2010年中国CHINET临床分离自无菌体液的细菌分布和耐药性监测

目的了解国内不同地区14所教学医院2010年从临床分离自脑脊液及其他无菌体液(胸水、腹水、胆汁等)的细菌分布和对抗菌药物的耐药性。方法共收集2010年临床分离的无菌体液2409株非重复的细菌,采用纸片扩散法进行药敏试验,结果按CLSI 2010年版标准判读药敏结果,采用WHONET 5.4软件进行数据分析。结果 2409株非重复的细菌中,革兰阴性菌1 353株,占56.2%,革兰阳性菌1 056株,占43.8%。脑脊液中最常见的细菌分别为:凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、金葡菌和大肠埃希菌。其他无菌体液中最常见的细菌分别为:大肠埃希菌、CNS、屎肠球菌、肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌。脑脊液标本中MRSA和MRCNS的检出率分别为78.6%和69.7%。其他无菌体液标本中MRSA和MRCNS的检出率分别为60.3%和67.2%。未发现对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药的葡萄球菌。脑脊液标本中未发现对万古霉素耐药的肠球菌属细菌,在其他无菌体液中发现17株对万古霉素耐药的屎肠球菌。脑脊液标本中产ESBLs大肠埃希菌和克雷伯菌属细菌(肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌)的检出率分别为62.5%和30.0%,其他无菌体液标本中产ESBLs大肠埃希菌和克雷伯菌属细菌(肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌)的检出率分别为50.4%和27.3%。脑脊液标本中泛耐药鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌分别检出10株(18.2%)、8株(27.6%)和1株(7.7%)。其他无菌体液标本中泛耐药鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和大肠埃希菌分别检出43株(36.8%)、18株(11.5%)、3株(2.1%)和1株(0.2%)。结论脑脊液和其他无菌体液中主要病原菌是大肠埃希菌、CNS、屎肠球菌、肺炎克雷伯菌,鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌。应防范泛耐药肠杆菌科细菌、铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对临床治疗造成严重威胁。     

2010年中国CHINET嗜麦芽窄食单胞菌耐药性监测

目的了解国内不同地区14所医院2010年临床分离嗜麦芽窄食单胞菌对抗菌药物的耐药性。方法收集14所医院2010年临床分离嗜麦芽窄食单胞菌1 661株,按统一方案、采用统一的材料、K-B法和判断标准(CLSI 2010年版)进行嗜麦芽窄食单胞菌的耐药性监测。结果 1661株嗜麦芽窄食单胞菌住院患者分离株占97.5%;门诊患者分离株仅占2.5%。60岁以上的老年患者分离株占63.8%,<18周岁患者的分离株占4.8%。主要是痰液等呼吸道分泌物分离者占83.0%;分离自血液、胸腹水、关节腔液、脑脊液等无菌体液者占4.7%。该菌对甲氧苄啶-磺胺甲(?)唑、左氧氟沙星和米诺环素的耐药率分别为11.2%、10.7%和3.4%,对头孢哌酮-舒巴坦的耐药率为13.8%。尿液分离株对甲氧苄啶-磺胺甲(?)唑和头孢哌酮-舒巴坦的耐药率为21.6%和33.3%,高于其他标本分离株耐药率,P<0.01。结论嗜麦芽窄食单胞菌主要分离自住院患者及痰液等呼吸道标本中,且多见于≥60岁的老年患者。该菌对多数抗菌药物固有耐药,但对CLSI推荐的甲氧苄啶-磺胺甲(?)唑、左氧氟沙星和米诺环素的耐药率低。头孢哌酮-舒巴坦对该菌亦有良好抗菌活性。应根据药敏试验结果合理选用治疗嗜麦芽窄食单胞菌感染的抗菌药物。     

48株流感嗜血杆菌耐药性分析及β-内酰胺酶基因检测

目的 了解本地区流感嗜血杆菌的分布及耐药性,为指导临床合理用药提供依据.方法 k-B法进行药敏试验,玻片法测定β-内酰胺酶.PCR扩增TEM及ROB型β-内酰胺酶基因.结果 48株流感嗜血杆菌主要分布于呼吸内科和门诊.对复方新诺明、四环素和氨苄西林耐药率分别为62.50%、35.42% 和22 92%;阿莫西林/克拉维酸钾、氨曲南耐药率为12.50%;氨苄西林/舒巴坦、头孢噻肟、头孢拉定、头孢曲松、阿奇霉素、氯霉素耐药率为8.33%;头孢吡肟、头孢呋辛、环丙沙星、左氧氟沙星耐药率为6.25%.哌拉西林/三唑巴坦、亚胺培南敏感率高为100%.10株氨苄西林耐药菌株均产β-内酰胺酶,产酶率为20.83%,且均检测到TEM基因.结论 复方新诺明和四环素已不再适于临床治疗流感嗜血杆菌引起的感染.氨苄西林仍可作为临床经验用药.哌拉西林/三唑巴坦和亚胺培南抗菌活性高,可望作为治疗耐氨苄西林流感嗜血杆菌感染的理想用药.喹诺酮类药物耐药率高,应引起重视.流感嗜血杆菌对氨苄西林耐药的主要机制为产TEM型β-内酰胺酶.     

超广谱β-内酰胺酶研究进展

超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)是由质粒介导的能赋予细菌对多种β-内酰胺类抗生素耐药的一类酶，它主要由革兰阴性杆菌产生。自从ESBLs和产ESBLs的细菌被报道以来，产ESBLs菌株在世界各地引起了广泛感染、传播和流行。由其产生的耐药问题已成为当前全球最重要的耐药问题之一，受到国内外学者广泛关注。现就有关ESBLs的类型、耐药机制、检测方法以及防治等研究进展作一简要综述。     

隐球菌检验方法的应用

正隐球菌是广泛存在于自然界中的一种真菌,其中包括新生隐球菌、格特隐球菌等变种。新生隐球菌可引起条件致病性感染,其感染主要发生在免疫力低下的人群,如AIDS患者、器官移植后患者或长期使用糖皮质激素的患者等。新生隐球菌是一种类酵母样真菌,广泛存在于鸽子的粪便、灰尘中等,可经呼吸道、消化道等途径进入人体引起隐球菌病。新生隐球菌菌体周围有一圈宽厚的荚膜,是其重要的致病物质,有抑制人体内免疫细胞吞噬、促使和诱导动物免疫无应答、降低人体对病原菌抵抗力的     

2012年中国CHINET无菌体液中分离的细菌构成和耐药性监测

目的：了解国内不同地区15所医院2012年从临床分离自脑脊液及其他无菌体液（胸水、腹水、胆汁等）的细菌构成及其对抗菌药物的耐药性。方法对国内主要地区（13所综合性医院、2所儿童医院）临床分离菌株采用纸片扩散法或自动化仪器法按统一方案进行细菌药敏试验,按CLSI 2012版标准判断结果。结果3945株非重复的细菌中,革兰阴性菌2214株,占56．1％,革兰阳性菌1731株,占43．9％。无菌体液中最常见的细菌依次为大肠埃希菌,肺炎克雷伯菌,凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）,屎肠球菌,粪肠球菌。无菌体液标本中甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌（金葡菌）和CNS（MRSA和MRCNS）的检出率分别为61．3％和77．2％。未发现对万古霉素、利奈唑胺耐药的葡萄球菌。无菌体液中发现1株对万古霉素耐药的粪肠球菌和1株对利奈唑胺耐药的粪肠球菌,还发现6株对万古霉素耐药的屎肠球菌。无菌体液标本中产ESBL大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率分别为48．1％和24．4％。无菌体液标本中泛耐药鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌的检出率分别为24．5％、5．5％和1．4％。结论应防范泛耐药肠杆菌科细菌和鲍曼不动杆菌对临床造成严重威胁。     

皖江地区产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌基因型及耐药性分析凌华志简

目的 研究安徽省芜湖及宿州两地临床产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率、基因型分布及对抗菌药物的耐药性.方法 收集两地大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行ESBLs确证试验;采用PCR法对产ESBLs株进行β内酰胺酶基因的扩增;微量稀释法测定产ESBLs株对13种抗菌药物的耐药率.结果 两地大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs检出率的差异均无统计学意义（P＞0.05）,但基因型存在一定差异.bla（TEM）＋bla（CTX-M-13）是最常见的基因检出模式.两地产ESBLs株对抗菌药物表现出不同的耐药率,但对亚胺培南和美洛培南均100％敏感.结论 芜湖和宿州地区产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌存在较严重的抗菌药物选择性压力;酶抑制剂复合制剂及碳青酶烯类是治疗产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌感染的理想药物.     

16SrRNA序列分析技术对临床标本中疑难细菌的鉴定

目的：应用16S rRNA序列分析技术鉴定临床少见或疑难细菌,提高细菌鉴定的准确性。方法收集临床少见或疑难细菌44株,提取DNA,采用通用引物进行PCR扩增及目的片段基因测序,并将测序结果在核酸数据库中比对分析以确定菌种。结果44株临床少见或疑难细菌均扩增到16S rRNA目的基因片段并成功测序,40株(90．9%)鉴定到“种”,4株(9．1%)鉴定到“属”;其中常规方法与测序方法在“属”水平一致的有34株(77．3%),不一致的有10株(22．7%)。结论16S rRNA序列分析技术可以准确、快速地鉴定临床少见或疑难细菌,可以作为临床细菌鉴定的重要方法之一。     

2011年中国CHINET铜绿假单胞菌耐药性监测

目的了解2011年中国不同地区铜绿假单胞菌临床分离株的耐药性和耐药特征,指导临床合理使用抗菌药物。方法对全国15所医院临床分离的6012株铜绿假单胞菌按照统一方案,采用统一材料、方法(K-B法或自动化仪器)和判断标准(CLSI 2011年版),进行铜绿假单胞菌的耐药性监测,并用WHONET5.6软件进行数据分析。结果 2011年15所医院从临床标本中共分离6 012株铜绿假单胞菌,其中92.9%分离自住院患者,73.7%的菌株分离自呼吸道标本。铜绿假单胞菌对阿米卡星的耐药率最低,为14.3%。耐药性最高的医院分离株对大多数抗菌药物的耐药率均高于30%,而耐药性最低的成人医院分离的菌株对大多数抗菌药物的耐药率均低于20%,2所儿童医院分离菌株对各种抗菌药物的耐药率均低于17%;分离自门诊的菌株对各种抗菌药物的耐药率均低于25%,而分离自ICU的菌株除了对阿米卡星的耐药率为16.1%外,对其他各种抗菌药物的耐药率均高于23%。各医院泛耐药铜绿假单胞菌的检出率平均为1.8%。结论我国不同地区、不同医院临床分离的铜绿假单胞菌对抗菌药物的耐药率仍处于较高水平,但近年耐药性增长趋势稳定。各地区、各医院、各科室患者的分离株对抗菌药物的耐药性相差较大,医疗机构应加强细菌耐药监测,指导临床合理使用抗菌药物。     

多药耐药铜绿假单胞菌MexAB-OprM主动外排系统的耐药作用

目的探讨MexAB-OprM主动外排系统(外排泵)在多药耐药铜绿假单胞菌耐药机制中的作用。方法挑选临床分离的铜绿假单胞菌多药耐药菌株26株、敏感菌株15株及标准质控菌株(ATCC27853),用RT-PCR扩增其内膜转运蛋白mexB的结构基因mexB和内参照基因16S rRNA片段,根据mexB与16S rRNA扩增产物的电泳扫描比值,分析mexB mRNA的表达水平,判断MexAB-OprM的表达情况。结果 26株多药耐药菌株对14种常用抗菌药物全部耐药,耐药率为100%,15株敏感菌株对14种常用抗菌药物全部敏感;标准质控菌株、所有的敏感菌株和多药耐药菌株均检测出mexB mRNA基因;耐药菌株的mexB mRNA水平(2.41±1.10)显著高于敏感菌株(1.47±0.83)(P0.01)。结论 MexAB-OprM主动外排系统表达水平的增高与铜绿假单胞菌多药耐药的形成密切相关。