GM-CSF与其受体介导的信号转导及其机制

细胞因子有各种不同的生物学功能 ,包括促进增殖、分化和调节生长发育的作用。在其靶细胞上有相应的受体表达 ,大多数细胞因子受体可与多条信号转导途径相关联 ,某一具体细胞因子的功能特异性 ,由所激活的多条信号转导途径的综合效应所决定[1 ] 。粒 巨噬细胞集落刺激因子 (ＧＭ ＣＳＦ)是一种酸性糖蛋白类的细胞因子 ,在体内可由巨噬细胞、Ｔ细胞、内皮细胞、肥大细胞和成纤维细胞等产生。ＧＭ ＣＳＦ是一个多效的细胞因子 ,它刺激髓性祖细胞的增殖和成熟并维持髓性细胞的功能特性 ,促进巨噬细胞的增殖和分化 ,在半固体琼脂培养中还促进粒…     

突变型(α99,β82位Lys-Cys)人重组血红蛋白的纯化

将基因突变型（α９９,β８２位Ｌｙｓ－Ｃｙｓ）血红蛋白在ｐＢＶ２２０载体中诱导表达,表达产物达细菌总蛋白的２０％左右。该表达产物以包涵体形式存在,包涵体经洗涤后,用８ｍｏｌ／Ｌ尿素溶解,先用Ｑ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ Ｆａｓｔ Ｆｌｏｗ阴离子交换纯化,再经Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ－１００凝胶过滤纯化。纯化产物经复性,具有与氧结合的能力。     

人血红蛋白a、β基因以可溶形式在大肠杆菌中的表达

将人血红蛋白α、β珠蛋白基因分别克隆进 pET 2 1b原核表达载体中 ,宿主菌经IPTG化学诱导 ,在1.6× 10 5处有特异的蛋白带表达。表达产物以可溶形式存在 ,α珠蛋白的表达量达总菌体蛋白的 5 % ,β珠蛋白的表达量达 15 % ,并经Western Blotting杂交证实。     

一例重度骨髓型急性放射病的临床报告

本文报告一例受⁶⁰Coγ线放射源,强度为5.3万居里误照约40秒钟而引起重度骨髓型急性放射病。本病例早期反复呕吐、生物剂量推算为4.72～6.48Gy,现场模拟全身造血干细胞活存计权等效均匀剂量为5.22Gy。入院50天内较平稳地度过了初期,假愈期、极期和恢复期。整个病程未发热、无明显感染和出血,从宏观上看不出有极期的表现。这样顺利的经过在国内外17例同类患者病史上是罕见的.主要治疗包括(1)抗感染措施、良好护理和营养;(2)抗辐射药I号(雌三醇)、I号(中草药)的应用;(3)改善微循环措施;(4)胎肝细胞移植;(5)输HLA相合或半相合的新鲜全血或有形成份;(6)抗出血措施和促进造血功能;(7)第50～59天因头部受照剂量过大出现轻度脑水肿和头面肿胀进行对症处理。     

大容量骨髓体外净化初步临床应用

应用补体介导细胞毒法体外净化骨髓中残留白血病细胞后，对普通型急性淋巴细胞白血病（CALL）患者4例进行了自身骨髓移植（ABMT）。单个核细胞经单克隆抗体55（McAb55)加兔补体两次处理后，CALL抗原阳性细胞清除率可达3个对数级，骨髓有核细胞及CFU－GM回收率分别为25．8％－64．8％和40．0％－62．4％，外周血细胞于移植后第11－13天开始回升，15－29天升至10^9／L以上。第23－53天出洁净室，现无病存活时间分别为8^ 、7^ 、3^ 和1．5个月，远期疗效仍在定期随访中。     

STAT3RNAi联合γ射线照射对U251细胞增殖的影响

目的 构建特异性抑制信号转导与转录激活因子3 (STAT3)的小干扰RNA(siRNA)表达载体并检测联合 ⁶⁰Co γ射线照射对U251细胞STAT3表达及细胞增殖的抑制作用。方法 设计、合成STAT3特异性的19 bp短链寡核苷酸,经退火形成双链DNA片段,克隆到pSilence2.1-U6-H1载体中,构建STAT3特异siRNA的表达载体, HindⅢ和BamHⅠ双酶切及测序鉴定重组体,并转染U251细胞,免疫印迹法(Western blot)检测STAT3 mRNA和蛋白的表达水平,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖活性,克隆形成率及MTT实验确定放疗剂量。结果 经双酶切与测序鉴定成功构建pSilence2.1-STAT3表达载体,转染星形胶质瘤细胞株U251细胞可显著抑制细胞中STAT3 蛋白的表达水平;确定2 Gy为放疗剂量。转染pSilence2.1-STAT3,细胞增殖活性较未转染U251细胞显著降低(P<0.05),联合 ⁶⁰Co γ射线照射U251细胞增殖活性单独转染进一步显著降低(P<0.05)。结论 运用pSilence2.1-U6-H1载体构建的pSilence2.1-STAT3表达载体可有效抑制STAT3的表达及星形胶质瘤细胞的增殖; 联合2 Gy ⁶⁰Co γ射线照射可增加抑制效果。     

人血红蛋白α、β基因以可溶形式在大肠杆菌中的表达

将人血红蛋白α、β珠蛋白基因分别克隆进pET-21b原核表达载体中，宿主菌经IPTG化学诱导，在1.6×105处有特异的蛋白带表达。表达产物以可溶形式存在，α珠蛋白的表达量达总菌体蛋白的5%,β珠蛋白的表达量达15%，并经Western-Blotting杂交证实。