分娩机制中细胞间隙连接蛋白CX43瞬时表达定位、定量分析及其意义(激光扫描共聚焦显微镜研究)

目的：探讨细胞间隙连接蛋白CX43在临产前后子宫平滑肌组织中的瞬时表达及其在分娩机制中的重要作用。方法：应用间接免疫荧光染色,结合激光扫描共聚焦显微镜技术,对19例足月妊娠未临产孕妇和23例临产孕妇,剖宫产子宫下段平滑脱组织中CX43蛋白表达的进行定位和定量分析。结果;未临产子宫平滑肌细胞胞质中CX43蛋白染色较弱,临产子宫平滑肌细胞CX43蛋白表达呈现强阳性信号。定量分析CX43在临产与未临产子宫中滑肌细胞中平均荧光强度分别为100像素线以上、100像素线以下;CX43蛋白表达阳性率分别为82．6％和36．8％,二者表达阳性率比较差并存在显著性（P＜0．05）。细胞间隙连接蛋白CX43在临产子宫平滑肌细胞中的时时高表达可能是宫缩过程中重要的事件,时阐明复杂的分娩机制提供了新的理论依据。     

卵巢上皮性恶性肿瘤增殖细胞核抗原的表达及与预后的关系

目的：探讨卵巢恶性上皮性肿瘤ＰＣＮＡ的表达水平与患者病情、预后的关系．方法：卵巢恶性上皮性肿瘤石蜡切片进行ＰＣＮＡ（ＰＣ１０）抗体免疫组化染色．结果：在８４例原发性卵巢上皮性肿瘤中,７４例ＰＣＮＡ呈阳性表达;２０例交界性卵巢上皮性肿瘤ＰＣＮＡ阳性表达１３列良性卵巢上皮性肿瘤ＰＣＮＡ均呈阴性表达;１０例正常卵巢组织公有１例呈弱阳性表达．恶性（ＩＲＳ７．２６）、交界性（ＩＲＳ３．８５）两组间ＰＣ－ＮＡ     

25例先天性性腺发育不全征细胞遗传学分析

先天性性腺发育不全征又名Turner氏综合征。1938年首次由Turner氏报道。1944年Winkin等发现这类患者的性腺呈条索状,无生殖细胞称之为性腺发育不全征。1959年Ford等发现这类患者染色体核型为45,X。随着细胞遗传学的发展,又发现其他的一些染色体异常。归纳为以下三种类型:1.X单体型如45X;2.X嵌合体型如     

21-三体患儿的年轻双亲染色体随体联合率的研究

观察了10对21—三体患儿的23～34岁父母的外周血淋巴细胞G显带染色体随体(S)联合率,另对相应年龄内的正常夫妇和曾流产3次及有流产、死胎史以及生产过其他类型畸胎者夫妇各10对作了观察比较。结果:21—三体患儿双亲组的染色体21-D及21-G的S联合率明显高于其他4组(P<0.01)。初步认为:年轻夫妇的21-D及21-G S联合率增高者,生育21—三体患儿的可能较大,应仔细作产前诊断,防止21—三体患儿诞生。     

孕妇血清中DAZ基因含量在21三体产前筛查中的应用

目的：探讨检测孕妇血清中胎儿DNA含量在临床产前诊断21三体综合征的可行性.方法：采用70例孕早期（8～12wk）的妇女作为研究对象,其中10例为孕21三体男胎的妇女,30例为孕正常男胎的妇女,30例为孕正常女胎的妇女,提取其外周血血清中游离DNA,应用TaqMAN探针实时定量PCR技术检测Y染色体上无精症基因DAZ和代表母体及胎儿总游离DNA的β-actin基因的含量.结果：定量PCR检出孕21三体组血清中的胎儿游离DNA含量是正常男胎组的2.2倍.孕正常女胎组血清中未检测到DAZ基因.结论：定量PCR技术检测胎儿游离DNA可以作为产前筛查男胎21三体的重要指标.     

甲氧滴滴涕染毒对小鼠着床期HOXA-10基因表达的影响

目的：观察甲氧滴滴涕慢性染毒对雌鼠HOXA-10基因表达的影响．方法：使用5wk龄雌性昆明小鼠作为实验动物,按体质量随机分为4组,每组10只,经2wk适应性饲养后腹腔注射染毒,染毒剂量分别为0（对照）、16（低剂量）、32（中剂量）、64（高剂量）mg/（kg·d）,对照组给予等剂量芝麻油,连续15d后合笼,继续给药4d,于孕5d处死．结果：①染毒后小鼠一般情况未见明显异常;②免疫荧光显示：对照组荧光明显亮于染毒组;③实时荧光PCR测得的HOXA-10 mRNA表达：与对照组比较,中、高剂量组均显著降低HOXA-10 mRNA的表达水平（P〈0．05）．结论：MXC染毒可降低孕鼠子宫组织中HOXA-10基因的表达从而影响胚胎着床．     

抗原捕获聚合酶链反应分型检测妇女生殖器单纯疱疹病毒

目的 :　建立直接分型检测妇女生殖器单纯疱疹病毒 (HSV)的抗原捕获聚合酶链反应 (AC -PCR)。方法 :　用抗HSV型共同性糖蛋白单克隆抗体 ,包被聚苯乙烯离心管 ,捕获HSV ,同时加入 3个引物 :HSV - 1 HSV - 2型共同性上游引物及HSV - 1和HSV - 2型特异性下游引物 ,进行PCR扩增。结果 :HSV - 1和HSV - 2标准病毒株均分别扩增出与设计大小相符的 4 77bp和 399bpDNA条带。AC -PCR可检测到 10PFUHSV - 1和 1PFUHSV - 2。用AC -PCR检测了 36 5份妇女生殖器拭子标本 ,阳性 10 1例(2 7.7% ) ,2 3例为HSV - 1(占 2 2 .8% ) ,78例为HSV - 2 (占 77.2 % ) ;其中 112份标本同时用AC -PCR和分离培养法检测 ,AC -PCR的阳性率为 2 6 .8% (30 112 ) ,分离培养法的阳性率为 2 0 .5 % (2 3 112 ) ,两者差异有显著性 (χ2 =4 .5 ,P <0 .0 5 )。结论 :　AC -PCR是特异、敏感、快速分型检测妇女生殖器HSV感染的方法     

间隙连接蛋白26-EGFP载体的构建与表达

目的：构建间隙连接蛋白(connexin，Cx)26-EGFP真核表达载体，观察其在细胞内的表达和功能情况。方法：经RT-PCR获得Cx26基因全长片段，重组至有增强绿色荧光蛋白标记的真核表达载体pEGFP-N2中，经脂质体转染至宫颈癌Hela细胞中，通过激光共聚焦显微镜、免疫细胞化学方法、蛋白印迹法(Western blot)检测蛋白表达，应用荧光染料(Lucifer Yellow)细胞划痕法检测细胞间间隙连接通信状态。结果：转染细胞有增强绿色荧光蛋白及Cx26的表达，细胞间间隙连接通讯恢复。结论：融合表达增强绿色荧光蛋白后，不影响间隙连接蛋白的功能，在间隙连接蛋白的研究中，pEGFP-N载体可以作为一个优选载体。     

系列染色法分析人－（人－鼠）杂交瘤C8的染色体

Ｃ８杂交瘤分泌人的ＩｇＭ（λ）单克隆抗体，是具有肾综合征出血热病毒抗原内影像作用的Ａｂ２（β）我们用常规Ｇｉｅｍｓａ染色、Ｇ－分带和Ｃ－分带的系列染色法对Ｃ８杂交瘤细胞的染色体进行分析，发现除了小鼠染色体外，还含有人的１，２，５，７，９，１２，１６，１７，１８，１９，２０，２１和２２号染色体及大量标记染色体，人染色体中以较短的染色体出现频率较高。用系列染色法分析人－鼠杂交瘤中的染色体比单独用Ｇ分带法更易得到可靠的结论。