一例Y染色体长臂大片段缺失患者的缺失定位分析

目的 从分子遗传学角度对1例无精子症患者Y染色体无精子因子(azoospermia factor,AZF)区域缺失片段进行定位分析.方法 根据Y染色体遗传物理图谱,采用多重PCR技术扩增Y染色体AZFa区sY84、sY86、sY87,AZFb区sY102、sY117、sY118、sY119、sY115、DYS132、DYS385、sY1015、sY121、sY125、sY127、sY129、sY134,AZFd区sY152,AZFc区sY1258、sY1291、sY254、sY255、sY158、sY1201,Yq末端sY160等24个序列标签位点(sequence tag sites,SIS).结果 所扩增的SIS只有AZFa区sY84、sY86、sY87及AZFb区sY102、sY117、sY118、sY119、sY115、DYS132有特异扩增条带,其余15个STS均未见特异扩增条带.患者Y染色体缺失断裂点位于AZFb区sY115和DYS385之间约8577 bp范围内.为AZFb区部份缺失,AZFd区、AZFc区及Yq末端缺失.结论 用分子遗传学技术进行STS分析可精确标明Y染色体AZF区域缺失片段.     

用吐温20改进骨髓细胞染色体制备方法

我们经过反复摸索 ,用吐温 2 0短期培养法制备骨髓细胞染色体 ,取得了较为满意的效果。现报道如下。1　材料与方法1 1　标本来源　获自我院血液科住院病人 ,其中慢性粒细胞白血病 2 0例 ,急性粒细胞白血病 3例 ,淋巴细胞性白血病2例 ,骨髓异常增生综合征 5例 ,增生性贫血 15例 ,淋巴瘤 5例 ,其他疾病 2例。1 2　材料　ＲＰＭＩ 164 0培养液 ;秋水仙素、吐温 2 0 (Ｔｗｅｅｎ2 0 )混合液 (秋水仙素 40ｍｇ ,Ｔｗｅｅｎ 2 0 1ｍｌ,加生理盐水至1Ｌ)。1 2　方法1 2 1　骨髓标本分别采用直接法、2 4ｈ短期培养法及Ｔｗｅｅｎ 2 0短期培养法。直…     

OSAHS及合并高血压患者血浆中Ang Ⅱ和ET-1的临床研究

目的 探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstruotive sleep apnea hypopnea syndrome,OSAHS)及阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征合并高血压(Hypertension)患者血浆中血管紧张素Ⅱ(Angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)和内皮素-1(plasma,ET-1)的变化.方法 将符合入选条件的中、重度OSAHS患者分为OSAHS并发高血压组、OSAHS血压正常组,另设正常对照组,每组30例,3组均行PSG监测.采用放射免疫法测定血浆中Ang Ⅱ和ET-1水平,并对比分析3组血浆中Ang Ⅱ和ET-1水平及其相关性,评价血浆中Ang Ⅱ和ET-1变化与检测价值.结果 OSAHS合并高血压与OSAHS血压正常组血清ET-1质量浓度(x±s下同)分别是(58.94±16.37)和(44.75±15.68)ng/L,明显高于正常对照组(33.89±20.12)ng/L(P＜0.01);同时OSAHS合并高血压组与OSAHS血压正常组之间比较血清ET-1质量浓度也明显增高(P＜0.05).两组患者血清ET-1水平与AHI呈明显的正相关(r＝0.334,P＜0.01).OSAHS及合并高血压患者血浆Ang Ⅱ和ET-1水平与正常对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01).结论 OSAHS患者存在着明显的睡眠结构紊乱,但合并高血压者并没有特异性改变.ET-1可能在OSAHS合并高血压的发病中起一定作用.     

女性染色体异常核型四例

例1 女,35岁,由于流产1次后近5年一直未孕就诊.夫妻双方家系无遗传病史,无药物及毒物接触史.经外周血染色体检查,患者核型为46,XX,inv(7)(pter→q22∷q32→q22∷q32→qter),见图1a.丈夫染色体核型正常,患者父亲染色体核型为46,XY,inv(7)(pter→q22∷q32→q22∷q32→qter). 例2 女,37岁,结婚7年,怀孕5次,但均在怀孕50～60天自然流产.夫妇双方体健,孕期无病毒感染及毒物接触史.经外周血染色体检查,患者核型为46,XX,t(5;7)(5pter→5q22∷7q32→7qter;7pter→7q32∷5q22→5qter),见图1b.丈夫染色体核型正常,患者妹妹的染色体核型与患者相同.     

染色体异常核型六例

例1 女，26岁，结婚4年孕3次，每次均在40天左右自然流产，妇科检查无异常，孕期无药物及化学毒物接触史。夫妇体健，非近亲婚配，表型、智力正常，外周血染色体G显带核型分析为46，XX，t(1,11)(1pter→1q21∷11q21→11qter;11pter→11q21∷1q21→1qter），见图1，丈夫染色体核型正常。     

男性无精子症、严重少精子症患者细胞遗传学分析

无精子或精子数量减少是男性不育的常见原因之一.为了研究无精子及严重少精子症患者与染色体缺陷的关系,我们对712名男性原发性无精子症和42名严重少精子症患者进行外周血染色体核型分析,发现原发性无精子症患者染色体核型异常142例,占总数的19.9%,染色体异态性88例,占总数12.3%.严重少精子症患者检出染色体平衡易位4例,占总数9.5%,染色体异态性5例,占总数12%.其中发现世界首报的染色体异常核型7例.现报道如下.     

超声引导脐静脉穿刺取血研究胎儿先天性心脏异常的染色体核型

目的 超声引导经腹穿刺脐静脉取胎血对胎儿先天性心脏病（先心病）及其他心脏异常行染色体核型分析。方法 对56例经胎儿超声心动图检出心脏异常胎儿在超声引导下，经腹脐静脉穿刺取血行染色体检查。结果56例均成功取血，无明显并发症，其中54例细胞培养成功。检出染色体异常核型6例（占11．1％），正常核型48例（占88．9％）；6例异常核型中1例21-三体。2例18三体，1例13-三体，1例47XYY（超雄）综合征，1例XO（先天性卵巢发育不良）综合征。6例术前超声检查除复杂先心病外均合并多脏器畸形。结论 超声引导脐静脉穿刺术可清晰显示脐静脉并缩短穿刺时间。胎儿心脏异常的染色体异常发生率与合并多发畸形相关。     

三例畸变Y染色体的重组形式及定位分析

目的 对3例畸变Y染色体进行定位分析并确定其重组形式.方法 采用染色体G显带、多重连接依赖探针扩增(multiplex ligation dependent probe amplification,MLPA)、荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)、Y染色体多个序列标签位点(sequence tagged site,STS)及Illumina人类全基因组单核苷酸多态性芯片扫描(single nucleotide polymorphisms array,SNP-array)等多种技术.结果 3例患者染色体G显带核型均为46,X,+ mar.MLPA检测发现例1 SRY、ZFY、UTY基因重复;例2 SRY、ZFY基因重复、UTY基因缺失;例3X染色体短臂/Y染色体短臂(X/Yp)、X染色体长臂/Y染色体长臂(X/Yq)亚端粒区域基因拷贝数减少.Y染色体STS分析提示:例1的SRY及Y染色体AZFa区sY84、sY86、AZFb区sY1227存在,但sY1228及AZFc区多个STS缺失,断裂点位于AZFb区sY1227和sY1228之间;例2的SRY及着丝粒区域sY1200存在,其余STS均缺失;例3的SRY及AZF多个STS均存在.SNP-array扫描提示,例1 Yp11.31-p11.2区重复,Yq11.22-q11.23区缺失,缺失片段约为5.18 Mb;例2 Yp11.31-p11.2区重复,重复片段为3.724 Mb,Yq11.21-q11.23区域缺失,缺失约14.644Mb;例3 X/Yp亚端粒区域(PAR) p22.33单拷贝缺失,X/Yq亚端粒区域(PAR) q28单拷贝缺失.FISH分析提示,例1和例2细胞中期原位杂交核型均为46,X,+ mar.ish(Y)(SRY++,DYZ3++,DYZ1-).综合分析:例1和例2的标记染色体均为短臂等臂双着丝粒Y染色体.分子核型:例1为46,X,idic (Y)(q11.23);例2为46,X,idic(Y) (q10);例3为标记染色体为环状Y,核型为46,X,r(Y)(p1 1q12).结论 Y染色体畸变形式多样,选用MLPA、Y染色体STS、FISH、SNP-array等多项技术联合诊断是确定其断裂点及重组形式的重要手段.     

一起死亡事故中难辨尸体的个体基因识别

目的对某地一起死亡事故中难辨认尸体进行个体基因识别。方法从遇难者尸体取深部肌肉和软骨组织少许。对部分组织进行常规病理检查。从尸体组织提取基因组DNA，采用荧光多重PCR技术，扩增尸体基因组DNA的16个短串联重复序列（STR）基因座。将遇难者STR基因型与父母的STR基因型进行比对，确定遇难者的家庭归属。结果常规病理检查示部分肌肉组织结构完全破坏，但软骨组织结构尚完整。肌肉组织基因组DNA的凝胶电泳呈3种类型：基本无降解、部分降解、完全降解。只有部分肌肉组织DNA可用于确定STR基因型，所有软骨的DNA样本均可用于STR-PCR。结论以STR基因型分析为基础的亲子鉴定技术是确定事故遇难者身份的有效方法。对腐烂尸体的STR分析而言，尸体软骨组织是首选。     

彩超引导胎儿心脏穿刺术取血用于产前诊断的意义评价

目的彩超引导下对脐静脉穿刺术困难经腹胎儿心脏穿刺术取胎血检测胎儿染色体核型等产前诊断。方法使用22G穿刺针对6例胎儿超声心动图检出心脏异常的胎儿脐血穿刺失败后在彩超引导下心脏穿刺术抽取胎血检测，平均孕周31．5w，孕妇平均年龄29．5岁，术前超声检查见心脏畸形或扩大外伴羊水过多或过少。结果6例均成功穿刺取血，术后1例出现心包积液，5例出现心动过缓，心率30—80／min，持续时间4—8min。胎血细胞培养成功5例，检出染色体异常核型13-三体1例。结论当脐静脉穿刺困难时可行胎儿心脏穿刺术，彩超引导可清晰显示胎儿心内血流变化并缩短穿刺时间。胎儿心脏穿刺术有一定的风险性应慎重选择病例。该技术可用于为未来的胎儿基因治疗。