中医肿瘤领域症状评价现状、问题及对策

中医药在改善肿瘤复杂临床症状方面具有独特优势,但症状评价方法的不足严重制约了中医药发挥其优势.本研究在总结现有症状学评价方法的基础上,认为中医肿瘤领域症状评价主要存在以下问题:症状选择缺乏统一标准;症状评价缺乏具体实施规范;多症状量化方法缺乏科学依据;不同治疗阶段缺乏特异性量表;潜在症状指标难以走向临床应用等.针对上述问题,提出建立中医肿瘤症状评价标准与实施规范;深入探索症状群量化方法;重视中医PRO量表的后续考评及验证工作;开发阶段特异性症状量表;挖掘新的症状评价方法等,以期建立兼具科学性和中医诊疗特色的中医肿瘤症状学评价体系.     

介绍一种检测慢性粒细胞白血病外周血白细胞BCR／ABL融合蛋白的方法

目的建立一种检测外周血白细胞费城染色体编码融合基因产物（BCR／ABL）融合蛋白（P210）的方法，为临床提供特异、灵敏、快速诊断慢性粒细胞白血病（CML）的新方法。方法采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分离BCR／ABL融合蛋白，用包括蛋白电泳转膜与单克隆抗体结合显色等步骤，将分离的物质转移至硝酸纤维索薄膜（NC膜）上与特异的单克隆抗体结合形成抗原抗体复合物，用增强的免疫化学发光法（ECL）对区带进行处理。结果对68例符合法美英协会（FBA）分型的CML患者外周血白细胞的BCR／ABL融合基因表达产物进行检测，结果全部为阳性，而20例正常献血者全部阴性。结论外周血取材方便，患者无痛苦，该检测方法对诊断CML是一种特异性强、灵敏度高的方法。     

促红细胞生成素ELISA试剂盒的建立及其方法学研究

[目的]建立一种检测血清促红细胞生成素（EPO）的双抗体夹心ELISA方法,建立试剂盒,并且对其临床检测方法学进行研究。[方法]EPO抗体包被96孔板,以正常人血清和临床血清为标本,用ELISA法观察其灵敏度、回收率、线性试验、稳定性。[结果]最佳包被抗体浓度为1：600,最佳抗原工作浓度为1：100,酶标抗体工作浓度为1：5000。标准曲线的回归方程为Y=0．017x＋0．3002,相关系数r=0．9710。灵敏度为0．46mU／ml,高低浓度样品平均回收率分别为106．74％、104．78％,批内变异为3．04％～7．96％,批间变异则为1．38％～12．92％。[结论]该方法建立了一种定量检测EPO的ELISA试验,敏感性、特异性、准确度均良好,提供了临床上快速、准确、方便检测EPO的工具。     

抗高血压因子的分布及其舒血管效应

对抗高血压因子（AHF）的分布特点、不同种属来源的AHF降压效应和舒血管作用以及其是否为已知的血管活性物质等进行观察。结果表明，不论是人还是其他哺乳动物（如大鼠、免、狗等）的红细胞中均存在AHF。在剂量相同的情况下、AHF对大鼠的降压作用以及对大鼠主动脉的舒张作用五种属差异。随着AFH剂量的增加，其降压作用均呈明显的剂量依赖关系。不同剂量组间降压作用具有明显差异（P＜0．05或P＜0.01）。所观察的大鼠各种组织（如脑、心、肾、肝和红细胞等），以红细胞AHF的降压活性最高。多种已知的血管活性物质的特异受体拮抗剂只能阻断其相应的血管活性物质对血压的作用，对AHF的降压活性无影响。     

真性红细胞增多症患者JAK2V617F突变的临床意义

目的 探讨真性红细胞增多症(PV)患者JAK2V617F突变的临床意义.方法 用等位基因特异性PCR法检测26例PV、10例继发性红细胞增多症(SE)、5例Ph+慢性粒细胞白血病(CML)患者,以及5例健康志愿者的JAK2V617F突变,并经DNA测序验证.用PCR-限制性片段长度多态性分析检测JAK2V617F突变状态,分析突变状态与PV临床及实验室特征的关系.结果 PV患者92.3%(24例)出现JAK2V617F 突变,其中纯合子突变7例,杂合子突变17例;纯合子突变者初诊时Hb及乳酸脱氢酶高于杂合子者(P＜0.05).SE、Ph+CML患者及健康志愿者均未检出JAK2V617F突变.结论 JAK2V617F 突变可能成为PV的分子学诊断标准.     

血浆血小板激活因子与急性肺损伤相关性及"神农33"注射液对其影响的观察

目的：探讨内毒素（ＬＰＳ）诱导急性肺损伤（ＡＬＩ）时血小板激活因子（ＰＡＦ）含量变化情况及“神农３３”注射液对ＰＡＦ及ＡＬＩ的影响。方法：给Ｗｉｓｔａｒ大鼠静脉注射ＬＰＳ,制成ＡＬＩ模型;采用反相高效液相色谱法检测ＬＰＳ攻击后１小时大鼠血浆ＰＡＦ含量,观察ＬＰＳ攻击后３小时大鼠肺湿、干重,光镜观察大鼠肺病理形态学变化。结果：ＡＬＩ组动物的肺湿重、湿干重比、肺含水量均明显高于正常对照组（Ｐ均＜０．０５）,肺病理组织学改变明显且严重。ＡＬＩ组大鼠血浆ＰＡＦ含量明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０１）,单独给予“神农３３”注射液无明显降低ＰＡＦ的作用（Ｐ＞０．０５）,而以“神农３３”注射液保护的大鼠ＰＡＦ含量明显低于ＡＬＩ组,同时肺损伤也较轻。结论：ＰＡＦ在ＬＰＳ诱导的ＡＬＩ中起重要作用,“神农３３”注射液有拮抗ＰＡＦ及保护肺脏的作用     

骨代谢指标在临床诊断及治疗中的应用(三)

预测骨丢失和骨折生化指标的测定可以用来评价骨转换,客观地反映骨形成和骨吸收的情况,用来指导临床。绝经妇女骨质疏松的发展取决于自身峰值骨量的高低和绝经后的骨丢失速率,骨量与反映骨代谢的生化指标合用可预测骨丢失和骨折。绝经初期,骨丢失加快,其后2-4年骨盐含量的减少可通过骨转换生化指标的联合检测来进行预测,并以此作为骨质疏松高风险女性的筛查程序。鉴于个体之间骨转换生化指标的临界值差异变化较大而骨丢失率的变化又相对较小,仅仅以骨转换生化指标的检测来预测骨丢失和发生骨质疏松或骨折的风险,尚不成熟。然而网状骨网格解体风险增加的高骨转     

层粘连蛋白-5的研究进展

上皮基底膜是由细胞外基质分子组成的复合网架 ,这些分子具有调节组织完整性及体内平衡作用 ,并控制组织修复及肿瘤形成的形态学的发生。层粘连蛋白家族 (LN)是具有多种生物学功能细胞外基质 (ECM)的糖蛋白 ,它们在基底膜的构建及细胞黏附、生长、迁移和分化中扮演着至关重要的角色[1] 。而层粘连蛋白 5 (laminin 5 ,LN 5 )在促进基层表皮细胞和其他上皮细胞的黏附中 ,比其他LN作用更有效。近年来 ,许多国外学者对LN 5的分子结构及其功能进行研究 ,并在皮肤的修复与移植、肿瘤的发生与迁徙作用及与遗传性大疱性表皮松懈症 (JEB)研究…     

妊娠相关血浆蛋白A的原核表达及蛋白纯化

目的构建原核表达PAPP-A重组蛋白,并对蛋白质进行纯化。方法根据DNAstar软件分析获得的编码PAPP-A特异抗原表位,利用Primer Premier 5.0软件设计引物,以PAPP-A c DNA-质粒转化菌液为模板,进行PCR扩增。PAPP-A的DNA和p ET42a质粒分别双酶切,经琼脂糖凝胶电泳及胶回收后进行连接反应,转化至大肠埃希菌Top10,筛选阳性克隆经测序鉴定正确后,转化至大肠埃希菌BL21,诱导产生PAPP-A重组蛋白,利用镍柱初步纯化及离子交换层析柱进一步纯化,用SDS-PAGE及DEAE层析鉴定重组抗原蛋白。结果筛选出抗原表位集中区,在大肠埃希菌BL21中高效表达了重组的PAPP-A蛋白,经过镍柱及离子交换层析纯化后,PAPP-A浓度为0.22 g/L,DEAE层析分析证实其纯度较高。结论成功筛选出PAPP-A的抗原表位集中区,并制备了重组抗原蛋白,为PAPP-A的后续临床研究提供依据。