突变型(α99,β82位Lys-Cys)人重组血红蛋白的纯化

将基因突变型（α９９,β８２位Ｌｙｓ－Ｃｙｓ）血红蛋白在ｐＢＶ２２０载体中诱导表达,表达产物达细菌总蛋白的２０％左右。该表达产物以包涵体形式存在,包涵体经洗涤后,用８ｍｏｌ／Ｌ尿素溶解,先用Ｑ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ Ｆａｓｔ Ｆｌｏｗ阴离子交换纯化,再经Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ－１００凝胶过滤纯化。纯化产物经复性,具有与氧结合的能力。     

大剂量照射后的放射性肺炎

近年来,随着放射治疗学的进展,大剂量全身或上半身照射已用于某些恶性肿瘤的临床治疗。     

知母皂苷AⅢ抗血栓作用研究

目的:确定知母皂苷AⅢ体内、外给药对大鼠血小板聚集和血栓形成的抑制作用。方法:比浊法测定血小板聚集,动-静脉旁路血栓模型测定大鼠在体血栓的形成。结果与结论:体外血小板聚集模型研究证明,知母皂苷AⅢ可以抑制由ADP、胶原和凝血酶诱导的大鼠血小板的聚集,并呈剂量效应。体内给药同样可以有效抑制血小板的聚集率,当给药剂量达到40 mg/kg.d-1时对血小板聚集的抑制率可以达到26.7%。动-静脉旁路血栓形成实验结果显示,知母皂苷AⅢ体内给药可减小血栓的湿重和干重,说明知母皂苷AⅢ体内给药具有抗血栓的作用。知母皂苷AⅢ体内给药不影响出凝血时间。推测其抗血栓形成的功效可能是通过抑制血小板的黏附、聚集和活化而实现的。     

单克隆抗体在骨髓体外净化中应用

急性白血病是一种血液恶性肿瘤疾病,虽然近代联合化疗的进展能够使急淋和急非淋的完全缓解率分别达到80～90％和60～80％以上,但五年无病生存率只有10～20％左右,而骨髓移植可以通过预处理摧毁白血病组织并重建造血,是治疗急性白血病的一种有效措施,其中异基因型骨髓移植(Allo-BMT)可使50～70％的急性白血病患者获得长期无白血病生存,而自身骨髓移植(ABMT)也可达到30～45％的良好效果,且没有Allo-BMT的供髓困难问题以及移植物抗宿主病(GVHD)的发生。但是ABMT中存在着一个最主要的问题——回输自身骨髓中残存白血病细胞,这是导致ABMT后白血病复发率显著增高的重要因素,因为ABMT时至少需要10~(10)个有核细胞,其中白血病细胞约占0.1％,因此含有10~7个白血病细胞足以导致移植后白血病复发,这是近年来开展体外净化工作的理论根据。所谓体外净化(Purging invitro)就是指通过某种技术和方法在体外清除白血病患者缓解期的自体骨髓或外周血中残存的白血病干/祖细胞(L-CFU)而保留正常造血细胞,使病人接受大剂量放化疗的预处理后能重建造血及免疫功能。近年来有人将Allo-BMT中去除T细胞的体外过程也称为体外净化,本文不包括这一过程。体外净化方法很多,其中包括(1)物理学方法如速度或密度梯度离心法、温热法、冷融法以及近年开展的逆流淘洗离心法等;(2)化学制剂法,主要是环磷酰胺衍生物(4-HC,ASTA-Z-7557等)应用;(3)免疫学方法,主要是单克隆抗体(McAb)及免疫毒素的应用;(4)生物学方法如LAK细胞、干扰素、肿瘤坏死因子以及胎肝低分子肿瘤抑制物的应用。本文就单克隆抗体在体外净化骨髓残存白血病细胞的近期有关文献综合报道如下:     

粒细胞输注及其在急性放射病治疗中的应用

粒细胞输注已在急性放射病的实验研究与临床实践中广为应用。     

骨髓移植后的肝静脉闭塞病

肝静脉闭塞病是一种以肝小静脉纤维性闭塞为主要病理改变的疾病。骨髓移植后肝静脉闭塞病是近年来才被逐渐认识的一种合并症,因其发生率较高且多为致死性的,是影响骨髓移植疗效的主要因素之一。鉴于国内尚无系统报道,本文就骨髓移植后肝静脉闭塞病的发病因素和机理、临床表现、病理学改变、诊断和防治等作一概要介绍。     

血小板生成素受体信号转导通路研究进展

血小板生成素（11PO）是一种重要的细胞因子，不仅在巨核细胞增殖、成熟和血小板产生中发挥主要的调控作用，而且参与造血干细胞自我更新和分化的调节。TPO与其受体c-Mpl结合后，c-Mpl形成同源二聚体，激活JAK／STAT、Shc／Ras／MAPK、PI3K／Akt等信号通路，引发一系列生理效应。本文主要对TPO、TPO受体蛋白的结构及其介导的信号转导通路等方面的研究进展作一综述。     

SSH方法分离大剂量照射后小鼠骨髓差异表达EST序列

目的 为探讨骨髓辐射损伤的分子机理，研究了整体照射条件下，辐射前后骨髓基因表达的变化。方法 小鼠7Gyγ射线照射后4h提取骨髓总RNA为实验方(tester)，对照组动物骨髓总RNA为驱动方(driver)；实验方、驱动方总RNA由SMART cDNA合成方法合成双链cDNA，进而由抑制消减杂交(SSH)方法获得消减杂交产物．消减杂交产物克隆到T载体建立消减文库；对部分克隆进行杂交筛选及序列比对。结果 消减杂交文库挑取800个克隆进行PCR扩增，阳性率约为86％；部分克隆经两轮杂交筛选获得14个差异片段；7个差异片段与鼠EST库已有序列高度相似，其余7个差异片段可能是新的EST序列。结论 大剂量照射后小鼠骨髓cDNA消减文库的建立以及部分差异表达EST的验证为进一步研究辐射相关差异表达基因奠定基础。     

宫血宁对小鼠骨髓细胞因子表达的影响

目的：探索宫血宁口服给药对小鼠骨髓造血细胞细胞因子表达的影响。方法：基因芯片法分析小鼠骨髓中细胞因子及其受体的表达。结果：通过比较给药组与对照组小鼠骨髓cDNA与80条基因片段的杂交信号强弱，发现有17条基因在给药组的小鼠骨髓细胞中表达升高，这17条表达差异的基因涉及到造血、炎症、免疫与应激四个方面。结论：重楼皂甙在体内不仅具有激活成熟造血细胞的作用（如诱导血小板聚集），还能增加骨髓细胞造血因子的表达，促进外周血白细胞和血小板的生成；参与局部炎症组织的修复；增强小鼠的体液免疫和细胞免疫作用。