贞芍组方对围绝经期模型小鼠下丘脑-垂体-卵巢轴关键因子的保护作用研究

目的 探讨贞芍组方对围绝经期模型小鼠下丘脑-垂体-卵巢轴(HPO轴)关键因子的保护作用。方法 选取175只11月龄雌性ICR小鼠和15只7～8周龄且动情周期规律的雌性ICR小鼠。采用11月龄雌性ICR小鼠制备围绝经期小鼠模型,按体质量随机数字表法分为戊酸雌二醇组、坤宝丸组、溶媒组、贞芍配伍组。利用旷场及高架十字迷宫实验等行为学实验;ELISA法检测血清中激素和神经递质的含量;HE染色法观察子宫、卵巢的形态;免疫荧光法检测子宫、卵巢中雌激素受体(estradiol receptor, ER)的表达。结果 与对照组相比,模型小鼠表现出明显的抑郁焦虑行为,表现为自发活动和探索行为减少;血清中雌二醇(estradiol, E2)含量显著性降低(P<0.05),卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone, FSH)含量显著性升高(P<0.01);神经递质五羟色胺(5-hydroxytryptamine, 5-HT)含量显著性降低(P<0.05);子宫、卵巢的ERβ表达显著性降低(P<0.01,P<0.05)等。同时经贞芍组方给药,发现小鼠围...     

白香丹胶囊对PMDD肝气逆证模型大鼠血清抗焦虑样作用机制研究

目的 以经前烦躁障碍症(premenstrual dysphoric disorder,PMDD)肝气逆证模型大鼠为载体探索白香丹胶囊对模型大鼠焦虑样行为的影响,并初步探究其血清作用机制。方法 以居住入侵法制备PMDD肝气逆证模型大鼠并进行药物干预,给药后通过攻击行为测试、旷场实验、高架十字迷宫实验对PMDD肝气逆证模型大鼠焦虑样行为进行检测;腹主动脉取血并制备血清,使用ELISA法检测大鼠血清中孕酮(P)、四氢孕酮(ALLO)、γ-氨基丁酸(GABA)的含量变化。结果 与正常组比较,模型组大鼠攻击行为明显增加(P＜0.01);旷场实验,总路程增加而在中央区停留的总时间减少(P＜0.01);高架试验,进入开放臂的次数百分比和时间百分比均明显减少(P＜0.01);血清中P水平、ALLO含量、GABA水平均显著下降(P＜0.05)。与模型组比较,氟西汀组和白香丹组大鼠的攻击行为均明显减小(P＜0.01);旷场实验,总路程减少而在中央区停留的总时间均明显增加(P＜0.01);高架试验,进入开放臂的次数百分比和时间百分比均明显增加(P＜0.01);血清中P水平、ALLO水平、GABA水平均显著上升(P＜0.05)。结论 白香丹胶囊对PMDD肝气逆证模型大鼠有明显的抗焦虑样作用,并明显增加模型大鼠血清中的P、ALLO、GABA水平,据此推测该病证作用机制可能与调节体内P、ALLO、GABA的含量有关。     

动态观测血清T3、T4、TSH在PMS肝气逆、肝气郁两证患者月经周期各时相的变化

目的：研究三碘甲状腺原氨酸（T3）、甲状腺素（T4）、血清促甲状腺素（TSH）在经前期综合征（PMS）肝气逆、肝气郁两证型中的变化规律。方法：采用流行病学横断面调查的方法,选取济南、青岛两市女性职工为目标人群,参照PMS国际诊断标准及证候诊断标准筛选患者。对PMS两证患者在经期的卵泡期（6-14天）、黄体期（15-23天）、经前期（24-28天）及月经期（1-5天）4个时期采集血样,放免法检测经期不同时段T3、T4、TSH水平。结果：与正常组比较,在经前期与经期,两证患者血清T3水平均显著降低（P<0.05）;血清T4 、TSH水平发病前较发病后改变不显著,但在发病前后的经期各个时相,均呈现显著性升高。结论：T3、T4、TSH的改变是肝气逆、肝气郁两证发病的机制之一。这一微观改变是机体“气血潜在不畅”的实质之—,是两证发病的机体条件。     

HPLC法对白香丹胶囊中芍药苷在大鼠体内药时曲线的测定

目的：本研究通过HPLC法对白香丹胶囊大鼠含药血清的检测,确定其主要药效成分芍药苷在体内代谢的药时曲线,并找出最佳采血时间,为后续机制研究奠定基础。方法：通过方法学考察确定所采用HPLC的准确度和精密度;给予白香丹胶囊溶液lmL/100g,连续给药3天,每天2次;给药后在不同时间点对大鼠进行眼眶静脉丛取血,白香丹胶囊组取血时间点分别为：10、20、40、60、90、120、180、240、300、360min,离心15min,3000r·min^-1,取血清;将大鼠血清与甲醇按1?4混合,4℃离心,取上清液,氮气吹干,流动相定容至100μL,过滤后进行测定。结果：方法学考察结果显示,日内精密度和日间精密度RSD<3%,回收率均在98.0%-102.0%;制备药时曲线显示末次给药2h左右含药血清中芍药苷含量达到峰值。结论：通过方法学考察说明所采用HPLC方法日内精密度和日间精密度良好,回收率在标准范围内,符合定量检测要求;采用该方法所得药时曲线说明该复方中主要药效成分芍药苷在2h后血药浓度最大,可作为复方含药血清提取的最佳采血时间,这将为后续该复方治疗机制研究提供科学依据。     

中药治疗围绝经期综合征的机制研究＊

围绝经期综合征是指妇女在绝经前后由于卵巢功能衰退、体内雌激素波动所致的以植物神经紊乱为主伴有精神心理症状的一类症候群。现代医学在治疗上，主要采用激素治疗，但长期使用的安全性有待进一步评价。而中药在治疗围绝经期综合征上具有独特的优势，方法灵活且疗效显著，越来越受到到医生和患者的认可。目前,中药治疗围绝经期综合征的机制研究成为研究的热点，本研究从中药治疗围绝经期综合征的机制研究着手，从激素内分泌、免疫、细胞凋亡等多个角度来探讨中药治疗围绝经期综合征的作用机制，以期为中药治疗围绝经期综合征提供新的思路和方法。     

愤怒、郁怒反应模型大鼠海马5-HTR2C的基因表达

目的怒是影响人类健康的重要情志因素,分为愤怒和郁怒两种表达方式,两者诱发病证的机制尚未完全明确。该文主要探索愤怒、郁怒情志反应的微观机制。方法采用居住入侵和社会隔离的方法制备愤怒、郁怒反应大鼠模型,并分别予以调肝方药经前平颗粒、经前舒颗粒干预,以正常大鼠作为对照,分别取愤怒、郁怒模型组以及经前平、经前舒给药组大鼠的海马用以基因芯片检测,初步筛选出与愤怒、郁怒密切相关的基因5-HTR2C、GABABR2和5-HTR3B,运用RT-PCR和Western blot技术仅对海马中基因5-HTR2C进一步进行检测。结果与正常组相比,5-HTR2C mRNA和蛋白表达在愤怒、郁怒反应大鼠海马中均增高(P<0.01),而且愤怒组的改变程度明显大于郁怒组,上述改变在模型用药组均得到不同程度的改善,基本可恢复到正常水平。结论愤怒、郁怒情志刺激可导致海马基因5-HTR2C的表达水平改变,调肝方药在一定程度上可缓解上述情况,说明5-HTR2C与怒密切相关,且与愤怒关系更加密切,以上结果为下一步的研究提供方向和线索。     

微透析技术结合色-质联用检测细胞外液神经递质研究进展

近30年,关于神经递质化学作用的大量信息被发现,同时也暴露出神经环路的复杂本性,多重神经递质系统间的交互作用以及不同受体对应神经化学物质的复杂效应。微透析已作为常规的测量活体组织系统的神经递质水平的实验技术,并在研究神经变性和精神性疾病机制以及鉴别治疗这些疾病的新药方面表现出特有的优势。而微透析取样技术与现代分析技术联用已成为生物学、医学、药学研究的强有力手段。最近,对体内收集的微透析液的分析,大多数聚焦在色-质联用技术的发展上,该技术能够给予更加灵敏和准确的神经递质的分析测量方法。现主要综述与精神神经疾病联系比较密切的几种细胞外液神经递质的检测方法。     

新理论：桥梁原理，揭示机制、解释现象、走向科学理论——现代中医基础理论系列研究（上篇Ⅱ）

围绕“为何建立现代中医基础理论以及建立什么样的理论”这一上篇的主题,从理论本身条件展开探讨。在明确理论与知识及科学理论与科学知识相关概念的基础上,论述理论发展途径及其评价标准,比较中西医学理论发展的方式,为现代中医基础理论的评价和发展提供参照。依据卡尔·亨普尔的“桥梁原理”,抽象概括出现代中医基础理论研究和建立的“五大桥梁原理”及“一门逻辑学保障原则”,并阐述其作用。提出现代中医基础理论的“三层五级,树状结构”理论框架,展示该框架下11 条原理及概念的科学内涵,通过对照科学理论的作用和评价标准,分析论证其科学合理性,并进一步展望其发展方向。     

肝“体阴用阳”理论内涵及其临床应用

本文通过对肝“体阴用阳”理论内涵进行剖析,分别阐释了肝的“体阴”与“用阳”生理病理机制,描述了其相应证候机制与症状特点,分析了调肝经典方药的组方规律,通过临床验案证实肝“体阴用阳”的临床指导意义。认为肝的升发之性,是升发人体之气以适应天地之气升发的必要保障,是维持人体气机升降平衡的关键。肝气升发失常主要体现为升发太过与升发不及两大类型,具体分析了肝气升发失常病机特点与临床表现;提出肝藏血实为肝之收敛与涵养特性新观点,阐释了肝藏血主疏泄之间的收敛贮藏与升发条达的关系,认为肝藏血涵养收敛肝气使其不过亢,肝藏血可养魂安神,肝藏血为经血生成之源等观点。本文最终提出“平肝降逆必兼养阴柔肝,疏肝解郁亦应养肝养血,清肝泻火不忘凉血养阴”的临床调肝组方观点,具有一定临床指导价值。     

柴胡提取物对大鼠海马原代培养神经元5-HT3受体介导离子通道的影响

目的: 探讨柴胡提取物（Radix Bupleuri Extract,RBE）含药血清对抑郁情绪模型大鼠原代培养的海马神经元5-羟色胺3受体（5-HT₃R）通道电流的作用。方法：复制抑郁情绪大鼠模型,以柴胡提取物进行药物干预,采用旷场实验和糖水偏好实验评价模型, 制备各组大鼠血清并灭活除菌,对原代培养的大鼠海马神经元干预24 h后,采用全细胞膜片钳技术检测各组神经元5-HT₃R通道电流。结果:与正常组相比,模型组大鼠旷场实验总分显著性降低（P<0.01）,糖水偏好系数显著降低（P<0.01）,模型组大鼠血清孵育的海马神经元电流密度值明显增加（P<0.01）;与模型组相比,柴胡提取物组和氟西汀组旷场实验总得分明显提高（P<0.05,P<0.01）,糖水偏好系数均明显增加（P<0.05,P<0.05）,柴胡提取物和氟西汀含药血清孵育的海马神经元电流密度值均明显减少（P<0.01,P<0.01）。结论：柴胡提取物能改善抑郁情绪模型大鼠异常的5-HT3R通道电流,这可能是其发挥抗抑郁情绪的中枢机制之一。