氯化三乙基锡对体外培养大鼠C6胶质瘤细胞的增殖抑制作用

目的：探讨氯化三乙基锡（TETC）对体外培养大鼠C6胶质瘤细胞的增殖抑制作用及其机制,为胶质瘤治疗提供实验依据。方法：采用MTT法检测0.5、1.0和2.0 μmol/L TETC对大鼠C6胶质瘤细胞作用24和48 h后细胞增殖抑制率,采用Hoechest33258染色荧光显微镜观察0.5、1.0和2.0 μmol/L TETC作用48 h后 C6胶质瘤细胞核的形态学变化,采用流式细胞术(FCM)检测0.5、1.0和2.0 μmol/L> TETC作用48 h后 C6胶质瘤细胞周期和凋亡。结果：0.5、1.0和2.0 μmol/L TETC在体外可抑制C6胶质瘤细胞增殖,24 h抑制率分别为7.92％、9.51％和19.03％;48 h抑制率分别为15.62％、36.16％和41.92％,存在剂量依赖性和时间依赖性上升趋势,48 h抑制率在各剂量组间及各剂量组与对照组间比较差异有显著性（P<0.05或P<0.01）。荧光显微镜显示TETC作用C6胶质瘤细胞48 h后,细胞呈现核浓缩和碎裂的凋亡形态学改变。1.0和2.0 μmol/L TETC作用C6胶质瘤细胞48 h后,G₀/G₁期细胞比例明显高于对照组（P<0.05）,S期细胞比例明显低于对照组（P<0.05
）,细胞凋亡比例明显高于对照组（P<0.05）。结论：TETC对大鼠C6胶质瘤细胞有增殖抑制作用,通过细胞周期阻滞及诱导凋亡可能是TETC抑制C6胶质瘤细胞增殖的作用机制。     

甲基汞对肺癌细胞的增殖抑制作用

目的探讨甲基汞对小鼠Lewis肺癌细胞的增殖抑制作用。方法采用MTT比色法。对照组仅加培养液;顺铂组、As2O3组、甲基汞组分别加入不同浓度的顺铂、As2O3、甲基汞,用DG-3022A型酶联免疫检测仪测定光密度(A)值,计算增殖抑制率,并以倒置光学显微镜观察各组Lewis肺癌细胞生长密度及形态变化。结果甲基汞对小鼠Lewis肺癌细胞有较强的增殖抑制作用,并存在着时间和剂量效应关系,而且同一时间各浓度之间、同一浓度各时间之间均存在显著性差异(P<0·001);甲基汞的增殖抑制作用强于顺铂和As2O3,起效浓度较后两者低,发挥作用较后两者快。结论甲基汞对小鼠Lewis肺癌细胞有增殖抑制作用,并存在着时间和剂量效应关系,其增殖抑制作用强于顺铂和As2O3。     

豚鼠淋巴结基质祖细胞的实验研究

豚鼠淋巴结单个核细胞体外单层培养形成CFU—F集落,其种植的细胞数与成集落数呈良好的线性关系;淋巴结基质祖细胞的Do值为2.8Gy,n值1.5;低浓度(10μg/ml)PHA对集落形成有一定的刺激效应,高浓度(40μg/ml)可抑制集落的形成;经对集落大小、所含细胞数及密度进行比较,说明CFU—F是非均质的,可能因存在不同的亚群。     

宫内接触氯化甲基汞对发育阶段小鼠学习记忆能力和海马神经元超微结构的影响

目的　研究宫内接触氯化甲基汞对发育阶段小鼠学习记忆能力及海马神经元超微结构的影响.方法　对妊娠7～10天的小鼠每天灌胃给予0和4mg kgbw氯化甲基汞。以出生6周龄仔鼠进行学习记忆能力测试及透射电镜技术观察宫内接触氯化甲基汞对发育阶段小鼠学习记忆能力及海马神经元超微结构的影响。结果　氯化甲基汞暴露组学习记忆能力显著低于对照组(P <0 . 0 5 )。超微结构显示海马神经元细胞膜结构不清,部分核膜消失,核膜皱缩,核孔不清,染色质淡染;线粒体肿胀变大、粗面内质网扩张、空泡变性,核糖体减少;轴突环出现分层;有髓神经纤维脱髓鞘、板状分离。结论　甲基汞可致小鼠学习记忆障碍和海马神经元超微结构改变;宫内接触氯化甲基汞引起海马神经元超微结构的改变与小鼠学习记忆障碍密切相关。     

氯化甲基汞对NB4和K562白血病细胞凋亡及增殖的影响

目的：研究氯化甲基汞（MMC）对NB4和K562白血病细胞凋亡及增殖的影响。方法：NB4、K562细胞经1.25、2.50、5.00、10.00和20.00 μmol•L^-1MMC、三氧化二砷（ATO）分别作用0、6、12、24、48和72 h,采用MTT法测定细胞的存活率,采用Hoechst 33258染色后荧光镜下观察细胞凋亡情况。结果： NB4和K562细胞接触10 μmol•L^-1 MMC 24 h后,细胞存活率分别为22.0%和70.0%,与对照比较差异有显著性（P值分别为0.000和0.014）;NB4和K562细胞接触10 μmol•L^-1ATO 24 h后,细胞存活率分别为24.4 %和52.0%（P值分别为0.001和0.000）;荧光镜检呈现明显的凋亡图像。MMC与ATO对NB4、K562细胞诱导凋亡及抑制增殖作用相似。结论：MMC能诱导NB4和K562细胞凋亡,抑制其增殖,并呈时间剂量依赖性。     

长期接触低剂量氯化甲基汞对发育阶段大鼠小脑蛋白激酶C活性的影响

目的：探讨氯化甲基汞(mthylmercury chloride,MMC)对发育大鼠小脑组织蛋白激酶C(PKC )活性的影响。方法：实验组母鼠从妊娠前90 d至仔鼠出生后30 d连续喂饲含有不同剂量MMC（0.75、1.50和3.00 mg·kg^-1）的普通饲料,取其生后(Postnatal day, PND)3、7、14、21和30 d仔鼠小脑组织提取胞浆和胞膜PKC。采用改良Takai法观察MMC对发育大鼠小脑PKC活性的影响。结果：实验组生后不同时间仔鼠小脑组织胞浆和胞膜PKC活性均高于相应对照组,其中实验组Ⅰ（0.75 mg·kg^-1 MMC）PND　3、7和14 d,实验组Ⅱ (1.5 mg·kg^-1 MMC)和实验组Ⅲ (3.0 mg·kg^-1 MMC)仔鼠小脑组织胞浆和胞膜PKC活性明显高于对照组（P<0.05)。结论：MMC可能通过影响大鼠脑发育过程中PKC活性介导其神经毒性作用。     

氯化甲基汞对小鼠器官氚标胸腺嘧啶核苷掺入的影响

本文通过测定小鼠各器官氚标胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)的掺入,研究氯化甲基汞对不同器官DNA合成的影响。实验结果表明,小鼠经腹腔注射2和12Pμg/g体重氯化甲基汞明显抑制睾丸、肝和小肠~3H-TdR的掺入,这有助于解释氯化甲基汞的诱变和致畸作用。氯化甲基汞对脾和胸腺~3H-TdR的掺入则具有促进作用,其机制尚不清楚。可能与氯化甲基汞损伤细胞膜、影响细胞整合和活化DNA前体物的转运有关。     

氯化甲基汞对小鼠生殖细胞的毒性作用

本实验一次灌胃给予小鼠不同剂量(0、5、10和15mg/kg体重)氯化甲基汞,于染毒后第5、10和15天分别处死各组部分小鼠,检查其精子总数、形态及睾丸病理改变,实验结果表明,给予氯化甲基汞小鼠精子数目减少,精子畸形率增高,睾丸呈现不同程度的病理改变。该实验从形态学方面证实氯化甲基汞对小鼠雄性生殖细胞具有明显的毒性作用。     

慢性甲基汞中毒对大鼠垂体和睾丸内分泌功能的影响

本文采用Wistar雄性大鼠,饲喂含甲基汞饲料102天后,观察其垂体和睾丸内分泌功能变化。结果发现,饲喂甲基汞饲料大鼠血清PRL和TSH水平明显增高,而血清LH、FSH和睾丸酮(TS)水平变化不明显;但上述各指标,1ppm组较2ppm和4ppm组增高明显。提示,慢性甲基汞中毒可刺激垂体PRL和TSH合成和分泌,而对垂体-性腺轴影响不明显;另外,低剂量(1ppm组)较高剂量(2ppm和4ppm组)刺激作用明显。