丁酸钠对50%总体表面积烫伤大鼠肺血管内皮糖萼层保护作用和机制研究

目的研究丁酸钠对严重烫伤大鼠肺血管内皮糖萼层的保护作用及可能机制。 方法将144只成年雄性SD大鼠按照随机数字表法分成假伤＋盐水组(n＝24),假伤＋丁酸钠组(n＝24),烫伤＋盐水组(n＝48),烫伤＋丁酸钠组(n＝48)。制作50%总体表面积Ⅲ度烫伤模型：烫伤＋盐水组和烫伤＋丁酸钠组大鼠麻醉、备皮后置于80 ℃水浴锅中(背部15 s,腹部8 s,双下肢15 s),假伤＋盐水组和假伤＋丁酸钠组大鼠浸入37 ℃水相同时间。假伤＋丁酸钠组和烫伤＋丁酸钠组立即皮下注射丁酸钠(300 mg/kg);假伤＋盐水组和烫伤＋盐水组立即皮下注射0.5 mL 0.9%氯化钠溶液。于伤后3、6 h分别处死动物并取材,测定肺泡灌洗液蛋白(BALF)浓度,肺湿干重比;采用蛋白质印迹法和酶联免疫法检测肺组织多配体蛋白聚糖-1(SDC-1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白表达和含量率的变化。数据比较采用单因素方差分析和Newman-Kueuls法。 结果(1)伤后3、6 h,烫伤＋盐水组BALF蛋白浓度分别为(0.657 5±0.045 5)、(0.684 1±0.076 0) mg/mL,高于假伤＋盐水组[(0.476 6±0.065 8) mg/mL],差异均有统计学意义(q＝7.188、8.243,P值均小于0.05);伤后3、6 h,烫伤＋盐水组肺湿干重比分别为4.545 1±0.444 4,4.795 1±0.606 6,均高于假伤＋盐水组(2.636 0±0.157 5),差异均有统计学意义(q＝10.950、12.380,P值均小于0.05)。伤后3、6 h,烫伤＋丁酸钠组BALF蛋白浓度分别为(0.541 0±0.071 )、(0.538 1±0.063 6) mg/mL,均低于烫伤＋盐水组[(0.657 5±0.045 5)、(0.684 1±0.076 0) mg/mL],差异均有统计学意义(q＝4.610、5.799,P值均小于0.05);且伤后3、6 h,烫伤＋丁酸钠组肺湿干重比值3.626 6±0.446 1、3.477 9±0.510 7,均低于烫伤＋盐水组,差异均有统计学意义(q＝5.269、7.555,P值均小于0.05)。(2)蛋白质印迹法检测结果显示,伤后3、6 h,烫伤＋盐水组肺组织SDC-1表达水平分别为0.376 1±0.075 7、0.329 8±0.074 9,假伤＋盐水组肺组织SDC-1表达水平均为1.000 0±0,2组比较差异均有统计学意义(q＝13.280、14.260,P值均小于0.05)。伤后3、6 h,烫伤＋丁酸钠组肺组织SDC-1表达水平分别为0.760 5±0.207 1、0.678 3±0.117 9,均高于烫伤＋盐水组,差异均有统计学意义(q＝8.180、7.417,P值均小于0.05)。伤后3、6 h,烫伤＋盐水组肺组织MMP-9、VEGF表达水平分别为(MMP-9：2.683 4±0.318 8、2.655 6±0.448 9;VEGF：3.806 3±0.703 8、2.850 0±0.396 3),假伤＋盐水组MMP-9、VEGF表达水平均为1.000 0±0,烫伤＋盐水组均低于假伤＋盐水组,差异均有统计学意义[(MMP-9: q＝9.356、9.202),(VEGF: q＝12.700、8.375); P值均小于0.05 ]。伤后3、6 h,烫伤＋丁酸钠组肺组织MMP-9、VEGF表达水平分别为(MMP-9：0.995 2±0.378 5、1.527 1±0.342 8;VEGF：1.574 6±0.216 0、1.721 5±0.341 8),均低于烫伤＋盐水组,差异均有统计学意义[(MMP-9: q＝9.383、10.100),(VEGF: q＝6.272、5.108); P值均小于0.05]。(3)酶联免疫法检测结果显示,伤后3、6 h,烫伤＋盐水组与假伤＋盐水组比较,肺组织MMP-9、VEGF蛋白含量均显著增高,差异均有统计学意义[(MMP-9: q＝8.850、8.436), (VEGF：q＝9.090、9.186); P值均小于0.05];SDC-1蛋白含量显著降低,差异均有统计学意义(q＝8.296、8.331,P值均小于0.05)。伤后3、6 h,烫伤＋丁酸钠组肺组织MMP-9、VEGF蛋白含量均低于烫伤＋盐水组,差异均有统计学意义[(MMP-9: q＝6.579、6.939),(VEGF：q＝7.853、7.768);P值均小于0.05];SDC-1蛋白含量高于烫伤＋盐水组(q＝6.265、4.456,P值均小于0.05)。 结论丁酸钠能减轻严重烫伤大鼠肺组织水肿,保护肺血管内皮糖萼层,其作用机制可能与抑制MMP-9和VEGF通路相关。     

电针足三里穴对Ⅲ度烫伤大鼠口服补液后胃排空率和胃黏膜血流的影响

目的研究电针足三里穴对Ⅲ度烫伤大鼠口服补液时胃排空率和胃黏膜血流的影响。 方法采用随机数字表法将120只SPF级成年大鼠分为5组：假伤后胃内补液组(GR组)、烫伤后胃内补液组(SGR组)、烫伤后电针＋胃内补液组(SGR＋EA组)、双侧迷走神经切断＋烫伤后胃内补液(VGX＋SGR组)、双侧迷走神经切断＋烫伤后电针＋胃内补液组(VGX＋SGR＋EA组),每组24只。在1 000 mL无菌蒸馏水中,加入3.5 g丙酮酸钠、3.5 g氯化钠,1.5 g氯化钾和20.0 g葡萄糖,配置丙酮酸钠口服补液盐(Pyr-ORS),调节pH值至7.35。将大鼠麻醉后分别行颈动脉、股静脉和股动脉分离术并置管。烫伤大鼠采用沸水(100 ℃,15 s)造成背部约35%总体表面积(TBSA)的Ⅲ度烫伤,假烫伤大鼠采用温水浸泡(37 ℃,15 s)。烫伤后即刻,每只大鼠给予皮下注射0.5 mL 0.9%氯化钠溶液和500 mL丁丙诺啡用于止痛。采用输液泵立即经胃管输注Pyr-ORS,持续1 h。VGX＋SGR组和VGX＋SGR＋EA组大鼠烫伤前进行双侧迷走神经切断术。SGR＋EA组和VGX＋SGR＋EA组,选择足三里穴进行针刺,连接电针仪,强度为2 mA,2～100 Hz,针刺深度7 mm,在给予烫伤大鼠Pyr-ORS的胃内补液后,持续电针刺激0.5 h。分别于烫伤后2、4 h检测各组大鼠胃排空率、胃黏膜血流量。数据比较采用单因素方差分析和LSD－t检验。 结果烫伤后2、4 h,SGR组、SGR＋EA组、VGX＋EA组和VGX＋SGR＋EA组大鼠的胃排空率[2 h：(16.5±3.2)%、(22.6 ± 3.7)%、(13.6±3.0)%、(14.2±3.2)%;4 h：(12.9± 2.4 )%、(17.1±2.3)%、(10.8±2.7)%、(12.7±2.5)%]均分别低于GR组[2 h：(45.9±4.6)%;4 h：(42.4±5.7)%],差异均有统计学意义[2 h：(t＝18.18、13.67、20.37、19.60,P值均小于0.05);4 h：(t＝28.29、24.71、28.67、27.96,P值均小于0.05)。SGR＋EA组的胃排空率高于SGR组、VGX＋SGR组和VGX＋SGR＋EA组,差异均有统计学意义[2 h：t＝4.32、6.54、5.94,P值均小于0.05);4 h：(t＝4.38、6.15、4.49,P值均小于0.05)]。烫伤后2、4 h,SGR组、SGR＋EA组、VGX＋EA组和VGX＋SGR＋EA组大鼠胃黏膜血流量[2 h：(54.0±7.3)、(74.6±8.7)、(42.0±5.5)、(45.2±6.2) BPU;4 h：(46.0±6.8)、(65.6±10.1)、(37.8±5.6)、(42.7±6.4) BPU]均分别明显低于GR组[2 h：(142.0±18.1) BPU;4 h：(127.4±16.5) BPU],差异均有统计学意义[2 h：(t＝15.67、11.67、18.35、17.56,P值均小于0.05);4 h：(t＝15.80、11.07、17.81、16.58,P值均小于0.05)];SGR＋EA组与SGR组、VGX＋SGR组和VGX＋SGR＋EA组比较,差异均有统计学意义[2 h：(t＝6.28、10.97、9.53,P值均小于0.05);4 h：(t＝5.58、8.33、6.63,P值均小于0.05)]。 结论电针足三里穴能促进Ⅲ度烫伤大鼠口服补液后的胃排空率,增加胃黏膜血流,提高口服补液的疗效,其作用机制可能与兴奋迷走神经有关。     

杆状病毒表达SARS冠状病毒核蛋白抗原性的研究

目的 对杆状病毒表达SARS冠状病毒NP抗原性进行分析与比较。方法 利用SDS—PAGE、Western—Blot和ELISA证明重组核蛋白(rSN)在昆虫细胞获得高效表达．具有特异免疫反应原性。结果 表达rSN的昆虫细胞裂解、稀释后直接包被ELISA板．来检测SARS-CoV康复病人血清特异抗体，敏感性稍高于Veto细胞培养的全病毒(OD分别为2．8和0．6)。与健康人血清不发生特异反应(OD值为0．01)；表达rSN昆虫细胞用于间接免疫荧光，快速检测血清特异抗体反应。同样表现了良好的敏感性和特异性。结论昆虫细胞表达rSN有望替代SARS-CoV全病毒，作为安全、敏感和特异的诊断抗原。应用于ELISA和IFA血清学检测。     

卡巴胆碱对肠上皮细胞氧化损伤的保护作用

目的:探讨卡巴胆碱对大鼠肠上皮细胞(intes- tinal epiIhelia cell,IEC)过氧化损伤的影响.方法:将H_2O_2加入IEC培养液中制成IEC过氧化损伤模型.实验设对照组、H_2O_2组(2.5 mmol/L)、卡巴胆碱组(卡巴胆碱100μmol/L).用四甲基偶氮唑盐(MTT)实验检测IEC的存活率,测定培养液中测乳酸脱氢酶(LDH)和细胞中丙二醛(MDA)含量.结果:与对照组相比,H_2O_2组LDH(7.40±2.10 vs 0.81±0.12,P<0.01)、MDA水平显著增高(P<0.0 1),细胞活力明显降低(37.25%±0.80%vs 100%±0.13%,P<0.01).卡巴胆碱组与H_2O_2组相比,LDH漏出MDA形成明显减少(4.64±1.31 vs 7.40±2.10,P<0.01),细胞的细胞活力显著增加(78.70%±2.80%vs 37.25%±0.80%,P<0.01).结论:卡巴胆碱对大鼠IEC过氧化损伤具有保护作用.     

线粒体功能障碍与脓毒性休克及其预后有关

脓毒症引起的多器官功能衰竭是危重病患者死亡的主要原因之一 ,然而患者死亡的机制仍有待阐明。以往的研究表明 ,脓毒症患者和动物体内组织氧张力增加明显 ,组织耗氧量降低。由于线粒体氧化酶产生 ATP的氧耗量占细胞氧耗量的 90 %以上 ,一氧化氮 (NO)在体外可抑制线粒体的呼吸 ,导致线粒体功能障碍。伦敦大学医学院的研究人员据此提出 ,由线粒体功能障碍引起的器官衰竭 ,可能与脓毒症时 NO的大量释放有关。他们以 ICU病房 2 8名脓毒症患者作为研究对象 ,其中 12人死亡 ,16人存活 ,另选 9名外科患者为对照组。在确诊后 2 4小时内取骨骼肌…     

缺血-再灌注复合内毒素血症大鼠血酮体变化及意义

目的：探讨创伤并发感染时肝细胞线粒体的损伤及意义。方法：复制大鼠缺血－再灌注复合内毒素血症模型,测定血乙酰乙酸（AcAc),β－羟丁酸（β-OHBA）及其比值,同时测定相关指标的变化,并进行肝组织光镜病理形态学检查。结果：休克加复苏组,休克复苏加内毒素I组（输内毒素后2小时）以及休克复苏加内毒素II组（输入内毒素后24小时）血AcAc均较健康对照组有不同程度升高,但无统计学差异,血β-OHBA在休克加复苏组,休克复苏加内毒素I组和II组均显著升高（P＜0．05或P＜0．01）,AcAc/β－OHBA比值伤后各组均显著降低（P均＜0．05）,血丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）则均显著升高（P＜0．05或P＜0．01）,结论：AcAc,β-OHBA及其比值在血中变化能较敏感地反映创伤合并内毒素血症时肝细胞线粒体的损伤,可作为评价肝细胞代谢状况的指标。     

电刺激迷走神经对内毒素血症所致急性肺损伤的影响

目的 :研究刺激传出迷走神经对内毒素〔即脂多糖 (L PS)〕引起大鼠急性肺损伤的影响。方法 :雄性Wistar大鼠 70只 ,随机分为 7组。切断大鼠双侧颈部迷走神经干或做假手术对照 ,将左侧迷走神经远端连接刺激电极 ,于静注 L PS(10 m g/ kg)即刻持续电刺激 (5 V,2 ms,1Hz) 2 0分钟 ,每间隔 10分钟后重复刺激 ,每次2 0分钟 ,共刺激 3次。分别在 1、1.5和 2小时检测实验和对照各组肺组织中肿瘤坏死因子α(TNFα)、髓过氧化物酶 (MPO)以及丙二醛 (MDA)含量。结果 :静注 L PS后迷走神经刺激组肺组织中 TNFα、MPO和 MDA含量均显著降低 ,炎性病理改变减轻。结论 :迷走神经兴奋能抑制 L PS攻击大鼠肺组织炎症介质产生 ,减轻肺组织病理损害 ,对 L PS所致急性肺损伤动物有潜在保护作用。     

血管内皮细胞生长因子(VEGF) 能使小鼠的毛发变粗

美国马萨诸塞州总医院和哈佛大学医学院的研究人员发现 ,血管内皮细胞生长因子 (VEGF)能使小鼠的毛发变粗或增厚 ,而有希望为男性脱发提供一种新的治疗方法。男性秃发或脱发是一种遗传性疾病 ,能引起许多中年男性头发脱落。科学家发现 VEGF能促使毛囊处的血管增大 ,为毛发提供更多的营养 ,而促进其生长。科学家建立了一株基因工程小鼠 ,这种小鼠的毛囊细胞能持续产生 VEGF,使毛囊周围的血管增大 ,血管周围的发根变粗 ,导致毛发变厚。研究还观察到小鼠并不能长出更多毛发 ,只是使毛发变粗。当剃去毛发后 ,小鼠的毛发会更快的长出来。研…