RNA干扰能有效抑制SARS相关冠状病毒复制

基于RNA干扰可抑制HIV等病毒的事实[1],本课题组构建了针对SARS病毒的、能表达小发夹结构RNA的siRNA质粒,利用RNA干扰有效抑制了该病毒的复制.     

化疗诱导Egr-1启动子调控的GM-CSF基因表达对荷瘤小鼠造血损伤的作用

背景与目的: 电离辐射可以通过产生活性氧激活Egr-1启动子高度保守序列CArG,Egr-EG为构建的上游含Egr-1调控序列CArG元件,启动TNF或GM-CSF的pCIneo表达载体,该机制可用于辐射所致的造血损伤或治疗肿瘤.化疗药物通常是通过产生活性氧和DNA损伤导致肿瘤细胞死亡,我们假设化疗药物可以产生活性氧.因此,化疗可以诱导Egr-1启动子调控下游造血因子基因表达,这种化疗诱导基因疗法针对化疗所致的造血损伤具有恰当的治疗效果.本文旨在探讨化疗诱导Egr-1启动子调控的造血因子基因表达对化疗后造血恢复的作用.方法: 将构建的携带有早期生长因子(Egr-1)启动子的GM-CSFcDNA和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)cDNA双顺反子真核表达载体导入基质细胞HFCL后,输入荷瘤(黑色素瘤)小鼠体内,对其实施5-FU化疗,观察外周血象动态改变、人基质细胞植入检测、外源基因eGFP、GM-CSFmRNA、蛋白表达以及对CFU-GM的增殖作用的检测.结果: 实验组与对照组相比外周血白细胞下降幅度明显减轻,恢复加快,而各组问CFU-GM差异无显著性.肿瘤抑制率与化疗相关,而与外源基因表达无关:5-FU处理后72 h实验组小鼠骨髓可见绿色荧光阳性的基质细胞,RT-PCR和Western印迹显示GM-CSF mRNA和GM-CSF蛋白表达增强.结论: 5-FU诱导的Egr-1启动子造血因子基因疗法对化疗后造血损伤具有促进造血恢复作用.     

半抗原DNP修饰自体肿瘤疫苗治疗恶性黑素瘤

目的:探讨半抗原二硝基氟苯(dinitrophenyl,DNP)修饰自体肿瘤疫苗治疗恶性黑色素瘤的疗效。方法:32例Ⅲ期恶性黑素瘤(恶黑)患者,肿瘤或淋巴结切除后,分别采用半抗原DNP修饰的自体瘤苗和未修饰自体瘤苗联合生物化疗进行治疗,观察两组患者淋巴细胞亚群变化、迟发型超敏反应(delayed-type hypersensitivity,DTH)和临床随访。结果:①两组比较,半抗原修饰瘤苗组较未修饰疫苗组CD8~ -IFN-PE明显升高(P<0.05);半抗原修饰瘤疫苗组治疗后CD8~ -IFN-PE细胞比例较治疗前明显升高(P<0.05),然而,半抗原未修饰瘤苗组治疗前后变化不大(P>0.05)。②半抗原修饰瘤苗组患者治疗后DTH明显增强,硬结由(5.4±1.2)mm增大到(23.5±4.2)mm(P<0.05),半抗原未修饰瘤苗组硬结由(6.3±1.4) mm增大到(11.2±3.2)mm(P<0.05),然而,两组DTH达到阳性结果(≥5mm)的百分比分别为95%和36%(P<0.01)。③随访2年,半抗原修饰瘤苗组13例患者生存时间超过24个月,其中仅2例DTH阴性;半抗原未修饰瘤苗组8例患者生存时间超过24个月,6例DTH阳性。结论:半抗原DNP修饰的自体肿瘤疫苗可增强恶性黑素瘤患者特异性细胞介导的免疫反应,从而延长患者生存时间。     

军队人群流感监测(1995～200O)

目的：建立“全军流感监测系统”,获得流感流行病学数据和病毒变异及流行趋势,实施流感预测预报,方法：按WHO规定的原理和方法进行：对流感流行株,抗原和基因以及血清抗体和病毒多原实行监测。结果：获军队流感病毒流行株40株,副流感Ⅱ型流行株2株,6000名战士血清流感抗体纵向监测表明;每年每名战士平均受流感病毒侵袭1．4次,流感抗体在6个月之内下降67％,流感抗体横向监测表明：甲1型流感抗体从1995年以来呈阶梯形下降,易感人群由15％上升至75％,甲3型流感抗体从1997年以来长期处于高水平,预示将会发生变异,1000余名战士鼻咽分泌物多病原检测结果表明：流感冒发流行期病毒总检出率为70％,一般流行季节约50％,抗原性变异和基因测序分析结果表明：甲1型流感株已发生明显变异,发现3株新流行株与标准株的同源性仅有92％和91％,新株丢失了130位氨基酸和304位糖化位点,对14840名战士调查表明：在流行季节45d内,流感发病率＞21％,缺勤约50万工作日,军营病毒暴发流行疫情可在6h作出.报告。结论：初步建立了军队人群流感监测系统,掌握了军队战士主要呼吸道病毒的发病率和易感率,为流感的预测和预报提供了科学依据。     

炭疽芽孢杆菌A16R株无菌培养滤液的蛋白质组学分析

目的：初步分析由我国炭疽疫苗株A16R所生产的无菌培养滤液中的主要成分。方法：运用免疫蛋白质组学的手段,从炭疽A16R疫苗株无菌培养滤液的二维凝胶电泳中选择与保护性抗体结合和不与该血清结合但丰度高的蛋白质点,进行质谱鉴定和信号肽分析。结果：共选择73个点,从炭疽芽孢杆菌数据库中鉴定出66个。在66个点中,有43个点与保护性血清结合;23个为高丰度蛋白,不与该血清结合。在与保护性血清结合的43个点中,13个点为不同大小的PA分子,其中相对分子质量83×10^3和63×10^3占主导,相对分子质量较小的片段仅4个。其余成分包括炭疽表面蛋白EA1、Sap、胶原黏附蛋白、伴侣分子DnaK等。结论：我们制备的炭疽无菌培养滤液中含有PA成分,PA是炭疽疫苗的重要保护性抗原。但PA以外的其他成分在抗炭疽免疫中起何种作用,是否参与诱发机体免疫应答有待进一步研究。     

脑水解物制备

脑活素是营养脑组织的药物,提高智力的保健品,是具有脑组织活性的多肽和脑组织氨基酸的脑水解物。我们以动物脑组织用同种动物的胰酶水解,获得的脑水解物中多呔含量为10％,氨基酸含量90％,可供输注     

化学发光测定人体内超氧化物歧化酶的实验报告

超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase SOD)能催化超氧阴离子自由基(Superoxide anion radicals O)的歧化反应,与抗衰老、抗炎症、抗氧毒性等有关。近年来我们应用化学发法(CL)测定血清铜锌超氧化物歧化酶(CuZn SOD)的活性。     

脑细胞激活因子植入对脑损伤修复的临床应用与实验研究

脑细胞激活因子植入对脑损伤修复的临床应用与实验研究解放军二五三医院狄风桐，王希良，刘仕山，何福全，郭美香，武新友近十年来，用胚胎脑组织进行移植研究受到重视，并取得了很大进展。临床上也开展了这方面的研究和应用。我们从１９８７年开始在这方面的动物实验和临...     

应用XOD—X—Luminol发光体系检测血清内SOD活性的实验报告

超氧化物歧化酶(Superoxide dis-mutase·SOD)是需氧生物体内的一种酶,其功能是催化超氧阴离子自由基(superoxide anion radicls O(?))的歧化反应,从而起到抗衰老、抗炎症、抗氧毒性等的作用。近年来我们应用XOD-X-Luminal发光测定了70例高血压病、150例精神分裂症、39例神经症和129例健康人血清内SOD的活性含量,结果报告如下:1 材料与方法     

流感病毒免疫防御机制研究进展

流感病毒感染引起免疫损伤的同时可以激发机体产生免疫应答,在病毒的清除与疾病的恢复及再次感染过程中发挥着有效的防御作用.尽管流感病毒经常发生变异,但自然感染诱导的免疫防御机制仍可提供一定程度的交叉保护作用.这一系列免疫应答的激发及形成包括多种分子及细胞的参与,其发生、发展及转归直接决定着疾病的严重程度及免疫预防的有效性.了解天然免疫应答、粘膜免疫应答及获得性免疫应答的激发与维持可为流感病毒的防治及疫苗的研制提供思路.