农药残留测定用新型混合型固相萃取小柱的开发

目的:开发新型农药残留用固相萃取小柱,简化农药残留前处理时间,提高测定效率.方法:选用农药残留常用的几种固相萃取填料,按照一定比例制备混合型同相萃取小柱,考察各种小柱对常见的92种农药的回收率同时以菠菜为考察对象,考察各填料对菠菜的净化效果,最终筛选出符合要求的固相萃取小柱.结果:最终得到的固相萃取小柱在仅以乙腈为淋洗...     

HPLC-MS/MS法测定中药材枳壳中展青霉素

目的:建立中药材枳壳中展青霉素的HPLC-MS/MS测定方法。方法:样品经果胶酶酶解,用水提取、经过展青霉素免疫亲和柱净化后,用高效液相色谱-三重四级杆串联质谱进行分析测定。结果:展青霉素在5.08 ng/ml～254.0 ng/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系,线形方程为Y=2.17×103X-222,r=0.9977,回收率在80.0%～101.1%之间。在枳壳中最低检测限为0.02μg/kg。结论:本法灵敏、快速、准确、专属性强,可用于中药枳壳中展青霉素的测定。     

手性流动相添加剂法测定积雪草中积雪草总苷的量及其总苷特征图谱

目的 以β-环糊精为流动相添加剂,拆分积雪草药材及其总苷中羟基积雪草苷和积雪草苷,建立羟基积雪草苷和积雪草苷的定量测定方法,同时建立积雪草总苷的高效液相色谱特征图谱。方法 采用 Dikma Diamonsil^TM C₁₈ (250 mm×4.6 mm, 5 μm) 色谱柱;流动相为乙腈-2 mmol/L β-环糊精溶液 (24∶76);柱温 30 ℃;体积流量 1.0 mL/min;检测波长 205 nm;理论塔板数按积雪草苷峰计算应不低于 4 000。结果 β-环糊精的加入很好地分离积雪草药材及其总苷中的羟基积雪草苷和积雪草苷,满足了定量分析的要求,其中有效成分羟基积雪草苷和积雪草苷的线性范围分别为 0.181～18.1 μg (r=0.999 98) 和 0.195～19.5 μg (r=0.999 98) ,积雪草药材的平均加样回收率 (n=9) 分别为 101.2% 和 101.6%,积雪草总苷的平均加样回收率 (n=9) 分别为 100.3% 和 99.3%,11 批次的积雪草总苷样品的高效液相色谱特征图谱中确定 6 个共有峰作为定性的指标峰。结论 本法简便快速、结果准确、重现性好,可用于积雪草药材及其总苷的质量控制。     

头孢曲松对乳鼠肠道上皮组织及肠道菌群的影响

目的 探究头孢曲松对生命早期小鼠肠道上皮组织及肠道菌群的影响,以及对成年期小鼠肠上皮组织恢复及菌群再建的影响。方法 36只BALB/C新生小鼠随机分为对照组和实验组（n=18）。实验组小鼠在出生后21 d内,每日用头孢曲松（100 mg/kg）灌胃,对照组用等量生理盐水灌胃。采用免疫组化法检测小鼠肠道各部位上皮细胞相关蛋白（Ki67、Muc2、ZO-1）表达;qPCR和二代测序法分析小鼠粪便细菌总浓度及粪便细菌组成。结果 头孢曲松干预21 d时,与对照组比较,实验组小鼠体重、肠上皮细胞相关蛋白Ki67、ZO-1表达降低,Muc2表达升高（P < 0.05）;总细菌浓度下降但丰富度及多样性增高（P < 0.05）;粪便细菌以厚壁菌门为主,含较多葡萄球菌和肠球菌。生后56 d时,实验组小鼠肠道上皮组织有所恢复,但体重、菌群群落结构等仍和对照组比较差异有统计学意义（P < 0.05）。结论 早期头孢曲松干预能显著损伤机体早期肠道上皮组织的发育和肠道菌群的构建,肠道菌群在生命早期的损伤会部分地延续到成年期,有可能继续影响机体在成年期各种生长发育及生理代谢。     

异种脱细胞真皮基质在深Ⅱ度烧伤创面的临床应用

创面处理是深Ⅱ度烧伤治疗的首要问题,自体皮片移植是临床常见的修复手段,然而自体皮源的缺乏却是治疗中难以规避的难题。随着组织工程技术的发展,异种脱细胞真皮基质作为理想的皮肤替代物,具有快速血管化,低免疫原性及较好的稳定性等优点。因此,在深Ⅱ度烧伤创面的修复中具有重要意义。本文就异种脱细胞真皮基质发展历史、生物学特性及研究现状进行综述,以期对临床治疗及研究有所帮助。     

地榆皂苷Ⅰ诱导人甲状腺乳头状癌细胞BCPAP凋亡的实验研究

目的研究地榆皂苷Ⅰ对人甲状腺乳头状癌BCPAP细胞作用及相关的分子机制。方法 MTT法检测地榆皂苷Ⅰ对BCPAP细胞增殖的作用;AnnexinⅤ/PI双染法检测细胞凋亡;Western blot法检测凋亡相关蛋白表达水平;JC-1染色检测线粒体膜电位;试剂盒检测Caspase活性。结果地榆皂苷Ⅰ对BCPAP细胞增殖有显著抑制作用,且呈浓度依赖性(P0.05),IC_(50)为28.99μmol/L。地榆皂苷Ⅰ可显著诱导BCPAP细胞凋亡,且凋亡率随着药物浓度的升高而显著升高,呈剂量依赖性。地榆皂苷Ⅰ可提高Bax/Bcl-2比率,降低线粒体膜电位,促使细胞色素C从线粒体内的释放,提高Caspase-9和Caspase-3活性。结论地榆皂苷Ⅰ通过激活线粒体通路导致人甲状腺乳头状癌BCPAP细胞增殖受到抑制并诱导细胞凋亡。     

PPARγ及其配体与乳腺癌

过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptorsγ,PPARγ)是Ⅱ型核激素受体超家族中一员,激活后可诱导乳腺癌、胃癌、胰腺癌等肿瘤细胞分化,并抑制其恶性增殖、诱导细胞凋亡、抑制血管生成和降低肿瘤侵袭能力,具有潜在的抗肿瘤作用,有望成为治疗的新途径.现就PPARγ和其配体与乳腺癌的关系进行综述.     

固相萃取-气相色谱双塔双柱法同时测定中药材中53种有机磷类农药残留量

目的:研究中药材中有机磷类农药残留量的测定方法.方法:选用代表性的白果、人参、肉桂、红花、银杏叶、广藿香等中药材样品进行研究,样品经高速均质器均质提取,依次经C_(18)固相萃取柱、石墨化碳/氨基串联固相萃取柱(SPE)净化后,用气相色谱双塔双柱进样,双火焰光度检测器(或氮磷检测器)同时定性、定量测定.结果:在6种中药材样品基质、三水平添加条件下,53种农药的回收率大多在70.0%～120.0%,相对标准偏差小于15%,检测限大多低于0.01 mg/kg,符合农药多残留检测的要求.结论:本法净化效果好,基质干扰小,灵敏度高,重现性好,可用于中药材样品中有机磷类农药残留量的日常检测.     

毛细管气相色谱法测定原人参二醇中有机溶剂残留物

目的:建立原人参二醇中3种有机溶剂残留物的检测方法。方法:采用毛细管气相色谱法,色谱柱为PLOTQ毛细管柱,N,N-二甲基乙酰胺为溶解介质,FID检测器,载气为氮气,以异丙醇为内标测定原人参二醇中甲醇、乙酸乙酯、正丁醇的有机溶剂残留量。结果:本法线性关系良好,r=0.99996～0.99999,精密度RSD均小于6.0%,甲醇、乙酸乙酯和正丁醇的加样回收率为98.2%～102.2%,其RSD在1.1～2.4%。结论:该方法操作简便快速、灵敏度高,准确度好,可作为原人参二醇原料中有机溶剂残留量的测定方法。     

大体积进样-气相色谱-质谱法测定白芍中15种农药残留

目的:建立同时测定白芍中有机氯、有机磷和拟除虫菊酯类等15种农药残留的大体积进样-气相色谱-质谱联用(LVI-GC-MS)分析方法。方法:采用大体积进样-气相色谱-质谱法,色谱柱为DB-5MS毛细管柱(30 m×250μm,0.25μm),程序升温:初始温度40℃保持1 min,然后以20℃/min升至210℃保持2 min,以5℃/min升至280℃保持22 min。进样量15μl,流速1.0 ml/min。结果:各农药在一定质量浓度范围内线性关系良好,相关系数r=0.9937～0.9995。在10μg/kg和100μg/kg两个质量浓度水平下,各农药的回收率为60.4%～106.8%(除二甲戊乐灵和4,4’-DDE为53.1%、45.2%外),相对标准偏差(RSD)为3.6%～18.6%,检测限(S/N=3)为0.16～3.59μg/kg。样品中检测到4,4’-DDE,其含量远低于药典规定的残留限量。结论:本研究建立的LVI-GC-MS方法操作简单、准确、灵敏度高、成本低,可以实现白芍药材中多农药残留的快速检测。