大鼠骨髓基质干细胞的神经分化以及神经生长因子的表达

目的 探讨大鼠骨髓基质干细胞神经分化以及神经生长因子的表达.方法 体外培养大鼠骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cell,BMSC),传代至第6代,进行神经诱导分化.先以bFGF (10 ng/ml)预诱导24 h,然后以胶质细胞源神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)10 ng/ml在胎肠培养基(fetal gut condition midium,FGCM)条件下诱导10 d.免疫荧光法检测神经元标志神经特异性烯醇化酶(NSE)和神经丝蛋白(NF)的表达.RT-PCR法检测神经营养因子GDNF和神经生长因子(nerve growth factor,NGF) mRNA的表达.结果 流式细胞检测BMSC高表达CD90(99.7%), 而CD45表达阴性.诱导10 d后,部分细胞在形态上表现出神经元样改变,免疫荧光染色神经元标志NSE和NF阳性,而胶质细胞标志GFAP阴性.RT-PCR检测显示,BMSC诱导前低表达神经营养因子NGF和GDNF mRNA,而诱导后表达水平显著增加.结论 GDNF不仅能在体外诱导BMSC分化为神经样细胞,而且能促进神经营养因子表达显著增加.     

内质网应激与肿瘤

内质网应激(ERS)是内质网受到多种刺激导致细胞内Ca2+平衡紊乱或内质网中蛋白质堆积引发的反应,ERS中的未折叠蛋白反应(UPR)、内质网超负荷反应(EOR)可能与肿瘤的发生、发展、转移及预后密切相关.本文中作者主要介绍了与肿瘤相关的ERS信号转导通路及相关基因和蛋白的表达与肿瘤的相关性.     

食管癌三维适形放疗联合TP方案同步放化疗的临床研究

食管癌有早期扩散和转移的倾向，有资料表明即使临床或手术认定为局限性癌肿者也有40％～75％已发生亚临床转移或邻近器官受累，对于不能手术或不愿手术的食管癌患者，放射治疗是最主要的治疗手段。放疗失败的主要原因是原发部位肿瘤残存，其次是远处转移。作者2007年10月--2008年11月对40例不能或不宜手术食管癌患者进行三维适形放疗联合TP方案同步放化疗，取得了较好的近期疗效，现报道结果如下。     

大鼠骨髓基质干细胞诱导分化为肠神经细胞的体外研究

目的探讨不同方法诱导大鼠骨髓基质干细胞(BMSC)分化为肠神经细胞的可能性,并探索适宜的诱导方法。方法体外培养并鉴定BMSC,流式细胞法检测CD90和CD45。传代至第6代后行神经诱导分化。先以10ng/ml碱性成纤维生长因子(bFGF)预诱导24h,然后分2组：胶质细胞源神经营养因子(GDNF)组以10ng/ml GDNF,在胎肠培养基(FGCM)条件下诱导10d；维甲酸组以0．5 mmol/L维甲酸、10μmol/L ZnSO_4和FGCM诱导10d。免疫荧光法检测神经特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、蛋白基因产物(PGP9．5)、一氧化氮合酶(nNOS)和血管活性肠肽(VIP)的表达。所得数据行t检验。结果流式细胞检测BMSC呈高表达,其标志为CD90,而不表达造血细胞标志CD45。诱导10d后,GDNF组和维甲酸组均有部分细胞在形态上表现出神经元样改变,免疫荧光染色NSE、NF、PGP9．5、nNOS、VIP阳性,GFAP阴性。GDNF组NF、PGP9．5、nNOS、VIP阳性比例显著高于维甲酸组(75．6％±8．4％比48．5±7．5％；57．7％±6．5％比35．7％±7．2％；46．6％±5．4％比30．5％±6．6％；72．3％±6．7％比40．4％±7．4％；P＜0．01)。结论在体外BMSC可被诱导分化为肠神经样细胞并表达肠神经递质,GDNF在胎肠培养基条件下诱导肠神经样细胞比例高于维甲酸。     

COX-2基因沉默对人胃癌细胞系SGC-7901裸鼠成瘤的影响

目的 研究COX-2基因沉默对人胃癌细胞系SGC-7901裸鼠成瘤的影响.方法 构建靶向COX-2的短发夹状双链RNA(shRNA)的真核表达质粒转染人胃癌细胞系SGC-7901,采用RT-PCR和Western blot分别从mRNA和蛋白质水平检测抑制效果.15只裸鼠随机分为3组,每组5只,皮下接种胃癌细胞.抑制组接种转染抑制质粒的胃癌细胞;正常对照组接种未转染的胃癌细胞;阴性对照组接种转染阴性对照质粒的胃癌细胞.接种4周后比较各组裸鼠皮下形成瘤体的大体和病理情况并计算抑瘤率.结果 转染靶向COX-2的shRNA抑制质粒后细胞中COX-2的表达被明显抑制,抑制率为70.42%.正常对照组和阴性对照组所有裸鼠均有瘤体形成,平均瘤质量分别为(0.49±0.017) g和(0.49±0.013) g.抑制组仅2只有瘤体形成,平均瘤质量(0.05±0.003) g,与正常对照组相比差别有统计学意义(P＜0.01),抑瘤率为89.8%.结论 运用RNA干扰可以高效特异地抑制人胃癌细胞系SGC-7901中COX-2的表达,COX-2被抑制后SGC-7901的生长和活性也被明显抑制.     

肿瘤坏死因子-α的放疗增敏机制

肿瘤坏死因子-α (TNF-α)是一种具有广泛生物活性的细胞因子,与多种疾病的发生发展密切相关.目前已有较多学者使用TNF-α作为放疗增敏剂来研究其对肿瘤细胞放疗增敏的效果,研究发现其机制可能与细胞凋亡、细胞周期、乏氧细胞、DNA损伤修复等有关.     

急性和慢性束缚应激对大鼠内脏敏感性和神经内分泌的影响

目的了解急性和慢性部分束缚应激对大鼠内脏敏感性以及神经内分泌反应的影响特点和持续时间。方法成年SD大鼠分为对照组(无束缚应激)、急性组和慢性组,通过腹壁回撤反射(AWR)评分评估应激前后大鼠内脏对结直肠扩张(CRD)的敏感性;并通过放免法检测应激前后不同时间点大鼠血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)以及皮质酮(CORT)水平。结果①20和40 mm Hg压力扩张时,急、慢性组的AWR评分均显著高于基础水平(0 d),P<0.05;但在应激后第7天AWR评分显著下降,P<0.05。②急性组血浆ACTH和CORT水平显著高于对照组[(25.35±6.03)ng/ml比(7.24±2.97)ng/ml,(312.47±50.76)pg/ml比(97.00±23.33)pg/ml],但束缚应激7 d后,激素浓度[(11.81±5.03)ng/ml和(113.73±24.58)pg/ml]下降至基础水平。③慢性组血浆ACTH和CORT水平[(20.84±2.19)ng/ml和(200.41±78.10)pg/ml]显著高于对照组,且激素水平在束缚7 d后[(19.95±5.31)ng/ml和(162.51±47.08)pg/ml)]仍维持在高水平。结论急性和慢性束缚应激都可导致大鼠内脏敏感性增高,但作用可能是短暂的。急性束缚应激短暂显著提高血浆ACTH和CORT水平,而慢性束缚应激可能长期提高激素水平。     

非小细胞肺癌少见/罕见靶点：共识与争鸣

<正>由中国抗癌协会肺癌专业委员会和广东省临床试验协会/中国胸部肿瘤研究协作组主办的“第20届中国肺癌高峰论坛”于2023年3月4日在广州顺利召开。此次论坛以非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）少见/罕见靶点为主题,从少见/罕见靶点的精准检测、新型临床研究与围术期治疗等角度开展相关学术探讨,并最终达成了专家共识。