2011年中国CHINET细菌耐药性监测

目的了解国内主要地区临床分离菌对常用抗菌药的敏感性和耐药性。方法国内主要地区15所教学医院(13所综合性医院、2所儿童医院)临床分离菌采用纸片扩散法或自动化仪器法按统一方案进行细菌药敏试验。按CLSI 2011年版判断结果。结果 2011年1 12月收集各医院临床分离菌共59 287株,其中革兰阳性菌16 872株,占28.5%,革兰阴性菌42 415株,占71.5%。金葡菌(SA)和凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)中甲氧西林耐药株的检出率平均分别为50.6%和74.6%。甲氧西林耐药株对β内酰胺类抗生素和其他测试药的耐药率显著高于甲氧西林敏感株。MRSA中有73.3%的菌株对甲氧苄啶磺胺甲噁唑敏感;MRCNS中有88.2%的菌株对利福平敏感。未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药株。肠球菌属细菌中粪肠球菌对所测试的抗菌药(氯霉素除外)的耐药率均显著低于屎肠球菌,两者中均有少数万古霉素耐药株,根据表型推测多数为VanA型耐药。肺炎链球菌非脑膜炎株成人株和儿童株中PSSP所占比例较2010年均略有升高,PRSP的检出率均有所下降。大肠埃希菌、克雷伯菌属细菌(肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌)和奇异变形杆菌中产ESBLs株分别平均为50.7%、38.5%和13.8%。肠杆菌科细菌中产ESBLs株对测试药物的耐药率均比非产ESBLs株高。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,总耐药率4%～6%。不动杆菌属细菌(鲍曼不动杆菌占88.6%)对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为60.4%和61.4%。肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌中仍有少数泛耐药株。结论细菌耐药性仍呈增长趋势,多重耐药和泛耐药菌株在某些科室内的流行播散对临床构成严重威胁,应进行流行病学调查并采取有效的控制措施。     

整形外科病房分离菌株的种类及常见菌株的耐药性分析

目的了解整形外科病房分离细菌的种类及耐药性。方法采用全自动微生物鉴定及药敏分析仪,检测2007~2009年间整形外科病房分离的菌株及其对常用抗菌药的敏感性。结果 3年共分离菌株26株、11种细菌,切口创面分泌物或脓液23例,占88.5%;其中革兰阴性菌14株,占53.8%,革兰阳性菌12株,占46.2%。以葡萄球菌最多,占42.3%;葡萄球菌中,金黄色葡萄球菌为主,占72.7%,占总菌株的30.8%。金黄色葡萄球菌对大多数常用抗菌药的耐药性在30%以上,对万古霉素和利奈唑胺极其敏感、耐药率为0。结论整形外科病房分离菌株种类较多,以金黄色葡萄球菌最为多见;该类细菌对大多数抗菌药的耐药性较高,但无万古霉素和利奈唑胺耐药株。     

近5年血培养中细菌分布及耐药性分析

目的监测和分析本院近5年来感染患者血培养中的病原菌分布和耐药特点,为临床抗感染治疗提供依据。方法血标本采用BACTEC9120全自动血培养仪培养,采用VITEK系统鉴定细菌,Kirby-Bauer琼脂扩散法进行体外药敏试验,应用WHONET5.3软件分析血培养标本所分离病原菌的分布和药敏结果。结果从2004年10月～2009年9月,血培养共检出985株病原菌,其中革兰阳性球菌487株,占49.4%;革兰阴性杆菌453株,占46.0%;真菌45株,占4.6%,检出的前几位细菌分别为凝固酶阴性葡萄球菌、大肠埃希菌、肠球菌属、克雷伯菌属、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌。中心重症监护室（ICU）、急诊科病房、血液科病房分离菌所占比例分别为23.1%、13.8%、12.7%。大肠埃希菌中ESBLs的检出率为36.9%,克雷伯菌属中ESBLs的检出率为32.8%,葡萄球菌中MRSA的检出率为21.2%,MRCNS的检出率为76.3%。亚胺培南与美罗培南对大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌作用效果较好,葡萄球菌属对万古霉素100.0%敏感,其余抗菌药物均有不同程度的耐药。结论血培养分离的病原菌以革兰阳性菌为主,且菌种多样化,具有较高的耐药率,提示临床医生应做血培养,以合理应用抗菌药物,防止抗生素滥用及新耐药菌株的产生。     

协同法过筛检测金属β-内酰胺酶的研究

目的探讨并建立临床微生物实验室常规检测金属β-内酰胺酶(MBLs)的方法,为临床合理选择抗生素提供依据。方法以EDTA、CuCl2、FeCl2、2-MPA、MPA为酶抑制剂,头孢他啶(CAZ)、亚胺培南(IMP)为底物,在MH平板上用纸片扩散法进行抗生素协同敏感性检测并与聚合酶链反应(PCR)检测金属酶基因结果进行比较。结果协同法检测20株铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶有1例阳性,与PCR法检测结果一致。金属β-内酰胺酶阳性的菌株在2种底物纸片中均与EDTA、2-MPA和MPA纸片有协同作用,其中2-MPA络合效果最好,与CuCl2、FeCl2纸片无协同作用。结论协同法检测革兰阴性杆菌中金属β-内酰胺酶的方法简便、结果可靠、成本低廉,适合于临床微生物学实验室对产金属酶的革兰阴性杆菌的初步鉴定。     

肺泡灌洗液肝素结合蛋白在细菌性肺炎诊断与鉴别诊断中的临床价值

目的:探讨支气管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid, BALF)中肝素结合蛋白(Heparin binding protein, HBP)检测在细菌性肺炎诊断与鉴别诊断中的临床价值。方法:选取2019年1月至2021年1月安徽医科大学第四附属医院呼吸科收治的88例肺炎患者,其中细菌性肺...     

CLSI三代头孢菌素新旧折点对判定大肠埃希菌药物敏感性及产ESBLs菌株分布的影响

目的探讨美国临床与试验室标准化研究所(CLSI)2010(S20)及2009(S19)年版头孢他啶(CAZ)、头孢噻肟(CTX)新旧折点变化对本地区大肠埃希菌药物敏感性及产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株分布的影响。方法采用纸片扩散法对大肠埃希菌进行CAZ和CTX的药物体外敏感试验,并根据CLSI公布的新旧折点分别判读,CLSI表型确证试验(纸片增强法)确定产ESBLs菌株;改良三维试验检测CTX和(或)CAZ耐药、ESBLs表型确证试验结果为阴性菌株的产酶情况。结果在S19、S20折点下,大肠埃希菌对CTX耐药率分别为69.4%、72.6%,对CAZ的耐药率分别为31.1%、43.2%。大肠埃希菌中产ESBLs菌株的检出率[CTX/CTX-CLA和(或)CAZ/CAZ-CLA检测为阳性]为68.8%,其中CTX/CTX-CLA和CAZ/CAZ-CLA纸片组合的检出率分别为68.8%、40.4%。旧折点下,分布在CTX、CAZ耐药菌株中的产ESBLs株分别占95.2%、39.7%,采用新折点后分别为97.6%、56.3%。双纸片确证试验阴性但对CAZ、CTX耐药的6株菌株中,单产AmpC酶5株,同时产ESBLs、AmpC酶1株。结论采用新折点后,大肠埃希菌对CTX、CAZ耐药率上升,提高了大肠埃希菌的耐药表型与产ESBLs检出率的一致性。CTX/CTX-CLA对产ESBL菌株的检出率高于CAZ/CAZ-CLA,产AmpC酶可影响表型确证试验对产ESBLs菌株的检出。     

碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌外膜孔蛋白OprD2的研究

目的 研究铜绿假单胞菌外膜孔蛋白OprD2与碳青霉烯类抗生素耐药的关系.方法 琼脂稀释法测定14种抗菌药物对铜绿假单胞菌的MIC.PCR扩增oprD2编码基因并进行序列分析.十二烷基磺酸钠-聚丙酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)观察碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌外膜蛋白OprD2的变化,比较敏感株和耐药株外膜蛋白的差异,统计分析采用均数t检验.结果 141株耐碳青霉烯类抗生素铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南药敏试验结果显示具3种模式,以亚胺培南和美罗培南同时耐药(IMPRMEMR)为主,占66.7%;亚胺培南耐药和美罗培南敏感(IMPRMEMS)占32.6%;亚胺培南敏感和美罗培南耐药(IMPSMEMR)仅占0.7%.PCR扩增141株耐药株oprD2编码基因结果136株耐药株oprD2编码基因发生显著变异,变异位点呈现多样性.其中34株细菌的oprD2编码基因存在大片段缺失,6株的oprD2编码基因中有插入片段,96株有小片段缺失或不同位置的多个点突变.另4株产金属酶菌株及1株亚胺培南敏感(美罗培南耐药)株的oprD2编码基因未发现异常.对其中16株碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌进行SDS-PAGE分析,结果显示10株IPMRMEMR和5株IPMRMEMS铜绿假单胞菌外膜蛋白均存在分子量46 000 u处的OprD2蛋白减少,而1株IMPSMEMR株OprD2蛋白带未见异常.结论 oprD2编码基因的缺失或突变可能是导致外膜蛋白OprD2缺失或减少的分子基础,并是铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素尤其是亚胺培南耐药的主要机制之一.     

2010年中国CHINET血流感染的病原菌分布及耐药性

目的了解2010年CHINET血培养分离菌的菌种分布和耐药性。方法对CHINET细菌耐药监测网2010年1月至2010年12月所有血标本按常规方法进行细菌分离、培养、鉴定。按统一方案用K-B纸片扩散法进行抗菌药敏感试验。结果 2010年自血液标本中共获分离细菌5 646株,其中革兰阳性球菌占64.3%,革兰阴性杆菌占35.6%。最常见的分离菌分别为凝固酶阴性葡萄球菌(47.0%)、大肠埃希菌(1 5.0%)、肠球菌属细菌(7.4%)、克雷伯菌属细菌(6.0%)、金葡菌(5.6%)、不动杆菌属细菌(3.9%)、假单胞菌属细菌(2.9%)、草绿色链球菌(2.9%)、肠杆菌属细菌(1.9%)、沙门菌属细菌(1.2%)和嗜麦芽窄食单胞菌(1.1%),占分离菌株的94.8%。MRSA及MRCNS分别占金葡菌和凝固酶阴性葡萄球菌的51.1%和56.8%。粪肠球菌对高浓度庆大霉素和氨苄西林的耐药率分别为34.3%和14.7%,屎肠球菌对多数测试药物的耐药率显著高于粪肠球菌。草绿色链球菌对青霉素的耐药率为11.2%。葡萄球菌、肺炎链球菌和其他链球菌属细菌中均未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药菌株,粪肠球菌和屎肠球菌对万古霉素的耐药率分别为2.1%和7.0%。大肠埃希菌、克雷伯菌属、肠杆菌属、沙雷菌属、变形菌属和枸橼酸菌属细菌等肠杆菌科细菌对亚胺培南、美罗培南的耐药率在0～10%,但克雷伯菌属、肠杆菌属、沙雷菌属和变形菌属细菌对厄他培南的耐药率达10%～20%。不发酵糖革兰阴性杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药率较高,铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素的耐药率为18.3%～22%,但不动杆菌属细菌耐药率达57%。结论 2010年CHINET监测资料显示革兰阳性菌,尤其是CNS在血流感染中占重要地位,血培养分离株对常用抗菌药严重耐药,因此应合理应用抗菌药物,并加强医院感染控制措施以抑制耐药菌传播。     

质粒编码SHV-2a超广谱β-内酰胺酶的检测

我们对蚌埠地区部分医院临床分离的臭鼻克雷伯菌70015、70020菌株所产的ESBLs编码基因进行结合转移、序列分析和亚型鉴定,结果如下.     

耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌外膜蛋白研究进展

近几年来,多重耐药或泛耐药的鲍曼不动杆菌已经在全球各地出现播散或暴发流行,并且耐药率也不断上升。世界各地都收集到对碳青霉烯类抗生素耐药的鲍曼不动杆菌,呈暴发流行。鲍曼不动杆菌外膜蛋白对碳青霉烯类抗生素低渗透性参与了其耐药机制形成。现就耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌外膜蛋白的种类特点与耐药性的关系综述如下。