NF-κB p65 siRNA对延迟性排斥反应的抑制作用

目的 探讨核因子kappa B(NF-κB) p65的小干扰RNA (siRNA)对延迟性排斥反应的抑制作用.方法血管内皮细胞(EOMA)分为7组:A组(空白对照),B组(阴性对照),C组(TNF-α处理),D组(siRNA处理),E组(scramble siRNA处理),F组(TNF-α+ siRNA处理),G组(TNF-α+scramble siRNA处理).用阳离子脂质体LipofectamineTM 2000作为转染试剂将化学合成的小鼠NF-κB p65 siRNA转染入相应的EOMA细胞,24 h后在C组、F组和G组中加入TNF-α(终浓度为20 ng/ml).于TNF-α加入后的6h提取各组细胞总RNA,RT-PCR法测定EOMA细胞内E选择素(E-selectin)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、白细胞介素1α(IL-1α)和血管细胞黏附分子1(VCAM-1)水平.结果 F组EOMA细胞内E-selectin、ICAM-1、IL-1α和VCAM-1表达明显高于A组,的明显低于C组和G组(P＜0.01).结论 特异性siRNA抑制NF-κB p65表达可以有效抑制延迟性排斥反应.     

直视下冠状动脉结扎法制作大鼠心肌缺血模型初步探讨

目的探讨如何成功建立心肌梗死大鼠模型,减少动物死亡率。方法28只SD大鼠,采用直视下结扎左冠状动脉前降支造成心肌梗死,分析各操作过程中的细节对大鼠死亡率的影响。结果左前降支冠状动脉结扎成功率100％。28只心肌梗死组大鼠,术中死于心室颤动和心跳呼吸骤停4只,术后7d内死于心力衰竭2只、死于肺部感染2只,存活4周大鼠共20只,存活率71．4％。11只假手术组大鼠全部存活。结论本实验采用较常用的冠状动脉结扎制作心肌梗死模型的方法,并在手术过程中作了相应的改进,结果证明该方法操作简单、模型成功率高,结果可靠,为进一步研究心肌梗死,奠定了坚实的基础。