临床血标本中产ESBLs大肠埃希菌耐药性检测

目的了解临床血标本中产ESBLs大肠埃希菌检出率及其对常用抗菌药物的耐药性。方法 CLSI表型确证试验纸片增强法检测产ESBLs大肠埃希菌;采用药敏分析仪对产ESBLs大肠埃希菌进行抗菌药物的敏感性试验。结果 44株血标本分离大肠埃希菌中,检出产ESBLs菌株20株,占45.5%;科室分布较为分散,其中神经内科、泌尿外科及血液内科各分离出3株,均占15.0%;产ESBLs菌株对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦100.0%敏感,对氨苄西林、哌拉西林、头孢唑林、头孢曲松、头孢他啶、头孢噻肟、头孢吡肟、氨曲南的耐药率均为100.0%;对阿米卡星、头孢西丁的耐药率分别为5.0%、10.0%,对其他抗菌药物的耐药率均>50.0%。结论临床血标本分离大肠埃希菌中,产ESBLs菌株发生率较高,并显示多药耐药性。     

多药耐药鲍曼不动杆菌OXA酶检测及医院内感染的分子机制

目的 了解本院多药耐药鲍曼不动杆菌产OXA酶情况、基因同源性及传播机制,为临床防治提供依据。 方法 采用琼脂稀释法检测鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度(MIC),改良Hodge试验检测碳青霉烯酶, PCR进行OXA酶的基因分型,并对PCR产物进行测序;ERIC-PCR分析鲍曼不动杆菌基因同源性,转移接合试验进行基因定位。 结果 45株菌耐药情况较严重;在42株耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌中,表型和基因型检测显示产OXA酶34株;ISAba1-bla_OXA-23阳性39株,bla_OXA-23阳性3株;42株菌bla_OXA-23均位于染色体。bla_OXA-58阳性3株,2株bla_OXA-58位于染色体,1株bla_OXA-58位于质粒上。42株bla_OXA-23阳性鲍曼不动杆菌属于6种分型(A、B、C、D、E、F),其中A型34株,B型4株,A、B两型间具有亲缘关系。 结论 本组多药耐药鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类耐药主要是产OXA-23酶,携带bla_OXA-23鲍曼不动杆菌存在医院内克隆传播。     

产超广谱β-内酰胺酶表型及基因型分布

目的了解淮北地区3所医院,临床分离产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中ESBLs表型和基因分布. 方法用1999年NCCLS推荐的初筛试验,从 147株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中筛选出可疑产ESBLs细菌,并用确证试验加以确认,然后用PCR的方法扩增其基因型. 结果116株大肠埃希菌和31株肺炎克雷伯菌中,共检出69株产ESBLs(46.9%),其中大肠埃希菌51株(42.2%),肺炎克雷伯菌18株(58.1%);将初筛得到的可疑菌株用纸片扩散确证法,头孢噻肟和头孢噻肟/克拉维酸测定,检出69株产ESBLs细菌,而用头孢他啶和头孢他啶/克拉维酸检测ESBLs阳性菌为32株;PCR扩增基因型阳性结果为TEM型 119株、SHV型10株、CTX-M型68株、OXA型18株. 结论淮北地区ESBLs的检出率为46.9%,头孢噻肟检测ESBLs的敏感性明显高于头孢他啶;基因型以CTX-M型为主,有些菌株同时携带≥2种耐药基因.     

安徽淮北地区肠杆菌科细菌耐药性检测

目的了解本地区肠杆菌科细菌的耐药现状,为临床医生合理使用抗生素提供依据。方法收集本地区三家医院所分离的326株肠杆菌,分析其菌种分布、耐药性。细菌分离、培养按常规方法,菌种鉴定采用MicroScan WalkAWay-40、Vitek-32全自动微生物分析仪,药敏试验采用微量液体稀释法,超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测采用1999年NCCLS推荐的纸片确证试验。结果在326株肠杆菌科细菌中,分离出大肠埃希菌216株,肺炎克雷伯菌37菌,臭鼻克雷伯菌18株,聚团多源菌19株,产气肠杆菌18株,阴沟肠杆菌18株。ESBLs检出率:大肠埃希菌42.1%、克雷伯菌56.7%;大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌等对亚胺培南的耐药率最低,分别为1.4%和2.8%;其次为哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦。另外,对庆大霉素和丁胺卡那耐药率也较低。结论淮北地区革兰阴性杆菌菌种分布以大肠埃希菌占首位。亚胺培南是治疗革兰阴性杆菌最有效的药物之一,对于产ESBLs的菌株,头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦可以作为优先选用的药物。     

M—CSF和CA125在卵巢襄诊断中的价值

目的：探讨Ｍ－ＣＳＦ和ＣＡ１２５在卵巢癌中的诊断价值。方法：本文用放射免疫分析方法检测卵巢癌患者和正常对照组血清中的Ｍ－ＣＳＦ和ＣＡ１２５。结果：卵巢癌组的Ｍ－ＣＳＦ和ＣＡ１２５水平显著高于对照组（Ｐ〈０．０１）,血清中Ｍ－ＣＡＦ和ＣＡ１２５水平变化无相关性。且在卵巢癌的诊断阳性率上,ＣＡ１２５〈Ｍ－ＣＡＦ和〈ＣＡ１２５＋Ｍ－ＣＳＦ。结论：卵巢癌患者血清中的Ｍ－ＣＳＦ和ＣＡ１２５可以用作肿瘤的诊断     

革兰阴性杆菌碳青霉烯酶产生与细菌耐药性关系的研究

目的 研究耐亚胺培南革兰阴性杆菌碳青霉烯酶产生及流行情况.方法 采用琼脂稀释法测定亚胺培南和美罗培南对199株革兰阴性杆菌的MIC,采用乙二胺四乙酸(EDTA)协同实验筛选金属β内酰胺酶表型.PCR扩增耐药菌株碳青霉烯酶基因,并测序分析.脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析产酶菌株同源性.结果 141株耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南药敏试验结果显示具有3种模式,以亚胺培南和美罗培南同时耐药为主94株(66.7%)、亚胺培南耐药和美罗培南敏感46株(32.6%)、亚胺培南敏感和美罗培南耐药仅1株(0.7%).但其他耐碳青霉烯类的鲍曼小动杆菌、洛菲不动杆菌、弗劳地柠檬酸杆菌、肺炎克雷伯菌和黏质沙雷菌均对亚胺培南和美罗培南同时耐药.EDTA协同试验结果显示,仅4株耐亚胺培南铜绿假单胞菌为EDTA协同试验阳性(2.8%),其余菌株均为EDTA协同试验阴性.PCR扩增碳青霉烯酶基因结果显示,4株EDTA协同试验阳性的铜绿假单胞菌产VIM-2型金属酶;34株鲍曼不动杆菌菌株中30株(88.2%)产OXA型碳青霉烯酶,其中OXA23型27株(79.4%),OXA24型13株(38.2%),OXA66型23株(67.6%).并且22株(64.7%)细菌同时产生一种以上的OXA型碳青霉烯酶.7株洛菲不动杆菌全部产OXA-23型碳青霉烯酶;11株弗劳地柠檬酸杆菌、5株肺炎克雷伯菌和1株黏质沙雷菌均产KPC-2型碳青霉烯酶,其中6株弗劳地柠檬酸杆菌同时具有IMP-8新亚型金属酶.PFGE结果显示,34株鲍曼不动杆菌中PFGE谱型共有15种,其中有14株属于A型,7株属于B型;7株洛菲不动杆菌不属于同一克隆;4株产VIM-2型金属酶铜绿假单胞菌不属于同一PFGE谱型;11株柠檬酸杆菌属于同一PFGE谱型;5株肺炎克雷伯菌属于同一PFGE谱型.结论 耐碳青霉烯类革兰阴性杆菌对12种抗生素的耐药率均高于碳青霉烯类敏感革兰阴性杆菌的耐药率,而且产生多种碳青霉烯酶,并在弗劳地柠檬酸杆菌、鲍曼不动杆菌和肺炎克雷伯菌中有产酶克隆株的流行.     

2010中国CHINET流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌耐药性监测

目的了解2010年我国不同地区临床分离流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌的耐药性。方法收集9所综合性医院和2所儿童医院临床分离的734株流感嗜血杆菌和214株卡他莫拉菌,分别采用Kirby-Bauer纸片法和琼脂稀释法作药敏试验,依照CLSI 2010版标准判断结果。头孢硝噻吩纸片法测定β内酰胺酶。结果 734株临床分离流感嗜血杆菌对甲氧苄啶-磺胺甲口恶唑的耐药率最高,达64.5%、其次对氨苄西林、氨苄西林-舒巴坦、氯霉素和环丙沙星的耐药率分别为31.7%、14.5%、12.5%和14.2%;该菌对头孢噻肟、阿莫西林-克拉维酸、阿奇霉素以及头孢呋辛的耐药率均在10%以下(4.2%～8.9%)。儿童分离株对氨苄西林的耐药率和产酶率(35.1%、30.1%)均高于成人分离株(26.6%、24.1%),对环丙沙星的耐药率(4.0%)低于成人分离株(17.0%),耐药率的差异均有统计学意义(P<0.05)。β内酰胺酶总检出率28.1%。39株为氨苄西林耐药而β内酰胺酶阴性。214株卡他莫拉菌对第二代和第三代头孢菌素、阿莫西林-克拉维酸、左氧氟沙星、甲氧苄啶-磺胺甲口恶唑均呈现高度敏感(96.7%～100%),但对阿奇霉素的耐药率为45.1%。该菌产β内酰胺酶的检出率为96.7%。结论流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌对头孢菌素类、酶抑制剂复方制剂以及喹诺酮类抗菌药物保持高度敏感性;产β内酰胺酶仍是上述2种细菌对氨苄西林耐药的重要耐药机制;但氨苄西林耐药而β酰胺酶阴性的流感嗜血杆菌的分离株较前增多,其耐药机制有待进一步研究。     

碳青酶烯类抗生素耐药弗劳地枸橼酸杆菌KPC-2基因的检测

目的研究弗劳地枸橼酸杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制。方法采用琼脂对倍稀释法检测弗劳地枸橼酸杆菌对亚胺培南和美罗培南以及其他常见药物的最低抑菌浓度(MIC)。等电聚集电泳分析其β-内酰胺酶类型,聚合酶链反应(PCR)和DNA序列分析检测β-内酰胺酶基因型,接合试验分析其耐药质粒传递情况。结果弗劳地枸橼酸杆菌对亚胺培南和美罗培南的MIC均为64 mg·L-1,对青霉素类、头孢菌素类、头孢西丁、氨曲南和氨基糖苷类均耐药。转移接合结果显示对亚胺培南和美罗培南的耐药性可以通过质粒转移。等电聚焦电泳结果显示转移接合子具有等电点(PI)约为5.0、7.5的2种β-内酰胺酶。PCR检测及序列分析结果显示该菌产生KPC-2基因。结论 KPC-2型碳青酶烯酶的产生是引起弗劳地枸橼酸杆菌对碳青酶烯酶耐药的主要原因,并且该耐药性能通过质粒进行转移。     

2010年CHINET克雷伯菌属细菌耐药性监测

目的了解2010年中国CHINET所属14所医院临床分离克雷伯菌属细菌的耐药情况。方法采用纸片扩散法(K-B法)或自动化仪器对临床分离株作药敏试验,并按CLSI 2010年版标准判断药敏试验结果。结果临床分离的肺炎克雷伯菌5 032株和产酸克雷伯菌429株,其中<18岁患者分离的克雷伯菌属细菌占19.4%(1 058/5 461)。62.4%分离株来源于呼吸道标本。药敏试验结果显示,克雷伯菌属对亚胺培南、美罗培南和厄他培南3种碳青霉烯类抗生素的耐药率分别为8.9%、8.9%和10.7%,对头孢哌酮-舒巴坦和哌拉西林-他唑巴坦的耐药率分别为14.8%和16.7%。所有14所医院均分离出对1种以上碳青霉烯类抗生素耐药菌株,其中肺炎克雷伯菌508株,产酸克雷伯菌31株。221株肺炎克雷伯菌和1株产酸克雷伯菌为泛耐药株,主要集中于2所医院(共188株)。结论克雷伯菌属细菌对碳青霉烯类抗生素、头孢哌酮-舒巴坦和哌拉西林-他唑巴坦仍保持良好的敏感性。按CLSI 2010年版标准,肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素耐药菌株的分离率分别为10%和7.2%,且耐药株主要集中于2所医院,加强医院感染控制,防止此类耐药菌株在医院内播散至关重要。