一种快速检测甲型流感病毒的方法

目的 开发一种快速、简便的基于胶体金免疫层析法（GICA）的试剂盒，以用于对甲型流感病毒的检测。方法以柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒，标记抗甲型流感病毒内部抗原的单克隆抗体。硝酸纤维素膜上包被两种抗甲型流感病毒单克隆抗体的混合液，制成免疫层析试纸。待测样品中的甲型流感病毒首先与胶体金标记抗体结合，后移动至硝酸纤维素上与固定的单克隆抗体发生反应，形成肉眼可见的红色带。结果GICA试纸条与甲1型和甲3型流感病毒共16种毒株均能发生特异性反应，与乙型流感病毒、副流感病毒、腺病毒和呼吸道合胞病毒无交叉反应。用三种不同甲型流感病毒毒株的不同浓度标本与美国同类经过FDA批准的产品比较，灵敏度相同。结论GICA试纸条灵敏度能够达到临床使用的要求，并具有简便快速、无需特殊仪器设备等优点，对甲型流感的诊断和流行病学调查具有十分重要的应用价值。     

某铁矿尘肺流行病学调查

报道:为了摸清铁矿接尘工人尘肺患病情况及分布规律,对某铁矿1986年底以前确诊的尘肺病人及其作业环境粉尘浓度进行了回顾性调查分析。结果:1967～1986年间作业场所空气中粉尘浓度为0.1～418.3mg/m~3(共采集粉尘样品14538个),平均为6.37mg/m~3。粉尘中游离SiO_2含量为5.1～9.3%。1963～1986年共确诊尘肺病人240名,累计患病率为9.02%。其中Ⅰ期136名,占病人总数的56.67%;     

死亡分子受体介导凋亡信号的研究进展

死亡分子受体与死亡分子相互作用引发的细胞凋亡倍受人们关注。Fas、TNFR、DR3/Wsl-1和CAR 4个死亡分子受体已被确定,它们参与免疫调节、CTL杀伤活性、肿瘤消退、移植排斥反应等并发挥着重要的生物学作用。     

氟尿嘧啶诱导Egr-1启动子调控造血因子基因表达对造血恢复的影响

目的 探索5-氟尿嘧啶(5-Fu)诱导Egr-1启动子调控造血生长因子基因表达对化疗后造血损伤的恢复作用.方法 构建携带Egr-1调控序列启动的GM-CSF和EGFP双顺反子基因pCIneo真核表达载体(Egr-EG);通过脂质体转染骨髓基质细胞系HFCL,挑出G418抗性的阳性克隆(HFCL/EG);采用流式细胞仪和倒置荧光显微镜观察EGFP绿色荧光表达的阳性细胞;在加入5-Fu的HFCL/EG细胞培养体系中,采用RT-PCR、Western印迹和ELISA检测GM-CSF的表达;采用活性氧抑制剂N-乙酰半胱氨酸鉴定化疗通过活性氧诱导Egr-1启动子CarG 序列调控下游基因表达的特异性.将HFCL/EG细胞输入荷瘤的重症联合免疫缺陷(SCID)小鼠体内,对其实施5-Fu化疗,观察外周血象动态改变和对肿瘤的影响.结果 构建了Egr-1调控序列启动的双顺反子基因表达载体(EgrEG);在HFCL/EG细胞中证实有外源性基因EGFP和GM-CSF的表达,在5-Fu处理后HFCL/EG细胞培养上清液GM-CSF含量较未加5-Fu组明显增高(P＜0.01);RT-PCR和Western印迹显示化疗后HFCL/EG细胞GM-CSF mRNA和GM-CSF蛋白表达增强.在5-Fu处理的HFCL/EG细胞中,N-乙酰半胱氨酸明显减少GM-CSF含量.实验组与对照组相比外周血白细胞下降幅度明显减轻,恢复加快,而各组间肿瘤抑制率与化疗组相关,而与外源基因表达无明显的差异.结论 5-Fu诱导Egr-1启动子调控的造血生长因子基因表达对化疗后的造血损伤具有一定的恢复作用.     

M2e通用流感疫苗的研究进展

M2基质蛋白是A型流感病毒膜蛋白,在A型流感病毒的生命周期中,M2具有重要的生物学功能,已成为抗病毒药物研究的靶蛋白.其胞外区M2e(M2 eetodomain,M2e)为24个氨基酸残基,该片段在多病毒株中具有极高的保守性.针对M2e产生IgG型抗体能够防止流感病毒引发的死亡,减少动物模型中流感的发病率.了解有关M2e疫苗的研究进展,以及关于M2e作为A型流感疫苗靶抗原的关键问题很重要.     

流感病毒免疫防御机制研究进展

流感病毒感染引起免疫损伤的同时可以激发机体产生免疫应答,在病毒的清除与疾病的恢复及再次感染过程中发挥着有效的防御作用。尽管流感病毒经常发生变异,但自然感染诱导的免疫防御机制仍可提供一定程度的交叉保护作用。这一系列免疫应答的激发及形成包括多种分子及细胞的参与,其发生、发展及转归直接决定着疾病的严重程度及免疫预防的有效性。了解天然免疫应答、粘膜免疫应答及获得性免疫应答的激发与维持可为流感病毒的防治及疫苗的研制提供思路。     

M2e通用流感疫苗的研究进展

M2基质蛋白是A型流感病毒膜蛋白,在A型流感病毒的生命周期中,M2具有重要的生物学功能,已成为抗病毒药物研究的靶蛋白。其胞外区M2e（M2 ectodomain,M2e）为24个氨基酸残基,该片段在多病毒株中具有极高的保守性。针对M2e产生IgG型抗体能够防止流感病毒引发的死亡,减少动物模型中流感的发病率。了解有关M2e疫苗的研究进展,以及关于M2e作为A型流感疫苗靶抗原的关键问题很重要。     

布鲁杆菌M16株pgm基因突变活菌苗株的构建和鉴定

目的 构建自杀性质粒载体,对布鲁杆菌M16株pgm基因进行精确突变,并对得到的pgm基因突变活菌苗株进行鉴定.方法 在puc19质粒载体上构建正向筛选标记--蔗糖敏感基因和反向筛选标记--卡那霉素抗性基因融合序列;用卡那霉素抗性基因融合序列对布鲁杆菌pgm基因进行修饰(插入突变),完成pucS1.6K自杀性质粒载体的构建;通过电转化获得布鲁杆菌M16株pgm基因突变菌株;应用PCR方法对pgm基因突变菌株进行鉴定.结果 鉴定结果显示,布鲁杆菌M16株pgm基因在卡那霉素抗性基因插入后失活,突变后的布鲁杆菌M16株pgm基因DNA片段长度约为3525 bp,与预期的相符,布鲁杆菌M16株pgm基因突变菌株构建成功.结论 构建的自杀性质粒载体能成功对布鲁杆菌进行精确毒力基因突变,为获得布鲁杆菌突变株提供了一个有效的技术平台,也为新型减毒活疫苗的研制奠定了基础.

Abstract：

Objective The construction of suicide plasmid vector could be used to make mutation of pgm gene which attenuates the virulent of Brucella melitensis strain 16, the research may lay a foundation for the development of novel live attenuated vaccines. Methods Sucrose sensitive gene as forward screening sign and fusion sequences of kanamycin resistance gene were constructed based on plasmid pucl9; pucS1.6K suicide plasmid vector was established by modifying pgm gene with fusion sequences of kanamycin resistance gene (insertion mutation); pgm gene mutation of Brucella melitensis strain 16 was obtained by electro transformation and mutation was confirmed by PCR amplification. Results The results showed that the identified Brucella melitensis strain 16 pgm gene was inactivated after insertion of kanamycin resistance gene, and the mutant pgm gene DNA fragment length was approximately 3525 bp, in line with expectations, Brucella pgm gene mutant melitensis strain 16 was successfully constructed. Conclusions The construction of suicide plasmid vector and precise mutation of Brucella melitensis strain 16 is successful, the study is not only provided an effective technology platform for constructing mutants of Brucella but also lays a foundation for the development of novel live attenuated vaccines.     

71例尘肺死亡原因分析

为探讨尘肺的死亡规律,更有效地开展对尘肺病的防治工作,我们采用回顾性调查方法,对我市27年来71例尘肺的死因进行分析,现报告如下。资料来源按全国尘肺流调要求,查阅27年尘肺诊断(复查)记录及档案资料,向有关单位(医疗卫生部门)、家属询问死亡的确切时间及死亡原因。结果分析1.一般情况:我市27年来共诊断尘肺369例,其中已死亡71例,总病死率为19.24％。死亡者年龄最大78.33岁,最小27.17岁,平均51.26±11.24岁;病程最长的26.58年,最短的0年(病理诊断),平均     

M2e通用流感疫苗的研究进展

M2基质蛋白是A型流感病毒膜蛋白,在A型流感病毒的生命周期中,M2具有重要的生物学功能,已成为抗病毒药物研究的靶蛋白.其胞外区M2e(M2 eetodomain,M2e)为24个氨基酸残基,该片段在多病毒株中具有极高的保守性.针对M2e产生IgG型抗体能够防止流感病毒引发的死亡,减少动物模型中流感的发病率.了解有关M2e疫苗的研究进展,以及关于M2e作为A型流感疫苗靶抗原的关键问题很重要.