腺素E2 (PGE2 )、血栓素B2 (TXB2 )、磷脂酶A2 (PLA2 )含量的变化。结果　两组动物伤后血浆PGE2 、TXB2 、PLA2 含量明显增加 ,A组动物术后血浆炎症介质含量较术前和B组显著减少。结论早期切痂能有效减少烧伤后炎症介质的生成与释放 ,对防治全身炎症反应综合征 (SIRS)引发的脏器损害有确切的疗效     

rhGM-CSF凝胶对烧伤后残余创面愈合的影响

目的 探讨局部应用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)凝胶对烧伤后残余创面愈合的影响.方法 采用随机、双盲、安慰剂同体对照的方法,将138处烧伤后残余创面随机分为试验组(n=69)和对照组(n=69).试验组采用rhGM-CSF凝胶治疗,对照组采用空白基质安慰剂治疗,周期21d.观察创面愈合时间、疗效及...     

严重烧伤休克期切痂对肠粘膜损伤的影响

目的：探讨严重烧伤休克期切痂对肠粘膜损伤的影响。方法：采用４０％总体表面积（ＴＢＳＡ）Ⅲ度烫伤犬模型,随机分为切痂组（Ｅ组）和非切痂组（Ｃ组）,伤后１小时按Ｐａｒｋｌａｎｄ公式补给平衡盐溶液,Ｅ组动物伤后３小时切痂。分别于伤前、伤后３０分钟及３、６、１２、２４和４８小时测定血浆二胺氧化酶（ＤＡＯ）、乳酸、内毒素（ＬＰＳ）含量,伤后４８小时检测肠组织丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）含量。结果：２组动物伤后血浆ＤＡＯ、乳酸、ＬＰＳ含量明显增加。切痂后能明显降低血浆中ＤＡＯ、ＬＰＳ和乳酸含量,肠组织中ＭＤＡ含量也明显减少。结论：严重烧伤休克期切痂有利于保护肠粘膜屏障功能。     

海水浸泡对大鼠深Ⅱ度烫伤后创面愈合的影响

目的 从创面炎症反应及感染等方面探讨海水浸泡对烫伤大鼠创面愈合的影响。方法 建立Wistar大鼠10％体表面积深Ⅱ度烫伤合并海水浸泡模型,采用数字表法,将120只雄性Wistar大鼠随机分为单纯烧伤对照组和海水浸泡实验组,实验组大鼠烫伤后立即用海水浸泡4h。观察组织病理改变、创面愈合时间和创面感染情况;ELISA法检测血清中TNF-α及IL-6含量。结果 实验组大鼠血清中TNF-α[( 130.4±17.3) pg/ml]、IL-6[(320.5±28.5) pg/ml]含量与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);创面感染加重,创面愈合时间延长(P＜0.05),再上皮化和表皮各层的分化延迟,且海水浸泡可使烧伤创面肿胀、创面局部组织炎症反应加重。结论 大鼠烫伤后合并海水浸泡,可加重创面炎症反应及创面感染,抑制创面愈合。