癌胚抗原基因抑制对溶瘤腺病毒H101治疗人食管癌裸鼠皮下移植瘤的影响

目的:观察癌胚抗原(CEA)特异性基因沉默对溶瘤腺病毒H101杀伤食管癌EC9706细胞作用的影响,以探讨影响H101敏感性的内在因素.方法:利用RNA干扰(RNAi)技术,构建针对人食管癌EC9706细胞的CEAsiRNA载体,通过基因转染,在EC9706细胞中建立稳定的CEA基因沉默体系,并以空载体转染和未进行转染的EC9706细胞作对照,建立人食管癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型,用H101进行瘤内注射.采用Real Time PC和Western Blot方法检测移植瘤组织中CEA的表达,测量肿瘤体积.结果:降低CEA在mRNA和蛋白质水平的表达,对人食管癌EC9706细胞裸鼠皮下移植瘤成瘤时间和体积无影响,经H101瘤内注射治疗后,干扰组、空载体组和对照组肿瘤体积分别为(50.16±19.01)、(208.13±72.29)、(219.46±46.56)mm3,干扰组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),而空载体组与对照组比较差异无统计学意义(P<0.05).论:抑制食管癌EC9706细胞中CEA的表达,可引起H101敏感性增加.     

维生素C对乳腺癌细胞紫杉醇化疗的增敏作用

目的:探讨维生素C(VitC)对乳腺癌细胞紫杉醇(PTX)化疗的增敏作用及机制。方法:分别将VitC与PTX单独或联合作用原代培养的人乳腺癌细胞后,用MTS法、流式细胞仪、Westernblot检测细胞的增殖、凋亡以及caspase-3与Bcl-2的表达。结果:单独用药时,VitC对乳腺癌细胞的IC_(50)为2.5mmol/L,PTX为8.6nmol/L,但联合1mmol/L的VitC后,PTX对乳腺癌细胞的IC_(50)为2.8nmol/L;VitC单用有一定的促乳腺癌细胞凋亡作用,PTX与VitC联用后的促乳腺癌细胞凋亡作用明显大于PTX单用,且随着VitC浓度的增加而增强(均P0.05);PTX单独作用后,乳腺癌细胞caspase-3的表达上调,Bcl-2的表达下调,联合VitC后该作用更加明显,且随VitC浓度的增加而增加(均P0.05)。结论:VitC可提高乳腺癌细胞PTX化疗的敏感性,该作用可能与其进一步提高caspase-3、降低Bcl-2的表达有关。     

异硫氰酸胍—酚—氯仿一步法提取组织中的RNA

为寻找一种简便、低消耗、提取高质量ＲＮＡ的方法。基于异硫氰酸胍－酚－氯仿一步法，省去变性液Ｄ－二次溶解ＲＮＡ提取组织中的ＲＮＡ。结果：从２００多例肿瘤组织中提取出高质量的ＲＮＡ，所需费用与购试剂盒相比节约了７５％。结果提示：异硫氰酸胍－氯仿一步法是一种简便、经济、适合大量样本的ＲＮＡ提取方法。     

人食管鳞状上皮细胞癌变过程中P53基因蛋白产物的表达

选取３５例食管癌手术切除标本，多点取材，使每例中至少含有单纯增生、不典型增生粘膜上皮和癌组织，建立一个食管癌发生的多阶段模型。用免疫组化法检测了Ｐ５３基因蛋白产物在这一过程中的变化，并用ＰＣＲ技术检测了３５例标本中不同病变人乳头状瘤病毒１６、１８和３５型ＤＮＡ的存在状态。结果显示，６０％（２１／３５）的病例存在有Ｐ５３基因蛋白产物的高表达。凡癌组织表达阳性的病例，其对应的单纯增生，不典型增生粘膜上     

表达mIL-21的溶瘤痘苗病毒对小鼠乳腺癌的治疗作用

目的:观察溶瘤痘苗病毒VV△TK△N1L-RFP和VV△TK△N1L-mIL-21对小鼠乳腺癌细胞系JC、TUBO和4T1的体内外治疗效果.方法:采用MTT法比较VV△TK△N1L-RFP和VV△TK△N1 L-mIL-21两种病毒在不同质量浓度下对乳腺癌JC、TUBO和4T1细胞的体外杀伤效果,用TCID50法检测病毒在三株乳腺癌细胞株中的复制能力,用ELISA法检测两种病毒感染细胞后上清液中mIL-21的水平.建立三阴性乳腺癌4T1和Her-2扩增型乳腺癌TUBO细胞移植瘤模型,检测两种病毒的治疗作用.结果:VV△TK△N1L-RFP和VV△TK△N1L-mIL-21两种病毒在乳腺癌JC、TUBO和4T1细胞中均具有复制能力,低剂量的病毒就对乳腺癌细胞产生明显的杀伤效应;VV△TK△N1 L-mIL-21感染的细胞上清中检测到高表达的mIL-21蛋白.在4T1乳腺癌细胞移植瘤模型中,病毒治疗无明显效果(P＞0.05);在TUBO乳腺癌细胞移植瘤模型中,两种病毒均能显著抑制肿瘤生长(P ＜0.05或P＜0.01),延长荷瘤小鼠生存期(P＜0.01).结论:VV△TK△N1L-RFP和VV△TK△N1 L-mIL-21两种病毒在乳腺癌细胞中具有特异性增殖并杀伤肿瘤细胞的能力,在体内两种病毒对Her-2扩增型和三阴性乳腺癌具有不同的治疗效果.     

肿瘤抑制基因P53及其与肿瘤关系的研究进展

肿瘤抑制基因Ｐ５３及其与肿瘤关系的研究进展ＲＥＳＥＡＲＣＨＡＤＶＡＮＣＥＳＯＦＴＵＭＯＲＳＵＰＰＲＥＳＳＯＲＧＥＮＥＰ５３ＡＮＤＩＴ＇ＳＲＥＬＡＴＩＯＮＳＨＩＰＷＩＴＨＣＡＮＣＥＲ王尧河综述（河南医科大学病理学教研室郑州４５００５２）肿瘤抑制基因是当...     

建立乳腺癌组织标本库标准化程序的初步研究

目的:探讨建立乳腺癌标本库的标准化程序,为建立系统的、规范的乳腺癌组织标本库及信息管理体系奠定基础.方法:收集乳腺癌患者术中的肿瘤组织、癌旁组织、远端正常组织标本,并收集部分患者血标本提取血清、血浆及淋巴细胞,所有组织标本均深低温保存.采用一套信息管理体系对于标本进行管理.结果:共收集22例乳腺癌患者新鲜组织及血样标本共520份,其中导管内癌2例,小叶原位癌3例,浸润性导管癌10例,浸润性小叶癌7例;全套标本者19例;标本留取时间平均为(19.38±10.16) min;随机抽取20份肿瘤组织提取DNA和RNA作质量监测,合格率达到90％.结论:建立系统的、规范的乳腺癌组织标本库及信息管理体系,将为乳腺癌的基础与临床研究提供物质与信息资源.     

谷胱甘肽硫转移酶同功酶基因在食管癌组织中的表达

采用ＲＮＡ斑点杂交分析方法，对４０例食管癌组织和相对应的正常粘膜组织中谷胱甘肽硫转移酶（ＧｌｕｔａｔｈｉｏｎｅＳｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＧＳＴｓ）同功酶基因ＧＳＴπ、ＧＳＴα和ＧＳＴμ基因的表达情况进行研究，结果食管癌组织中ＧＳＴπ基因表达阳性率为７７．５％，在相应的正常粘膜组织中表达的阳性率为９０．０％。在食管癌组织中ＧＳＴα和ＧＳＴμ基因表达水平较低，表达阳性率分别为３５．０％和２０．０％，而正常粘膜组织中ＧＳＴα和ＧＳＴμ基因表达的阳性率分别为２０％和１５％，ＧＳＴｓ在癌组织中表达阳性率与正常粘膜组织相比，Ｐ＞０．０５。ＧＳＴπ基因表达阳性率明显高于ＧＳＴα和ＧＳＴμ基因，Ｐ＜０．０５。结果提示：ＧＳＴｓ同功酶基因在食管癌发生发展中基因转录水平增高，ＧＳＴπ是食管癌中ＧＳＴｓ同功酶存在的主要形式。     

新型溶肿瘤腺病毒Ad-TD-RFP对人鼻咽癌细胞的治疗作用

目的 探讨新型溶肿瘤腺病毒Ad-TD-RFP对人鼻咽癌细胞C666-1的体内外治疗作用.方法 用细胞毒性检测法(MTS法)测定溶肿瘤腺病毒Ad-TD-RFP和对照病毒dl1520对鼻咽癌细胞C666-1的杀伤作用;半数组织培养感染剂量(TCID50)法检测Ad-TD-RFP和dl1520不同时间点(24 h、48 h、72 h、96 h)在鼻咽癌细胞C666-1中的复制能力;人鼻咽癌细胞C666-1 BALB/c裸鼠皮下成瘤,检测Ad-TD-RFP和dl1520对肿瘤大小的影响.结果 新型溶肿瘤腺病毒Ad-TD-RFP和对照病毒dl1520对鼻咽癌细胞C666-1的50％最大效应浓度(EC.)分别为(107.6±3.2) pt/细胞和(174.1±4.0) pt/细胞,差异有统计学意义(t=22.6,P＜0.001).在鼻咽癌细胞C666-1中在不同时间点(24h、48 h、72 h、96 h)Ad-TD-RFP是dl1520复制能力的3～14倍,差异有统计学意义(t值分别为33.6、23.4、20.8和17.3,P值均＜0.001).磷酸盐缓冲液组、dl1520治疗组和Ad-TD-RFP治疗组在治疗67 d后,移植瘤平均体积分别约为(1765.5±713.9)mm3、(1036.9±623.8)mm3、(420.8±238.7 )mm3,三组相比差异有统计学意义(F=12.0,P＜0.05).结论 新一代溶肿瘤腺病毒Ad-TD-RFP在体内外对鼻咽癌细胞C666-1有很好的治疗效果,为将来鼻咽癌病毒基因治疗提供一定的实验基础.     

RT-PCR检测食管鳞癌组织中GST-π基因的表达

为了解原发性食管癌组织中ＧＳＴπ基因的表达情况，用ＲＴＰＣＲ方法定量检测了食管癌组织及相对应的正常食管粘膜组织中ＧＳＴπ基因的表达。结果：在癌组织中ＧＳＴπ基因表达的阳性率为８０．０％，在癌旁正常粘膜组织中为８６．６％。但在癌组织中ＧＳＴπ基因表达的强度大于正常粘膜组织。食管癌组织分化越差，ＧＳＴπ基因阳性表达率越低，Ｐ＜０．０５。结果提示：在原发性食管组织中ＧＳＴπ基因存在较高频率的阳性表达，在食管癌的发生发展中可能起着重要作用。